技术摘要：
本发明涉及鹅去氧胆酸衍生物的制备方法。具体地，本发明公开了式(Ⅵ)所示化合物3α‑羟基‑亚乙基‑7‑酮‑5β‑胆‑24‑烷酰胺经一锅法还原制备得到式(Ⅴ)所示化合物3α,7α‑二羟基‑6α‑乙基‑5β‑胆烷酸，再经成盐结晶得到高纯度奥贝胆酸钠盐、钾盐、镁盐和钙盐 全部
背景技术：
法尼醇X受体(Farnesoid X Receptor，FXR)是核受体(Nuclear Receptor)家族的 一员，它主要表达在肝脏、小肠等肠道系统之中，参与胆汁酸代谢与胆固醇代谢等环节。胆 汁酸具有多种生理功能，在脂肪的吸收、转运、分配及胆固醇的动态平衡等过程中发挥重要 作用。法尼醇X受体作为鹅去氧胆酸等胆汁酸的受体，通过调控参与胆汁酸代谢的基因表达 来维持胆汁酸在体内的平衡。另外，法尼醇X受体在体内葡萄糖的动态平衡和胰岛素抵抗等 方面也发挥着重要功能。因此，法尼醇X受体激动剂有望开发成治疗非酒精性脂肪肝炎、非 酒精性脂肪肝病、胆结石、原发性胆汁性肝硬化、肝硬化、肝纤维化、糖尿病、高胆固醇血症、 动脉粥样硬化、肥胖、高甘油三酯血症等的药物。其中，化合物奥贝胆酸(Obeticholic acid)是选择性的法尼醇X受体激动剂，化学名为3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸(3α, 7α-dihydroxy-6α-ethyl-5β-cholan-24-oic acid)，具有治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)、 非酒精性脂肪肝炎(NASH)以及非酒精性脂肪肝相关疾病中的用途。目前奥贝胆酸用于原发 性胆汁性肝硬化的适应症已被批准上市，在NASH领域处于III期临床研究中。 专利WO02072598中公开了以3α-二羟基-7-酮基-5β-胆-24-酸为起始原料，经6位 烷基化等步骤合成鹅去氧胆酸衍生物的方法，但是该专利中的合成方法存在很多不足，如 所有中间体和产品需要色谱柱纯化、反应总收率极低(只有3.5％)、反应步骤使用了致癌试 剂等。 另外，专利WO2006122977公开了以3α-二羟基-7-酮基-5β-胆-24-酸为起始原料， 经Aldol缩合等步骤合成得到奥贝胆酸的方法，但是，该合成方法中存在中间体不易分离、 反应步骤长、构型转化步骤收率低，以及终产品杂质不易除去等缺点。 因此，本领域仍需要开发合成鹅去氧胆酸盐的更佳方法。
技术实现要素：
在本发明的第一方面中，提供了一种式(A)所示化合物的合成方法： 6 CN 111718388 A 说 明 书 2/16 页 其中，n为1或2，M为NH 4 、碱金属离子、碱土金属离子或过渡金属离子； 所述的方法包括下述步骤： (a)在惰性溶剂中，式(Ⅵ)化合物通过“一锅法”进行催化氢化，并用金属氢化物还 原剂还原 得到式(Ⅴ)化合物； (b)用式(Ⅴ)化合物在溶剂中成盐结晶，得到式(A)化合物； 其中R1和R2分别选自氢、羟基、甲基、乙基、甲氧基，或R1和R2与其相连的N原子共同 构成取代或未取代的5-7元杂环，其中，所述的杂环中包括1-3个选自下组的杂原子：N、O或 S。在另一优选例中，所述的R 1和R 2共同形成选自下组的结构：-CH 2CH 2CH 2CH 2-、- CH2CH2OCH2CH2-。 在另一优选例中，所述的催化氢化与金属氢化物还原剂还原“一锅法”过程中，中 间产物不经分离纯化。 在另一优选例中，步骤(a)包括：在无水甲醇中，用式(Ⅵ)化合物进行催化氢化反 应，然后加入水和金属氢化物进行反应，得到式(Ⅴ)化合物。 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 7 CN 111718388 A 说 明 书 3/16 页 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 在另一优选例中，式(A)所示的化合物选自： 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物具有很高的纯度，优选纯度大于99.0％， 进一步优选纯度大于99.5％，特别优选纯度大于99.7％。 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物含有的二聚体有关物质式(B)低于0.1％， 特别优选低于0.05％。 8 CN 111718388 A 说 明 书 4/16 页 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物含有的异构体有关物质式(C)低于0.1％， 较优选低于0.05％，特别优选未检出。