技术摘要：
本发明提供一种邻二氮杂环化合物及其药用盐在制备抑制细胞膜上TLR4受体的药物中的用途；具体提供一种邻二氮杂环化合物在制备治疗败血症药物中的用途。使用本发明所述邻二氮杂环化合物及其药用盐用于制备治疗败血症药物，联合使用抗败血症药物不仅能够缩短病情和治疗费 全部
背景技术：
本发明为了解决现有技术中存在的败血症缺乏有效针对性药物的问题，提供一种 邻二氮杂环化合物在制备抑制细胞膜上Toll样受体4(TLR4)的药物中的用途，具体提供一 种邻二氮杂环化合物在制备治疗败血症药物中的用途。 为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 一种邻二氮杂环化合物及其药用盐在制备抑制细胞膜上TLR4受体的药物中的用 途。 一种邻二氮杂环化合物及其药用盐在制备治疗败血症药物中的用途。 本发明所述邻二氮杂环化合物为N-((4-氯苯基)-5-(三氟甲基-1H-吡唑基))-3- 氰基-4-(4-吗啉哌啶基)苯甲酰胺，其结构式如式(Ⅰ)所示： 本发明所述药物包括以邻二氮杂环化合物作为药效成分的药物组合物。 优选的，所述药物为以邻二氮杂环化合物作为药效成分与一种或多种药学上可接 受的载体、稀释剂或赋形剂的组合。 优选的，所述药物为以邻二氮杂环化合物、另外一种或多种败血症治疗药或败血 症辅助治疗药做为药效成分与一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合。 邻二氮杂环化合物、其药用盐及其药物组合物的制备方法详见中国专利CN 105601617A(申请号201610173772.4)。 优选的，所述药物为通过抑制TLR4蛋白靶点治疗败血症的药物。 本发明所述用于治疗败血症的药物所给予的剂量取决于药物中的药效成分含量、 给药方式、预期治疗和病症情况而变化。本发明所述药物中，邻二氮杂环化合物的每日口服 剂量的范围为0.1～2.0mg/kg。 本发明药物的应用对象为发生败血症及脓毒血症患者，给药途径可为口服、肌肉 注射、静脉给药等方式。 药物组合物产品包括本申请所述的剂量范围内的活性成分以及认可的剂量范围 和/或者在公开参考文献中所述的剂量内的其它一种或者多种药用活性化合物。 本发明所述邻二氮杂环化合物可抑制TLR4-MyD88信号通路，与中国专利文献 (CN105601617A)中对IL-17A的抑制作用的机理和作用靶点上有巨大差异，IL-17A是针对急 性慢性炎症或者自身免疫性炎症的抗炎靶点，而败血症是由外来致病菌导致的自身免疫崩 溃而引发的全身血液疾病，属于急重症，因而二者有明显的机理和适应症的不同。现有临床 针对败血症的药物均属于抗生素类药物，针对致病菌有杀灭作用，而对病菌产生内毒素的 全身毒性作用没有帮助，因而在临床上常常会导致病情延长和用药过量的问题。使用本发 明所述邻二氮杂环化合物及其药用盐用于制备治疗败血症药物，联合使用抗败血症药物不 仅能够缩短病情和治疗费用，而且对于挽救生命和节约医疗资源都有巨大的帮助。 4 CN 111603471 A 说 明 书 3/5 页 附图说明 图1是本发明所述药物抑制TLR4体外表达实验结果。
技术实现要素：
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明所保护范围不限于 此。 本发明“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用 的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋 形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利用活性成分的吸收进而发挥生物活性。 本发明的化合物可以为溶剂化物，例如水合物以及非溶剂化物形式存在。还应该 理解的是本发明涵盖式(I)的化合物的所有所述溶剂化物形式。本发明的化合物还包括式 (I)的对映异构体。 药物组合物可以例如乳膏剂、溶液剂或者混悬剂的形式局部(例如皮肤)给药；或 者全身给药，例如以片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉末剂或者颗粒剂的形式通过口服给药；或者以 溶液剂或者混悬剂的形式通过肠胃外给药；或者通过皮下给药；或者以栓剂的形式通过直 肠给药；或者经皮给药。 