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一种基于原位衍生化的脂肪酸MALDI质谱成像方法及其应用


技术摘要:
本发明提供一种基于原位衍生化的脂肪酸MALDI质谱成像方法及其应用,属于质谱检测技术领域。所述方法至少包括:将衍生化试剂溶液、催化剂溶液喷涂到制备的组织切片表面,置于含有饱和有机溶剂气体的密闭环境中进行衍生化反应,反应结束后得到脂肪酸衍生化产物;将衍生化  全部
背景技术:
公开该
技术实现要素:
部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然 被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技 术。 脂肪酸作为一类重要的机体内源性代谢物,除了是细胞膜、线粒体膜和质膜等生 物膜脂质的主要组成分子外,还可以广泛的参与机体能量代谢、信号传导等生物学过程。对 异质性生物组织中脂肪酸分子进行原位分析,掌握机体生理和病理条件下脂肪酸分子的空 间分布和变化特征,对于增进我们对脂肪酸分子的生物学作用的认识具有重要的意义。 Matrix-Assisted  Laser  Desorption/Ionization(MALDI)质谱成像技术可以对 生物组织中脂质、多肽、蛋白等分子进行原位分析。目前,有研究采用MALDI质谱成像技术在 负离子检测模式下对生物组织一些含量高的脂肪酸进行原位检测。但是由于一些脂肪酸在 生物组织中含量较低,难以采用MALDI质谱成像技术进行原位分析。此外,磷脂酰胆碱、溶血 磷脂酰胆碱、胆碱、肉碱等代谢物与脂肪酸在机体代谢通路上密切相关。例如,脂肪酸与胆 碱一起参与机体磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱的合成与代谢;肉碱是脂肪酸β氧化供能的关 键调节因子。而由于脂肪酸在正离子检测模式下的质谱响应极低,因此难以实现与磷脂酰 胆碱、溶血磷脂酰胆碱、胆碱、肉碱等代谢物的同时测定。 衍生化技术可通过化学反应将特定官能团引入到目标化学物上,将其转化成另一 易于分析检测的化合物,提高检测灵敏度和选择性。脂肪酸含有羧基(-COOH)基团,有研究 通过酰胺化反应在脂肪酸分子上引入正离子检测模式下易离子化的氨基,进而采用液质联 用技术进行检测。但是发明人发现,与基于液质联用的衍生化反应不同,基于MALDI质谱的 原位衍生化反应发生在组织表面,还要满足以下2点要求:1)反应条件温和、易操作;2)不干 扰其他代谢物的检测。
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