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动物源性食品中多种利尿剂的测定方法


技术摘要:
本申请公开了一种动物源性食品中利尿剂含量的检测方法,该方法包括:步骤1,对所述动物源性食品进行均质化处理;步骤2,从所述均质化处理后所述动物源性食品中按预定量进行取样;步骤3,将所取样品与匹配量的提取剂混合均匀,进行离心处理,取上清液;步骤4,将所取上  全部
背景技术:
利尿剂是临床常用药物,广泛应用于利尿消肿、降压和脑水肿等治疗。近年来,在 家畜的养殖及疾病治疗中,利尿剂也被不少养殖户使用,因而在许多动物源性食品中可能 存在残留。利尿剂进入人体后,可直接或间接导致肾脏功能和组织学改变,通过细胞外容量 的减少、入球和出球小动脉张力的改变和球-管反馈等机制导致肾血流量的减少和肾小球 滤过率的下降。其还可引起急性间质性肾炎、肾小管堵塞等肾脏损害,长期摄入利尿剂可导 致肾结石、尿沉渣异常和低钾性肾病等慢性改变,具有较强的肾毒性作用。利尿剂的检测方 法主要是高效液相色谱和液相色谱-质谱联用技术,检测对象主要是人体及动物的尿液和 血液。 目前,国内已有进出口行业标准对动物源性食品中的利尿剂进行检测,但检出限 较高,随着人们对食品安全的重视,必须不断开发出更低检出限的检测方法,以适应对食品 安全检测的需要;文献中偏重于利尿剂作为药物在生物体中的代谢机理和生理毒性以及对 生物体生体机能或者部分功能影响的研究,对其检测方法研究较少,多数是血液或者尿液 中利尿剂的定性或定量分析研究。 而由于目前养殖行业中利尿剂的使用,动物源性食品中利尿剂的检测监控已刻不 容缓。
技术实现要素:
申请人在对动物源性食品中利尿剂进行检测实验时发现,一方面现有文献中的检 测方法在动物源性食品检测时检测准确性会受到动物源性食物本体的严重干扰,现有方法 应用于动物源性食品利尿剂的检测时,并不适用,另一方面,基于目前的国情,现有利尿剂 的检测虽然可以保证食品基本安全,但由于检出限仍然相对较高,难以满足未来对利尿剂 使用情况的监测需要。 针对上述问题,本发明提供了一种方法,其能够同时对猪肉、牛肉、羊肉、牛奶、鸡 蛋中10种利尿剂进行低检出限的准确检测。 一种动物源性食品中利尿剂含量的检测方法,其特征在于,该方法包括: 步骤1,对所述动物源性食品进行均质化处理; 步骤2,从所述均质化处理后所述动物源性食品中按预定量进行取样; 步骤3,将所取样品与匹配量的提取剂混合均匀,进行离心处理,取上清液; 步骤4,将所取上清液与匹配量的净化剂混合,进行二次离心处理,取全部上清液、 氮气吹至近干,加入水-甲酸甲醇溶液溶解残渣,过滤所得溶液作为待测溶液; 步骤5,将所述待测溶液注入液相色谱-串联质谱仪进行检测,记录色谱图,基于色 4 CN 111735892 A 说 明 书 2/11 页 谱图和质谱图进行利尿剂测定。 优选地,液相色谱-串联质谱仪的色谱条件为: a)色谱柱:C18色谱柱,150mm×2.1mm(内径),粒径3.5μm,或性能相当者; b)进样量:10μL; c)流动相:A为水,B为0.1%甲酸甲醇溶液,梯度洗脱。 优选地,所述净化剂包括150mg无水硫酸镁、50mg  PSA、50mg  C18以及10mg石墨化碳 黑。 优选地,所述净化剂包括500mg无水硫酸镁、30mg  PSA、30mg  C18以及10mg石墨化碳 黑。 优选地,所述净化剂包括150mg无水硫酸镁、30mg  PSA、30mg  C18以及5mg石墨化碳。 优选地,所述利尿剂包括氢氯噻嗪、氯噻嗪、氨苯蝶啶、丙磺舒、氯噻酮,乙酰唑胺、 呋塞米,精磺胺、螺内酯以及坎利酮。 优选地,还包括在检测时添加内标溶液。 优选地,所述提取剂包括乙腈。 优选地,将待测溶液注入液相色谱-串联质谱仪进行检测时包括梯度洗脱过程,所 述梯度洗脱过程为: 本申请的有益效果是:本发明可以有效地从猪肉、牛肉、羊肉、牛奶、鸡蛋中提取并 检测利尿剂,进而通过液相色谱-串联质谱仪对待测样品中的利尿剂含量进行准确检测,提 高了利尿剂检测方法的灵敏度、简便性、可靠性和批量检测能力,使检出限降低将近一个量 级,实现对动物源性食品中利尿剂的高灵敏检测。 附图说明 本申请的上述和/或附加方面的优点在结合下面附图对实施例的描述中将变得明 显和容易理解,其中: 5 CN 111735892 A 说 明 书 3/11 页 图1是根据本申请一个实施例的利尿剂含量检测方法的示意流程图; 图2是在其他条件相同的情况下不同提取剂对利尿剂提取的对比图; 图3是在其他条件相同的情况下不同净化剂对猪肉净化效率对比图;
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