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的惰性溶剂选自下组：C1-C4的醇、水，或 其组合。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的醇选自下组：甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁 醇，或其组合。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的惰性溶剂选自下组：无水甲醇，或甲 醇：水(v/v)＝1：100～100：1的混合溶剂，优选为甲醇：水(v/v)＝0.5：1～5：1。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的催化氢化在钯/碳催化剂存在下，在通氢气条 件下进行。 在另一优选例中，步骤(a)包括：在无水甲醇中，用式(Ⅵ)化合物进行催化氢化反 应，然后加入水和金属氢化物进行反应，得到式(Ⅴ)化合物。 在另一优选例中，步骤(a)的反应温度是5～150℃，优选范围30～120℃，特别优选 50～100℃。 在另一优选例中，步骤(a)中催化加氢的压力是1～20atm，优选范围2～10atm。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物还原剂包括硼氢化物、三叔丁氧 基氢化铝锂，其中，优选硼氢化物，进一步优选自硼氢化钠和硼氢化钾，特别优选硼氢化钠。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物与式(Ⅵ)化合物的摩尔比为5：1 ～1：1，进一步优选3：1～1：1，特别优选为2:1。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物还原在碱性条件下进行。优选地， 所述的碱性条件是在氢氧化钠或氢氧化钾存在下。 在另一优选例中，所述的氢氧化钠或氢氧化钾的加入量与式(Ⅵ)化合物的摩尔比 为50：1～1：5，进一步优选30：1～10：1。 在另一优选例中，所述的方法还包括：通过以下方法制备式(Ⅵ)化合物： a)用式(Ⅶ)化合物与 或其盐酸盐进行缩合，得到式(Ⅵ)化合物； 9 CN 111718388 A 说 明 书 5/16 页 或 b)在路易酸存在下，式(Ⅷ)化合物与乙醛进行Aldol缩合，得到式(Ⅵ)化合物； 其中，各基团的定义如本发明第一方面中所述。 在另一优选例中，所述的化合物 或其盐酸盐选自下组：氯化铵、羟胺盐酸盐、 甲胺盐酸盐、N,O-二甲基羟胺盐酸盐，或其组合；较佳地为氯化铵。 在另一优选例中，步骤a)中，所述的化合物 的加入量与式(Ⅶ)化合物的摩尔 比为10：1～1：1，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1～1：1。 在另一优选例中，所述的步骤a)中的缩合剂选自下组：N,N '-羰基二咪唑(CDI)、 EDCl、DIC、DCC、HATU、HBTU、TBTU和PyBOP；优选HATU、HBTU和PyBOP；特别优选PyBOP。 在另一优选例中，步骤a)中，所述的缩合剂的加入量与式(Ⅶ)化合物的摩尔比为 10：1～1：5，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1。 在另一优选例中，所述的步骤a)中还包括加入活化剂的步骤，所述的活化剂选自 下组：DMAP、HOBt、4-PPY、DIPEA和Et3N；优选DIPEA。 在另一优选例中，所述的步骤a)在非质子性溶剂中进行；较佳地，所述的非质子性 溶剂选自下组：二氯甲烷、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜，或其组合；优选N,N-二甲基 甲酰胺。 在另一优选例中，所述的步骤b)在溶剂中进行，且所述的溶剂选自下组：二氯甲 烷、乙腈、二甲亚砜、四氢呋喃、1,4-二氧六环，或其组合；优选二氯甲烷。 在另一优选例中，所述的步骤b)中的路易斯酸选自下组：盐酸、乙酸、对甲苯磺酸、 三氟化硼乙醚溶液，三氟化硼乙腈溶液，或其组合；优选为三氟化硼乙醚溶液。 在另一优选例中，步骤b)中，所述的路易斯酸的加入量与式(Ⅷ)化合物的摩尔比 10 CN 111718388 A 说 明 书 6/16 页 为10：1～1：3，进一步优选4：1～2：1。 