技术摘要：
本发明公开基于鸡胚绒毛膜尿膜囊的肿瘤适时药物精确治疗模型，包括鸡胚PDX模型建立与肿瘤移植药物检测，及适时药物精确治疗分析；鸡胚PDX模型建立与肿瘤移植药物检测包括以下步骤：受精蛋备孵育、受精蛋恒温孵育，胚胎孵育；具生物活性组织/细胞种植于CAM表面，表面加  全部
背景技术：
近年来，随着肿瘤治疗手段的增多，但是其效果一直未能得到有效的提高，但是其 副作用却一直困扰着患者和医务工作者。所以，如何进行肿瘤的适时有效的精确个体化治 疗是科学家研究的重点。 PDX模型用于癌症研究实验模型，近年来越来越流行。它们可用于研究的肿瘤标志 物和生物学途径，药物疗效等个性化癌症治疗的建立。目前应用较多的是免疫缺陷鼠，但是 其缺点是肿瘤不直观，观察周期长。肿瘤细胞原代培养，不易操作且周期较长。近一个世纪 以来，很多研究发现鸡胚绒毛尿囊系统用于肿瘤研究是非常有价值的，鸡胚可以有效地支 持接种的异种肿瘤细胞的生长，在细胞移植后几天内保持快速的肿瘤形成。该CAM的致密毛 细血管网络可以并进入宿主脉管系统，从而制造提供了一个独特的实验模型，可用来研究 敏感药物的筛选。另外，它价格低廉，易操作，易观察，但缺点是可观察的时间只有8-10天。 如果通过鸡胚CAM模型总结出有效的肿瘤药物敏感、耐药及副作用的监测平台，有 可能为患者的个体化治疗提供依据。
技术实现要素：
为解决以上现有问题，本发明提供基于鸡胚绒毛膜尿膜囊的肿瘤适时药物精确治 疗模型及其建立方法。本发明通过以下技术方案实现。 基于鸡胚绒毛膜尿膜囊的肿瘤适时药物精确治疗模型，包括鸡胚PDX模型建立与 肿瘤移植药物检测，以及适时药物精确治疗分析； 所述鸡胚PDX模型建立与肿瘤移植药物检测包括以下步骤： S1.受精鸡蛋备孵育、受精蛋恒温孵育，胚胎孵育； S2.具生物活性组织/细胞于鸡胚第8-10天种植于CAM表面，于第11，13，15天在移 植肿瘤表面滴加/表面血管内显微注射目标检测药物； S3.第17天用超声观察移植肿瘤周围血管供应情况；于第18天收获移植肿瘤组织 进行HE、IHC及分子病理检测； 所述适时药物精确治疗分析包括以下步骤： SS1.患者手术标本进行初步处理，包括以下几种方式： 新鲜组织离体20分钟内种植或组织库冻存，以备后用； 常规病理检查或分子病理基因分析进而给出靶向药物及常规化疗药物建议； 鸡胚PDX模型组织接种，进而得出药物模拟治疗建议或疗效及副作用监测建议； SS2.综合分析，个体化精确治疗； SS3.疗效监测，分析； 3 CN 111593018 A 说　明　书 2/4 页 SS4.当疗效不佳，复发或转移时，将体液标本中游离肿瘤细胞或外周血液CTC进行 鸡胚PDX模型细胞接种，得出药物模拟治疗或疗效及副作用检测，进而对相关数据综合分 析，指导个体化精确治疗； SS5.继续对疗效监测，分析； SS6.药物适时选择分析，总结。 优选的，步骤S1中所述受精蛋恒温孵育在保温箱内孵育条件为37.5℃、湿度62％； 所述胚胎孵育是将胚胎、蛋清和蛋黄全部完整放入塑料称量盒内进行孵育。 优选的，步骤S2中新鲜组织移植于CAM表面，随即放3-10mg  Matrigel(一般肿瘤被 处理成直径为2mm肿瘤颗粒或团块，对于脑肿瘤等不易生长肿瘤，适当增加Matrigel的添加 量)。 优选的，步骤S3中肿瘤移植组织收取时，需要标记CAM面，进行冰冻组织切片，必要 时可以带少量的CAM组织。 优选的，步骤S3中的HE分析包括显微镜下观察活组织的比例及Ki-67阳性细胞的 比例。 优选的，步骤S3所述肿瘤的分子病理检测包括组织学的超声分析。 本发明的有益效果： 本发明基于鸡胚绒毛膜尿膜囊的肿瘤适时药物精确治疗模型应用鸡胚绒毛膜尿 膜囊(CAM)对实体肿瘤、胸腹水等体液中游离肿瘤细胞及外周血液中循环肿瘤细胞适时药 物敏感监测，从而达到精确治疗的临床目标。 本发明可以适时监测化疗药物肿瘤治疗的疗效及副作用，可以减轻患者的痛苦、 副作用及经济负担，对国家、患者、医学事业的进步都有重大的意义。 附图说明 图1为本发明鸡胚PDX模型建立和肿瘤移植药物检测的操作流程图； 图2为本发明适时药物精确治疗分析路线图； 图3.鸡胚胎发育图； 图4.胚胎孵育以及接种肿瘤； 图5肿瘤药物的显微注射示意图； 图6为超声观察移植肿瘤情况； 图7为肿瘤的显微镜下观察结果； 图8为移植肿瘤用不同药物处理后观察的结果； 图9为生长细胞百分比； 图10为Ki-67百分比； 图11肿瘤坏死比例和血管单位含量百分比。