技术摘要：
本发明涉及一种应用高效液相色谱法检测复方氨基酸注射液中N,N’‑二乙酰‑L‑胱氨酸含量的方法，它包括以下步骤：流动相的配制、对照品溶液的配制、供试品溶液的配制、色谱仪参数设定、对照品溶液检测、供试品溶液检测与供试品溶液中N,N’‑二乙酰‑L‑胱氨酸的含量计  全部
背景技术：
N,N’-二乙酰-L-胱氨酸是复方氨基酸注射液中N-乙酰半胱氨酸的氧化降解杂质， 监测复方氨基酸注射液中该杂质的含量可以为优化工艺参数，保证产品质量提供依据。在 乙酰半胱氨酸原料药及乙酰半胱氨酸单方制剂(如乙酰半胱氨酸注射液及乙酰半胱氨酸吸 入制剂)中，该杂质的定量检测方法有报道，多采用离子对色谱法。目前，尚未见复方氨基酸 注射液中N,N’-二乙酰-L-胱氨酸检测方法的报道。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种重现性好且更加经济的应 用高效液相色谱法检测复方氨基酸注射液中N,N’-二乙酰-L-胱氨酸含量的方法。 按照本发明提供的技术方案，所述检测复方氨基酸注射液中N,N’-二乙酰-L-胱氨 酸(杂质C)含量的方法包括以下步骤： 步骤一、先称取二水合磷酸二氢钠后加水配制成浓度为20mM的磷酸二氢钠缓冲 液，再用磷酸将磷酸二氢钠缓冲液的pH值调节至2.1～2.5，最后将磷酸二氢钠缓冲液与乙 腈按照体积比为(93～95):(7～5)混合形成流动相； 步骤二、N,N’-二乙酰-L-胱氨酸加水稀释成浓度为0.6～20mg/L后作为对照品溶 液； 步骤三、复方氨基酸注射液加水进行稀释后作为供试品溶液； 步骤四、高效液相色谱仪的色谱柱产品参数为150mm×4.6mm、5μm的C18色谱柱，柱 温设置为33～37℃、检测波长设置为210nm、流速设置为0.9～1.1ml/min、进样器温度设置 为4℃、进样体积设置为10μL； 步骤五、采用高效液相色谱仪对对照品溶液进行检测并输出对应的色谱图，记下 N,N’-二乙酰-L-胱氨酸色谱峰的位置，并记录N,N’-二乙酰-L-胱氨酸色谱峰的峰面积； 步骤六、采用高效液相色谱仪对供试品溶液进行检测并输出对应的色谱图，记录 供试品溶液中N,N’-二乙酰-L-胱氨酸色谱峰的峰面积； 步骤七、按照外标法计算供试品中N,N’-二乙酰-L-胱氨酸的含量。 作为优选，步骤一中，磷酸二氢钠缓冲液的pH值调节后用0.45μm滤膜对所述缓冲 液进行过滤。 作为优选，步骤一中，用磷酸调节磷酸二氢钠缓冲液的pH值至2.3。 作为优选，步骤一中，将磷酸二氢钠缓冲液与乙腈按照体积比为94:6混合形成对 照品溶液。 3 CN 111579704 A 说　明　书 2/7 页 作为优选，步骤三中，复方氨基酸注射液稀释倍数为5倍。 作为优选，步骤四中，流速设置为1.0ml/min，色谱柱的柱温设置为35℃。 作为优选，步骤四中，选用产品参数为150mm×4.6mm、5μm的C18色谱柱。 本发明与离子对流动相系统相比，方法重现性好，无需使用昂贵的离子对试剂，更 经济。 附图说明 图1是实施例1中对照品工作溶液的色谱图。 图2是实施例1中供试品溶液的色谱图。 图3是实施例2中供试品溶液的色谱图。 图4是实施例3中供试品溶液的色谱图。 图5是实施例4中供试品溶液的色谱图。 图6是实施例5中供试品溶液的色谱图。 图7是实施例6中供试品溶液的色谱图。 图8是实施例7中供试品溶液的色谱图。 图9是实施例8中供试品溶液的色谱图。 图10是实施例9中供试品溶液的色谱图。