技术摘要：
本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解，用有机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用色谱柱利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝沙坦中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量，所述的检测方法对厄贝沙坦中 全部
背景技术：
厄贝沙坦（ CAS 号：138402-11-6）是血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)受体 抑制剂，能抑制AngⅠ转化为AngⅡ，能特异性地拮抗血管紧张素转换酶1受体(AT1)，英文名 称为：Irbesartan，其化合物中文名称为：2-丁基-3-[4-[2-(1H-四唑-5-基)苯基]苄基]-1, 3-二氮杂螺-[4.4]壬-1-烯-4-酮。厄贝沙坦是 1997年赛诺菲公司研制的用于治疗2型糖尿 病的药物，一种口服易吸收的药物，生物利用度达60%~80%，具有药效持久的优势。除此之 外，厄贝沙坦由于平稳的降压疗效，服用后药效不受食物影响，因此具有很好的靶器官保护 作用。在治疗 2型糖尿病肾病的高血压患者，用药达规定时间后，可以使尿微量白蛋白进展 到显性白蛋白的危险性有效降低高达 70%，从而降低患者心血管系统整体危险水平，是很 多糖尿病肾病高血压患者的用药选择之一。 专利CN107167524A中检测的阿立哌唑相关物质1,4-二溴丁烷， 其中使用的溶剂是乙 醇、甲醇、二氯甲烷或者二甲基亚砜，利用溴丁烷在不同溶剂中的溶解度不同，将溴丁烷萃 取富集在有机溶剂层中，而使用乙醇、甲醇和二甲基亚砜溶剂，无法与水相分层，使用二氯 甲烷与水进行斡旋后，中间有一层乳化层，导致二氯甲烷层取样不准确。不分层或者分层不 准确的话会导致检测灵敏度会下降；易收到如乙醇、甲醇、二氯甲烷或二甲基亚砜溶剂等溶 剂的干扰，无法准确检测目标物；厄贝沙坦样品也会随进样器进入到仪器中，检测时也容易 受到厄贝沙坦基质的影响，这样的话会造成测量结果不准确。 为了解决上述问题，本发明提供一种气相色谱法检测厄贝沙坦中溴丁烷的方法，气相 色谱法操作简单、用时短，不使用大量的溶剂进行柱洗脱操作，节约成本，不污染环境。溴丁 烷属于有警示结构的物质，ICHM7 对其在药物中的含量有严格要求，而溴丁烷是合成厄贝 沙坦中间产物联苯咪唑啉的起始物料，因此本公司研究人员对厄贝沙坦中可能残留的溴丁 烷进行检测研究。 为验证气相色谱法检测厄贝沙坦中溴丁烷的有效性和可行性，本公司研究人员根 据 2015 年版《中国药典》四部通则 9101、ICH-Q2 指导原则对该方法进行验证。本发明所 述的检测方法对厄贝沙坦中溴丁烷的检测具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密度、 定量限和检测限、线性和范围、准确度和溶液稳定性都符合标准。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解， 用有机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷色谱柱（如DB- 62430m×0.53mm，3.0μm 或效能相当的色谱柱）利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝 沙坦中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量。厄贝沙 3 CN 111551652 A 说 明 书 2/9 页 坦中溴丁烷的检测是通过气相色谱法检测而实现的，为验证该方法的有效性和可行性，根 据 2015年版《中国药典》四部通则9101、ICH-Q2 指导原则对其在系统适用性、专属性、精密 度、检测限、定量限、线性和范围、准确度和耐用性等方面进行验证，使其完全符合《中国药 典》方法验证的指导原则，并且可用于厄贝沙坦原料药的质量控制。 