在另一优选例中，所述方法还包括步骤：通过以下方法制备所述的式(Ⅷ)化合物： c)用式(Ⅸ)化合物和化合物 或其盐酸盐进行缩合反应 得到式(Ⅹ)化合物； d)在碱存在下，用式(Ⅹ)化合物和三甲基氯硅烷反应，得到式(Ⅷ)化合物； 其中，各基团的定义如本发明第一方面中所述。 在另一优选例中，所述的步骤c)中，所述的缩合剂选自下组：N,N '-羰基二咪唑 (CDI)、EDCl、DIC、DCC、HATU、HBTU、TBTU、PyBOP，或其组合；优选HATU、HBTU、PyBOP，或其组 合；更优选为PyBOP。 在另一优选例中，步骤c)中，所述的化合物 的加入量与式(Ⅸ)化合物的摩尔 比为10：1～1：1，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1～1：1。 在另一优选例中，步骤c)中，所述的缩合剂的加入量与式(Ⅸ)化合物的摩尔比为 10：1～1：5，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1。 在另一优选例中，所述的步骤c)中还包括加入活化剂的步骤，所述的活化剂选自 下组：DMAP、HOBt、4-PPY、DIPEA和Et3N；优选DIPEA。 在另一优选例中，所述的步骤c)在非质子性溶剂中进行；较佳地，所述的非质子性 溶剂选自下组：二氯甲烷、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜，或其组合；优选N,N-二甲基 甲酰胺。 在另一优选例中，所述的步骤d)中的碱选自下组：氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙 醇钠、叔丁醇钾、氢化钠、二异丙基氨基锂(LDA)，或其组合；优选二异丙基氨基锂。 在另一优选例中，步骤d)中，所述的三甲基氯硅烷的加入量与式(Ⅹ)化合物的摩 尔比为20：1～1：1，进一步优选15：1～1：1，特别优选为10：1。 11 CN 111718388 A 说 明 书 7/16 页 在另一优选例中，步骤d)中，所述的碱的加入量与式(Ⅹ)化合物的摩尔比为20：1 ～1：1，进一步优选15：1～1：1，特别优选为10：1。 在另一优选例中，所述的步骤d)在选自下组的溶剂中进行；二氯甲烷、四氢呋喃、 乙醚、甲苯、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或其混合溶剂，更优选地为 四氢呋喃。 在另一优选例中，所述的成盐结晶包括： (b1)将步骤(a)得到的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和纯水混合，加入氢 氧化钠水溶液，搅拌至基本溶清，得到澄清溶液； (b2)向所述的澄清溶液中缓缓滴加含Mg2 或Ca2 的水溶液，继续搅拌直至产生沉 淀； (b3)对所述的沉淀进行过滤，洗涤，真空干燥，得到式(A)化合物。 在另一优选例中，所述的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和纯水的重量比为 40：1～1：5，进一步优选为10：1～1：3，特别优选为5：1。 在另一优选例中，所述的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和氢氧化钠水溶液 的重量比为10：1～1：10，进一步优选为3：1～1：5，特别优选为1：0.97～1：3。 在另一优选例中，所述的氢氧化钠水溶液的浓度为0.5～5mol.L-1，进一步优选为2 ～3mol.L-1，特别优选为2.52mol.L-1。 在另一优选例中，所述的含金属离子Mg2 的水溶液的浓度为0.1～10，进一步优选 为0.3～5，特别优选为0.5～2mol.L-1。 在另一优选例中，所述的含金属离子Ca2 的水溶液的浓度为0.1～20，进一步优选 为0.5～10，特别优选为2～5mol.L-1。 在另一优选例中，所述的成盐结晶包括： (b4)将步骤(a)得到的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸溶于甲醇中，缓慢滴 入氢氧化钠甲醇溶液，搅拌至基本溶清，得到澄清溶液； (b5)对所述的澄清溶液进行浓缩至干，然后加入丙酮浓缩带干，得到固体残留物； (b6)向所述的残留物中加入丙酮打浆，过滤并真空干燥，得到式(A)化合物。 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具 体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在 此不再一一赘述。