对于口服给药，本发明所述化合物可与辅料或者载体混合，所述辅料或者载体例 如乳糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇；淀粉，例如马铃薯淀粉、玉米淀粉或者支链淀粉；纤维素衍生 物；粘合剂，例如明胶或者聚乙烯吡咯烷酮；和/或者润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙 二醇、蜡、石蜡等，然后将其压制为片剂。如果需要包衣片剂，可将如上所述制备的片心使用 浓缩糖溶液来包衣，所述浓缩糖溶液可含有例如阿拉伯胶、明胶、滑石和二氧化钛。可选择 地，所述片剂可使用溶于易挥发的有机溶剂中的适当聚合物来包衣。 对于制备软明胶胶囊剂，本发明所述化合物可与例如植物油或者聚乙二醇混合。 硬明胶胶囊剂可使用对于片剂的如上提及的赋形剂而含有化合物颗粒。本发明所述化合物 的液体或者半固体制剂也可填充至硬明胶胶囊剂中。 1.本发明所述药物败血症小鼠模型实验 此实验按照《现代药理实验方法》(第二版，张俊田，2013.2118-2119)中所述方法 进行。 动物：成年雄性C57BL/6小鼠(12周龄，体重25–30g)。 实验方法：将LPS(脂多糖)溶解于无菌PBS生理盐水溶液(PH值为7.2)中配制成1g/ L质量浓度的LPS溶液。D-氨基半乳糖溶于PBS生理盐水溶液，配成140mg/mL浓度的D-氨基半 乳糖溶液。将本发明所述药物(邻二氮杂环化合物)溶解于PBS生理盐水溶液中配制成10mg/ L质量浓度的药物溶液。 按照低、中、高剂量组分别经口给予1mg/kg，2mg/kg，4mg/kg上述药物溶液，阳性对 照腹腔注射给予30mg/kg地塞米松，空白对照组和模型对照组分别灌胃给予与模型组等体 积的PBS。30分钟后，除空白对照组外其余各组均腹腔注射给予LPS(20μg/kg)和D-氨基半乳 糖(700mg/kg)的混合溶液。24小时后尾静脉取血，取肝，分离血清。 按照ELISA试剂盒说明检测：使用NO、TNF-α试剂盒检测血液中的NO、TNF-α含量；使 用SOD、MDA试剂盒检测肝组织中的SOD、MDA的含量。另建立相同规模的上述各实验组观察各 5 CN 111603471 A 说 明 书 4/5 页 组小鼠48h生存率，LPS造模剂量为20μg/kg。 本发明中所述药物对小鼠生存率的影响(n＝10)及对小鼠败血症模型炎症介质和 肝组织中SOD活性和MDA含量的影响结果见表1、表2所示。 表1本发明所述药物对小鼠生存率的影响(n＝10) 表2本发明所述药物对小鼠败血症模型炎症介质和肝组织中SOD活性和MDA含量的 影响(均值±标准差) 注明：与空白对照组比较#p<0.05,##p<0.01；与模型组比较*p<0.05,**p<0.01。 由表1和表2可知，本发明所述药物对败血症模型小鼠可明显改善小鼠死亡率，48 小时内高剂量组无死亡，同时血液生化检测发现相关炎症反应指标有显著性的改善，相对 于模型组小鼠血液中No、TNF-α、肝组织中的SOD、MDA的含量均能够显著减低指数，本发明所 述药物可显著性降低这些炎症介质指标。 2.本发明所述药物抑制TLR4体外表达实验 利用蛋白印迹技术检测本发明药物对TLR4蛋白表达的影响。分别用LPS(1μg/mL)、 LPS(1μg/mL)和浓度分别为3、10、30、100nM的药物(图1中标记药物为BS-153)处理6孔板 RAW264.7细胞24h，提取蛋白前用冷PBS洗2次，加入裂解液提取总蛋白，利用BSA法计算各样 6 CN 111603471 A 说 明 书 5/5 页 品蛋白浓度，用电泳分离蛋白-转膜至NC，TLR4一抗(1：1000)孵育过夜，经过二抗室温孵育 75分钟，ECL化学发光法显影，计算各条带灰度，统计对TLR4表达的抑制率，评价各样品的抗 炎活性。利用imageJ软件对各条带灰度值进行分析，以LPS组为对照。结果见图1所示，图中， “-”表示不使用LPS(1μg/mL)或者药物处理细胞，“ ”表示使用LPS(1μg/mL)处理细胞，3、10、 30、100表示分别用浓度为3、10、30、100nM的药物处理细胞。 实验结果显示：本发明所述药物可抑制TLR4高表达，其作用EC50为9.213nM。 7 CN 111603471 A 说 明 书 附 图 1/1 页 图1 8