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案： 一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、 对照品溶液和供试品溶液；所述空白溶液包括正 己烷溶液和 1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所 述对照品溶液包括溴丁烷溶液、正己烷溶液和1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所述测试溶液包括 厄贝沙坦溶液、正己烷溶液和1.0mol/L 氢氧化钠溶液；（2）测定方法：分别将空白溶液、对 照品溶液和供试品溶液注入气相色谱仪记录色谱图，色谱条件如下：6%氰丙基苯基-94%二 甲基聚硅氧烷（如 DB-624 30m×0.53mm，3.0μm 或效能相当的色谱柱）；柱温：初始温度为 40℃，保持1分钟，以每分钟10℃的速率升温至120℃，再以每分钟40℃速率升温至220℃，保 持3分钟；进样口温度：200℃；载气流速：1ml/min；分流模式：不分流；进样量：1.5µl；载气： N2；洗针液：二氯甲烷。 进一步地，所述 1.0mol/L 氢氧化钠溶液的配制步骤为：称取氢氧化钠约4.0g，置 于 100ml容量瓶中并用水溶解，摇匀即得1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所述空白溶液的配制步 骤为：用量筒精密量取 2.0ml 1.0mol/L 氢氧化钠溶液和1.0ml 正己烷置于10ml 离心管 中，涡旋萃取2.0min，静置分层，取上层正己烷溶液即得空白溶液；所述对照品溶液的配制 步骤为：取10ml 离心管，先加入1.0mol/LNaOH 溶液2.0ml，再加入对照品储备液②1.0ml， 涡旋萃取2min，静置分层，取上层正己烷溶液（对照品溶液的浓度：1µg/ml）；所述供试品溶 液的配制步骤为：取厄贝沙坦约200mg，精密称定，置10ml 离心管，加入2.0ml 1 .0mol/ LNaOH 溶液，超声溶解，再加入1.0ml 正己烷，涡旋萃取2.0min，静置分层，取上层正己烷溶 液（供试品溶液的浓度：200mg/ml）。 更近一步地，所述对照品储备液的配制步骤为：取 100ml 量瓶，加50ml 正己烷，取溴正己烷，精密量取上述溶液5.0ml，置该瓶中， 加正己烷 稀释至刻度，摇匀（浓度：100μg/ml）；所述氢氧化钠为AR 及以上级；所述正己烷为 HPLC 及 以上；所述二氯甲烷为AR及以上；所述溴丁烷为外购或公司自制。 其中：RU：供试品溶液图谱中溴丁烷的峰面积；RS：6 针对照品溶液图谱中溴丁烷 的平均峰面积；CS：对照品溶液中溴丁烷的浓度(µg/ml)；CU：供试品溶液的浓度(mg/ml)。 所述的厄贝沙坦中溴丁烷的测定方法还包括在检测之前的方法验证，该分析方法 验证测定结果为： 4 CN 111551652 A 说 明 书 3/9 页 有益效果 本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解，用有 机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷色谱柱（如DB-624 30m×0.53mm，3.0μm或效能相当的色谱柱）利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝沙坦 中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量，所述的检测 方法对厄贝沙坦中溴丁烷的色谱峰分离度高、具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密 度、定量限、检测限、准确度、线性和范围和耐用性都符合标准。为确认厄贝沙坦中溴丁烷的 残留量，本发明利用方便快捷的气相色谱法，为证明此方法的有效性和可行性，对本方法进 行了验证，对厄贝沙坦中溴丁烷的检测，可用于监测厄贝沙坦原料药及制剂的质量。本发明 首次提出了厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，具有准确度高、精密度高、重现性好、稳定性好、 专属性强等特点，同时本发明具有耗时短，操作简单，成本低等优点。 附图说明 图 1 空白溶液色谱图； 图 2 灵敏度溶液色谱图； 图 3 对照品溶液色谱图； 图 4 溴丁烷定位溶液色谱图； 图 5 供试品溶液色谱图； 5 CN 111551652 A 说 明 书 4/9 页 图 6 供试品溶液（加标）色谱图； 图 7 LOQ 溶液色谱图； 图 8 LOD 溶液色谱图； 图 9 溴丁烷线性关系图。
