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一种快速制备凝胶的方法及自动制胶系统


技术摘要:
本发明涉及制备凝胶的方法领域,具体涉及一种快速制备凝胶的方法;包括:将分离胶A液与B液按等体积混合,制备分离胶AB混合液;将浓缩胶A液与浓缩胶B液按等体积混合,制备浓缩胶AB混合液;将过硫酸铵(APS)与去离子水混合,制备过硫酸铵(APS)混合溶液;将分离胶AB混合溶  全部
背景技术:
蛋白质印迹(western  blotting)技术是目前仅限蛋白质表达、分析研究中应用最 多的一种实验技术,它是将传统的高分辨率的SDS(十二烷硫酸钠)-聚丙烯酰胺(PAGE)电泳 和灵敏度、特异性强的免疫探测技术相结合,最有效地分析目的蛋白的表达,在分子生物学 中发挥着重要的作用。 在实际应用中,首先根据蛋白质混合样品的分子量大小范围,按照SDS-PAGE制备 体系选择相应浓度的SDS-聚丙烯酰胺凝胶参数,制备SDS-聚丙烯酰胺胶,再将混合样品经 过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后分离,凝胶中的蛋白质用电印迹方法被转移到化学惰性的高 分子转移膜上,然后将目的蛋白的特异性一级抗体(一抗)与转移膜上的目的蛋白进行免疫 结合反应,再用标记过的(如HRP)的二级抗体(二抗)与一抗相结合,用对二抗分子中标记物 的检测来证明目的蛋白的存在。 常用的SDS-PAGE有标准的配置体系和流程,共有8种试剂,分别是SDS、Tris-碱、浓 HCl、过硫酸铵、丙烯酰胺(Acr)、甲叉双丙烯酰胺(Bis)、TEMED和去离子水。SDS-PAGE凝胶配 置需要四个阶段;整个制备过程较为复杂,急需改善。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种简单易操作的制备方法,且提供一种工作效率高、自 动化程度高的自动制胶系统。 上述目的是通过如下技术方案来实现的:一种快速制备凝胶的方法,所述方法在 应用中至少需六种试剂,为分离胶A液、分离胶B液、浓缩胶A液、浓缩胶B液、过硫酸铵(APS) 和去离子水;所述方法包括: 步骤一:将分离胶A液与B液按等体积混合,制备分离胶AB混合液; 步骤二:将浓缩胶A液与浓缩胶B液按等体积混合,制备浓缩胶AB混合溶液; 步骤三:将过硫酸铵(APS)与去离子水混合,制备过硫酸铵(APS)混合溶液; 步骤四:将分离胶AB混合溶液与过硫酸铵(APS)混合溶液混合,制备成分离胶混合 溶液; 步骤五:将浓缩胶AB混合溶液与过硫酸铵(APS)混合液混合,制备浓缩胶混合溶 液; 步骤六:在配胶板中灌入分离胶混合溶液后,立即灌入浓缩胶混合溶液,插上梳 子,静置10-15分钟后制得蛋白分离胶,将所述蛋白分离胶放置到电泳仪上进行点样与跑 胶。 本发明还提供一种应用于上述方法的自动制胶系统,包括架体,所述架体内设有 4 CN 111545138 A 说 明 书 2/5 页 搅拌模块、分离胶混合溶液容器和浓缩胶混合溶液容器;所述搅拌模块对所述分离胶混合 溶液容器和浓缩胶混合溶液容器内进行搅拌; 所述自动制胶系统还包括分离胶混合溶液加样模块、浓缩胶混合溶液加样模块和 配胶板;所述分离胶混合溶液加样模块从所述分离胶混合溶液容器吸取分离胶混合溶液, 加样至所述配胶板内,所述浓缩胶混合溶液加样模块从所述浓缩胶混合溶液容器吸取浓缩 胶混合溶液,加样至所述配胶板内,与分离胶混合。 本发明的制备方法及自动制胶系统,简化试剂配制流程,进而降低试剂配制过程 中可能引入的外部干扰;标准化包装,过程简单易操作,只需将各个包装剪开,将内部溶液 倒入混合容器即可,自动化程度高,制胶所需时间短,实用性高。 附图说明 图1示出了本发明的一种自动制胶系统的结构示意图。
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