本发明涉及鹅去氧胆酸衍生物的制备方法。具体地，本发明公开了式(Ⅵ)所示化合物3α‑羟基‑亚乙基‑7‑酮‑5β‑胆‑24‑烷酰胺经一锅法还原制备得到式(Ⅴ)所示化合物3α,7α‑二羟基‑6α‑乙基‑5β‑胆烷酸，再经成盐结晶得到高纯度奥贝胆酸钠盐、钾盐、镁盐和钙盐 全部
背景技术：
法尼醇X受体(Farnesoid X Receptor，FXR)是核受体(Nuclear Receptor)家族的 一员，它主要表达在肝脏、小肠等肠道系统之中，参与胆汁酸代谢与胆固醇代谢等环节。胆 汁酸具有多种生理功能，在脂肪的吸收、转运、分配及胆固醇的动态平衡等过程中发挥重要 作用。法尼醇X受体作为鹅去氧胆酸等胆汁酸的受体，通过调控参与胆汁酸代谢的基因表达 来维持胆汁酸在体内的平衡。另外，法尼醇X受体在体内葡萄糖的动态平衡和胰岛素抵抗等 方面也发挥着重要功能。因此，法尼醇X受体激动剂有望开发成治疗非酒精性脂肪肝炎、非 酒精性脂肪肝病、胆结石、原发性胆汁性肝硬化、肝硬化、肝纤维化、糖尿病、高胆固醇血症、 动脉粥样硬化、肥胖、高甘油三酯血症等的药物。其中，化合物奥贝胆酸(Obeticholic acid)是选择性的法尼醇X受体激动剂，化学名为3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸(3α, 7α-dihydroxy-6α-ethyl-5β-cholan-24-oic acid)，具有治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)、 非酒精性脂肪肝炎(NASH)以及非酒精性脂肪肝相关疾病中的用途。目前奥贝胆酸用于原发 性胆汁性肝硬化的适应症已被批准上市，在NASH领域处于III期临床研究中。 专利WO02072598中公开了以3α-二羟基-7-酮基-5β-胆-24-酸为起始原料，经6位 烷基化等步骤合成鹅去氧胆酸衍生物的方法，但是该专利中的合成方法存在很多不足，如 所有中间体和产品需要色谱柱纯化、反应总收率极低(只有3.5％)、反应步骤使用了致癌试 剂等。 另外，专利WO2006122977公开了以3α-二羟基-7-酮基-5β-胆-24-酸为起始原料， 经Aldol缩合等步骤合成得到奥贝胆酸的方法，但是，该合成方法中存在中间体不易分离、 反应步骤长、构型转化步骤收率低，以及终产品杂质不易除去等缺点。 因此，本领域仍需要开发合成鹅去氧胆酸盐的更佳方法。
技术实现要素：
在本发明的第一方面中，提供了一种式(A)所示化合物的合成方法： 6 CN 111718388 A 说 明 书 2/16 页 其中，n为1或2，M为NH 4 、碱金属离子、碱土金属离子或过渡金属离子； 所述的方法包括下述步骤： (a)在惰性溶剂中，式(Ⅵ)化合物通过“一锅法”进行催化氢化，并用金属氢化物还 原剂还原 得到式(Ⅴ)化合物； (b)用式(Ⅴ)化合物在溶剂中成盐结晶，得到式(A)化合物； 其中R1和R2分别选自氢、羟基、甲基、乙基、甲氧基，或R1和R2与其相连的N原子共同 构成取代或未取代的5-7元杂环，其中，所述的杂环中包括1-3个选自下组的杂原子：N、O或 S。在另一优选例中，所述的R 1和R 2共同形成选自下组的结构：-CH 2CH 2CH 2CH 2-、- CH2CH2OCH2CH2-。 在另一优选例中，所述的催化氢化与金属氢化物还原剂还原“一锅法”过程中，中 间产物不经分离纯化。 在另一优选例中，步骤(a)包括：在无水甲醇中，用式(Ⅵ)化合物进行催化氢化反 应，然后加入水和金属氢化物进行反应，得到式(Ⅴ)化合物。 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 7 CN 111718388 A 说 明 书 3/16 页 在另一优选例中，式(Ⅵ)所示化合物为如下化合物： 在另一优选例中，式(A)所示的化合物选自： 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物具有很高的纯度，优选纯度大于99.0％， 进一步优选纯度大于99.5％，特别优选纯度大于99.7％。 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物含有的二聚体有关物质式(B)低于0.1％， 特别优选低于0.05％。 