本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解，用有机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用色谱柱利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝沙坦中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量，所述的检测方法对厄贝沙坦中 全部
背景技术：
厄贝沙坦（ CAS 号：138402-11-6）是血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)受体 抑制剂，能抑制AngⅠ转化为AngⅡ，能特异性地拮抗血管紧张素转换酶1受体(AT1)，英文名 称为：Irbesartan，其化合物中文名称为：2-丁基-3-[4-[2-(1H-四唑-5-基)苯基]苄基]-1, 3-二氮杂螺-[4.4]壬-1-烯-4-酮。厄贝沙坦是 1997年赛诺菲公司研制的用于治疗2型糖尿 病的药物，一种口服易吸收的药物，生物利用度达60%~80%，具有药效持久的优势。除此之 外，厄贝沙坦由于平稳的降压疗效，服用后药效不受食物影响，因此具有很好的靶器官保护 作用。在治疗 2型糖尿病肾病的高血压患者，用药达规定时间后，可以使尿微量白蛋白进展 到显性白蛋白的危险性有效降低高达 70%，从而降低患者心血管系统整体危险水平，是很 多糖尿病肾病高血压患者的用药选择之一。 专利CN107167524A中检测的阿立哌唑相关物质1,4-二溴丁烷， 其中使用的溶剂是乙 醇、甲醇、二氯甲烷或者二甲基亚砜，利用溴丁烷在不同溶剂中的溶解度不同，将溴丁烷萃 取富集在有机溶剂层中，而使用乙醇、甲醇和二甲基亚砜溶剂，无法与水相分层，使用二氯 甲烷与水进行斡旋后，中间有一层乳化层，导致二氯甲烷层取样不准确。不分层或者分层不 准确的话会导致检测灵敏度会下降；易收到如乙醇、甲醇、二氯甲烷或二甲基亚砜溶剂等溶 剂的干扰，无法准确检测目标物；厄贝沙坦样品也会随进样器进入到仪器中，检测时也容易 受到厄贝沙坦基质的影响，这样的话会造成测量结果不准确。 为了解决上述问题，本发明提供一种气相色谱法检测厄贝沙坦中溴丁烷的方法，气相 色谱法操作简单、用时短，不使用大量的溶剂进行柱洗脱操作，节约成本，不污染环境。溴丁 烷属于有警示结构的物质，ICHM7 对其在药物中的含量有严格要求，而溴丁烷是合成厄贝 沙坦中间产物联苯咪唑啉的起始物料，因此本公司研究人员对厄贝沙坦中可能残留的溴丁 烷进行检测研究。 为验证气相色谱法检测厄贝沙坦中溴丁烷的有效性和可行性，本公司研究人员根 据 2015 年版《中国药典》四部通则 9101、ICH-Q2 指导原则对该方法进行验证。本发明所 述的检测方法对厄贝沙坦中溴丁烷的检测具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密度、 定量限和检测限、线性和范围、准确度和溶液稳定性都符合标准。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解， 用有机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷色谱柱（如DB- 62430m×0.53mm，3.0μm 或效能相当的色谱柱）利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝 沙坦中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量。厄贝沙 3 CN 111551652 A 说 明 书 2/9 页 坦中溴丁烷的检测是通过气相色谱法检测而实现的，为验证该方法的有效性和可行性，根 据 2015年版《中国药典》四部通则9101、ICH-Q2 指导原则对其在系统适用性、专属性、精密 度、检测限、定量限、线性和范围、准确度和耐用性等方面进行验证，使其完全符合《中国药 典》方法验证的指导原则，并且可用于厄贝沙坦原料药的质量控制。 