技术摘要：
本发明属于生物技术领域，具体涉及一株驴源短小芽孢杆菌及其在制备治疗驴驹腹泻的药物上的应用。本发明提供了一株自健康驴粪便中分离的短小芽孢杆菌，通过16s rDNA结合生理生化鉴定进一步确定，所述的短小芽孢杆菌命名为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)；通过研究得到  全部
背景技术：
驴驹腹泻是在一种常见疾病，多发于1～2月龄驴驹，主要表现为水样腹泻、脱水等 症状，致病菌、病毒、营养缺乏、消化不良等多种原因均可导致该病。驴驹大肠杆菌腹泻和换 料应激造成的腹泻较为常见，敏感抗生素治疗对于大肠杆菌腹泻有效但对换料应激型腹泻 无效，而且抗生素具有导致细菌耐药的潜在风险。也有用细菌疫苗预防该病的方法，但大肠 杆菌血清型众多，细菌疫苗的效果很难保证。 考虑到上述两种腹泻均涉及肠道内菌群的失衡，而益生菌具有抑制有害菌、调节 肠道菌群平衡、促进消化吸收、提高免疫力等优势，因此，具有应用潜力。短小芽孢杆菌和植 物乳杆菌均为中国农业部《饲料添加剂品种目录》中允许使用的微生物，适用范围是养殖动 物。一般认为，本动物来源的益生菌具有更好的应用价值，但国内的短小芽孢杆菌主要来源 于植物，仅刘宇(2019)报道了其分离到一株抑制金黄色葡萄球菌的驴源短小芽孢杆菌，但 未应用于驴驹腹泻的防治。 短小芽孢杆菌治疗动物腹泻的案例未见报道，仅见拌料长期饲喂，预防猪、鸡腹泻 的报道，如何快速起效是一大难题。申请号为CN201811453413.X的专利，将猪源短小芽孢杆 菌制剂，连续饲喂仔猪45天，降低腹泻率1 .2％。已授权的CN201410490006 .1、  CN201410360547.2、CN201310637594.2专利，将短小芽孢杆菌制剂，饲喂仔猪连续30天、  35 天、24天，腹泻率显著降低。已授权的CN201110416416.8专利，将牛源短小芽孢杆菌制剂，拌 料连续饲喂断奶仔猪30天，降低了腹泻率。已授权的CN200410042741.2专利，将短小芽孢杆 菌制剂，长期拌料饲喂猪和鸡，降低了腹泻率。目前，尚未见到短小芽孢杆菌对驴驹腹泻的 预防或治疗效果报道，也未见驴源短小芽孢杆菌防治动物腹泻的报道。 益生菌活菌制剂要转化为产品上市，必须有可控的产品质量标准，其中关键的检 测项是有效成分的含量，即益生菌的活菌数。众多获授权的专利无法转化为上市产品，是因 为没有建立每一种益生菌的计数检测方法，无法验证配方中有效活菌的添加量，导致质量 不可控。不能建立活菌制剂中每一种益生菌的活菌计数方法的难点是，常用培养基会生长 多种益生菌，难以分别培养。以短小芽孢杆菌为例，其在普通营养琼脂、LB培养基、MRS培养 基都能生长，而植物乳杆菌等兼性厌氧菌也是如此。单独培养芽孢菌的方法常见，就是通过 加热的方法，杀死不耐热菌，而保留芽孢，可进行培养、计数。目前，尚未见到某种培养基能 让植物乳杆菌在常规条件下生长而不生长短小芽孢杆菌。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明提供了一株自健康驴粪便中分离的短小芽孢杆菌，通过16s 3 CN 111548965 A 说　明　书 2/6 页 rDNA结合生理生化鉴定进一步确定，所述的短小芽孢杆菌命名为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)；通过研究得到本申请的短小芽孢杆菌对驴驹腹泻的预防或治疗有很好的效果。 最后将短小芽孢杆菌(CGMCC  No:18026)与市售的植物乳杆菌、葡萄糖进行组合，制备复合 菌剂，治疗驴驹腹泻。 一株驴源短小芽孢杆菌，该菌株已于2019年6月25日送至中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏编号为：CGMCC  No:18026，地点：中国微生物菌种 保藏管理委员会普通微生物中心。 上述驴源短小芽孢杆菌自健康驴粪便中分离。 上述驴源短小芽孢杆菌在制备治疗驴驹腹泻的药物上的应用。 一种驴源短小芽孢杆菌与益生菌配伍在制备治疗驴驹腹泻的药物上的应用。 优先地，一种短小芽孢杆菌与植物乳杆菌、葡萄糖组合，制备复合菌剂。 上述复合菌剂中短小芽孢杆菌和植物乳杆菌的鉴别培养计数方法，每1L培养基中 加入含量为674～786μg/mg硫酸阿米卡星0.5-1.5g。 附图说明 图1为驴源短小芽孢杆菌菌落图和革兰氏染色镜检图； 图2为利用DNAMAN软件进行系统进化树； 图3为短小芽孢杆菌产蛋白酶能力(1、2为同一菌株)； 图4为短小芽孢杆菌的生长曲线； 图5为短小芽孢杆菌菌粉的稳定性。 本发明的有益效果 本发明所述的短小芽孢杆菌，具有产淀粉酶、耐药率低、稳定性好等优点。 本发明的驴源短小芽孢杆菌单独或与益生菌配伍，可用于制备成具有短期治疗驴 驹腹泻效果的微生物制剂。单独使用短小芽孢杆菌(CGMCC  No:18026)或短小芽孢杆菌复合 菌剂，加水稀释后给驴驹灌服，具有短期(4-7天)治疗驴驹腹泻的功效。