8 CN 111718388 A 说 明 书 4/16 页 在另一优选例中，得到的式I～IV化合物含有的异构体有关物质式(C)低于0.1％， 较优选低于0.05％，特别优选未检出。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的惰性溶剂选自下组：C1-C4的醇、水，或 其组合。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的醇选自下组：甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁 醇，或其组合。 在另一优选例中，所述的步骤(a)中，所述的惰性溶剂选自下组：无水甲醇，或甲 醇：水(v/v)＝1：100～100：1的混合溶剂，优选为甲醇：水(v/v)＝0.5：1～5：1。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的催化氢化在钯/碳催化剂存在下，在通氢气条 件下进行。 在另一优选例中，步骤(a)包括：在无水甲醇中，用式(Ⅵ)化合物进行催化氢化反 应，然后加入水和金属氢化物进行反应，得到式(Ⅴ)化合物。 在另一优选例中，步骤(a)的反应温度是5～150℃，优选范围30～120℃，特别优选 50～100℃。 在另一优选例中，步骤(a)中催化加氢的压力是1～20atm，优选范围2～10atm。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物还原剂包括硼氢化物、三叔丁氧 基氢化铝锂，其中，优选硼氢化物，进一步优选自硼氢化钠和硼氢化钾，特别优选硼氢化钠。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物与式(Ⅵ)化合物的摩尔比为5：1 ～1：1，进一步优选3：1～1：1，特别优选为2:1。 在另一优选例中，步骤(a)中，所述的金属氢化物还原在碱性条件下进行。优选地， 所述的碱性条件是在氢氧化钠或氢氧化钾存在下。 在另一优选例中，所述的氢氧化钠或氢氧化钾的加入量与式(Ⅵ)化合物的摩尔比 为50：1～1：5，进一步优选30：1～10：1。 在另一优选例中，所述的方法还包括：通过以下方法制备式(Ⅵ)化合物： a)用式(Ⅶ)化合物与 或其盐酸盐进行缩合，得到式(Ⅵ)化合物； 9 CN 111718388 A 说 明 书 5/16 页 或 b)在路易酸存在下，式(Ⅷ)化合物与乙醛进行Aldol缩合，得到式(Ⅵ)化合物； 其中，各基团的定义如本发明第一方面中所述。 在另一优选例中，所述的化合物 或其盐酸盐选自下组：氯化铵、羟胺盐酸盐、 甲胺盐酸盐、N,O-二甲基羟胺盐酸盐，或其组合；较佳地为氯化铵。 在另一优选例中，步骤a)中，所述的化合物 的加入量与式(Ⅶ)化合物的摩尔 比为10：1～1：1，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1～1：1。 在另一优选例中，所述的步骤a)中的缩合剂选自下组：N,N '-羰基二咪唑(CDI)、 EDCl、DIC、DCC、HATU、HBTU、TBTU和PyBOP；优选HATU、HBTU和PyBOP；特别优选PyBOP。 在另一优选例中，步骤a)中，所述的缩合剂的加入量与式(Ⅶ)化合物的摩尔比为 10：1～1：5，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1。 在另一优选例中，所述的步骤a)中还包括加入活化剂的步骤，所述的活化剂选自 下组：DMAP、HOBt、4-PPY、DIPEA和Et3N；优选DIPEA。 在另一优选例中，所述的步骤a)在非质子性溶剂中进行；较佳地，所述的非质子性 溶剂选自下组：二氯甲烷、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜，或其组合；优选N,N-二甲基 甲酰胺。 在另一优选例中，所述的步骤b)在溶剂中进行，且所述的溶剂选自下组：二氯甲 烷、乙腈、二甲亚砜、四氢呋喃、1,4-二氧六环，或其组合；优选二氯甲烷。 在另一优选例中，所述的步骤b)中的路易斯酸选自下组：盐酸、乙酸、对甲苯磺酸、 三氟化硼乙醚溶液，三氟化硼乙腈溶液，或其组合；优选为三氟化硼乙醚溶液。 在另一优选例中，步骤b)中，所述的路易斯酸的加入量与式(Ⅷ)化合物的摩尔比 10 CN 111718388 A 说 明 书 6/16 页 为10：1～1：3，进一步优选4：1～2：1。 