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案： 一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、 对照品溶液和供试品溶液；所述空白溶液包括正 己烷溶液和 1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所 述对照品溶液包括溴丁烷溶液、正己烷溶液和1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所述测试溶液包括 厄贝沙坦溶液、正己烷溶液和1.0mol/L 氢氧化钠溶液；（2）测定方法：分别将空白溶液、对 照品溶液和供试品溶液注入气相色谱仪记录色谱图，色谱条件如下：6%氰丙基苯基-94%二 甲基聚硅氧烷（如 DB-624 30m×0.53mm，3.0μm 或效能相当的色谱柱）；柱温：初始温度为 40℃，保持1分钟，以每分钟10℃的速率升温至120℃，再以每分钟40℃速率升温至220℃，保 持3分钟；进样口温度：200℃；载气流速：1ml/min；分流模式：不分流；进样量：1.5µl；载气： N2；洗针液：二氯甲烷。 进一步地，所述 1.0mol/L 氢氧化钠溶液的配制步骤为：称取氢氧化钠约4.0g，置 于 100ml容量瓶中并用水溶解，摇匀即得1.0mol/L 氢氧化钠溶液；所述空白溶液的配制步 骤为：用量筒精密量取 2.0ml 1.0mol/L 氢氧化钠溶液和1.0ml 正己烷置于10ml 离心管 中，涡旋萃取2.0min，静置分层，取上层正己烷溶液即得空白溶液；所述对照品溶液的配制 步骤为：取10ml 离心管，先加入1.0mol/LNaOH 溶液2.0ml，再加入对照品储备液②1.0ml， 涡旋萃取2min，静置分层，取上层正己烷溶液（对照品溶液的浓度：1µg/ml）；所述供试品溶 液的配制步骤为：取厄贝沙坦约200mg，精密称定，置10ml 离心管，加入2.0ml 1 .0mol/ LNaOH 溶液，超声溶解，再加入1.0ml 正己烷，涡旋萃取2.0min，静置分层，取上层正己烷溶 液（供试品溶液的浓度：200mg/ml）。 更近一步地，所述对照品储备液的配制步骤为：取 100ml 量瓶，加50ml 正己烷，取溴正己烷，精密量取上述溶液5.0ml，置该瓶中， 加正己烷 稀释至刻度，摇匀（浓度：100μg/ml）；所述氢氧化钠为AR 及以上级；所述正己烷为 HPLC 及 以上；所述二氯甲烷为AR及以上；所述溴丁烷为外购或公司自制。 其中：RU：供试品溶液图谱中溴丁烷的峰面积；RS：6 针对照品溶液图谱中溴丁烷 的平均峰面积；CS：对照品溶液中溴丁烷的浓度(µg/ml)；CU：供试品溶液的浓度(mg/ml)。 所述的厄贝沙坦中溴丁烷的测定方法还包括在检测之前的方法验证，该分析方法 验证测定结果为： 4 CN 111551652 A 说 明 书 3/9 页 有益效果 本发明的目的是提供一种厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，首先将厄贝沙坦溶解，用有 机溶剂将溴丁烷萃取出来，然后采用6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷色谱柱（如DB-624 30m×0.53mm，3.0μm或效能相当的色谱柱）利用氮气对色谱柱进行施压，从而达到厄贝沙坦 中的溴丁烷与其他物质进行分离，最后可以确定厄贝沙坦中溴丁烷的残留量，所述的检测 方法对厄贝沙坦中溴丁烷的色谱峰分离度高、具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密 度、定量限、检测限、准确度、线性和范围和耐用性都符合标准。为确认厄贝沙坦中溴丁烷的 残留量，本发明利用方便快捷的气相色谱法，为证明此方法的有效性和可行性，对本方法进 行了验证，对厄贝沙坦中溴丁烷的检测，可用于监测厄贝沙坦原料药及制剂的质量。本发明 首次提出了厄贝沙坦中溴丁烷的检测方法，具有准确度高、精密度高、重现性好、稳定性好、 专属性强等特点，同时本发明具有耗时短，操作简单，成本低等优点。 附图说明 图 1 空白溶液色谱图； 图 2 灵敏度溶液色谱图； 图 3 对照品溶液色谱图； 图 4 溴丁烷定位溶液色谱图； 图 5 供试品溶液色谱图； 5 CN 111551652 A 说 明 书 4/9 页 图 6 供试品溶液（加标）色谱图； 图 7 LOQ 溶液色谱图； 图 8 LOD 溶液色谱图； 图 9 溴丁烷线性关系图。