在另一优选例中，所述方法还包括步骤：通过以下方法制备所述的式(Ⅷ)化合物： c)用式(Ⅸ)化合物和化合物 或其盐酸盐进行缩合反应 得到式(Ⅹ)化合物； d)在碱存在下，用式(Ⅹ)化合物和三甲基氯硅烷反应，得到式(Ⅷ)化合物； 其中，各基团的定义如本发明第一方面中所述。 在另一优选例中，所述的步骤c)中，所述的缩合剂选自下组：N,N '-羰基二咪唑 (CDI)、EDCl、DIC、DCC、HATU、HBTU、TBTU、PyBOP，或其组合；优选HATU、HBTU、PyBOP，或其组 合；更优选为PyBOP。 在另一优选例中，步骤c)中，所述的化合物 的加入量与式(Ⅸ)化合物的摩尔 比为10：1～1：1，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1～1：1。 在另一优选例中，步骤c)中，所述的缩合剂的加入量与式(Ⅸ)化合物的摩尔比为 10：1～1：5，进一步优选5：1～1：1，特别优选为2：1。 在另一优选例中，所述的步骤c)中还包括加入活化剂的步骤，所述的活化剂选自 下组：DMAP、HOBt、4-PPY、DIPEA和Et3N；优选DIPEA。 在另一优选例中，所述的步骤c)在非质子性溶剂中进行；较佳地，所述的非质子性 溶剂选自下组：二氯甲烷、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜，或其组合；优选N,N-二甲基 甲酰胺。 在另一优选例中，所述的步骤d)中的碱选自下组：氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙 醇钠、叔丁醇钾、氢化钠、二异丙基氨基锂(LDA)，或其组合；优选二异丙基氨基锂。 在另一优选例中，步骤d)中，所述的三甲基氯硅烷的加入量与式(Ⅹ)化合物的摩 尔比为20：1～1：1，进一步优选15：1～1：1，特别优选为10：1。 11 CN 111718388 A 说 明 书 7/16 页 在另一优选例中，步骤d)中，所述的碱的加入量与式(Ⅹ)化合物的摩尔比为20：1 ～1：1，进一步优选15：1～1：1，特别优选为10：1。 在另一优选例中，所述的步骤d)在选自下组的溶剂中进行；二氯甲烷、四氢呋喃、 乙醚、甲苯、1,4-二氧六环、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或其混合溶剂，更优选地为 四氢呋喃。 在另一优选例中，所述的成盐结晶包括： (b1)将步骤(a)得到的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和纯水混合，加入氢 氧化钠水溶液，搅拌至基本溶清，得到澄清溶液； (b2)向所述的澄清溶液中缓缓滴加含Mg2 或Ca2 的水溶液，继续搅拌直至产生沉 淀； (b3)对所述的沉淀进行过滤，洗涤，真空干燥，得到式(A)化合物。 在另一优选例中，所述的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和纯水的重量比为 40：1～1：5，进一步优选为10：1～1：3，特别优选为5：1。 在另一优选例中，所述的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸和氢氧化钠水溶液 的重量比为10：1～1：10，进一步优选为3：1～1：5，特别优选为1：0.97～1：3。 在另一优选例中，所述的氢氧化钠水溶液的浓度为0.5～5mol.L-1，进一步优选为2 ～3mol.L-1，特别优选为2.52mol.L-1。 在另一优选例中，所述的含金属离子Mg2 的水溶液的浓度为0.1～10，进一步优选 为0.3～5，特别优选为0.5～2mol.L-1。 在另一优选例中，所述的含金属离子Ca2 的水溶液的浓度为0.1～20，进一步优选 为0.5～10，特别优选为2～5mol.L-1。 在另一优选例中，所述的成盐结晶包括： (b4)将步骤(a)得到的3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆-24-酸溶于甲醇中，缓慢滴 入氢氧化钠甲醇溶液，搅拌至基本溶清，得到澄清溶液； (b5)对所述的澄清溶液进行浓缩至干，然后加入丙酮浓缩带干，得到固体残留物； (b6)向所述的残留物中加入丙酮打浆，过滤并真空干燥，得到式(A)化合物。 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具 体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在 此不再一一赘述。
