技术摘要：
本发明开展了辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性评价，并通过对施用隔离期的研究，提出该两种杀虫剂在同一土壤施用时需存在施用间隔期，辛硫磷的施用剂量为1‑50g(有效成份)/亩，高效氯氟氰菊酯的施用剂量为0.1‑20g(有效成份)/亩，施用间隔期不得少于1周。 全部
背景技术：
在农业生产中，为了防治病虫草等有害生物，往往需要同时或先后使用多种农药， 此外，为了扩大防治对象或者提高对单一害虫的防治效果以及延缓抗药性的产生，大量的 农药混剂也被投入使用。不同农药之间往往具有复杂的相互作用，影响彼此的吸收、分布、 代谢转化和毒性效应，形成复合污染效应，如协同作用、相加作用和拮抗作用。目前，许多生 态毒理效应无法用单一农药的作用机理来解释，过去依赖单一效应制定的有关评价标准无 法真实反映环境质量客观要求。因此，开展农药复合污染研究，对于建立复合污染的生态诊 断指标和风险评价技术体系，正确评价复合污染条件下污染物的迁移转化行为，帮助人们 采取有效的诊治措施具有重要的意义，同时为合理指导对土壤施加农药提供参考的方法。 辛硫磷(Phoxim)是我国目前使用量最大的有机磷类杀虫剂之一，在农业生产中被 广泛用于防治多种作物害虫。虽然该种农药在土壤处理和种子处理过程中控制有害生物发 挥了重要作用，但同时也对土壤生态系统造成了一定影响，其所产生的土壤生态毒理学效 应已经受到越来越多的关注。高效氯氟氰菊酯(Lambda-cyhalothrin)是目前世界上使用量 最大的拟除虫菊酯类杀虫剂，杀虫谱广，具有对靶标害虫高效和对哺乳动物低毒特征。土壤 作为储存高效氯氟氰菊酯的重要汇集地，大量积累的该类农药可对土壤生态系统造成严重 的污染，进而直接或间接危害人类健康。因此，为了避免高效氯氟氰菊酯污染风险以及限定 其毒性危害，开展其在接近环境浓度下的土壤毒性污染诊断研究是非常必要的。由于辛硫 磷和高效氯氟氰菊酯混剂对靶标害虫具有良好的防效，在农业生产中它们被大量广泛使用 和混合使用。因此，这两种农药在使用过程中往往通过药液滚落或漂移同时或先后进入土 壤中，构成复合污染。 蚯蚓是土壤生态环境中普遍存在的环节动物，对土壤物理性质的改良及植物的营 养循环起着重要的作用，被OECD、ISO和EEC等国际组织推荐为土壤生态环境污染及其陆地 生物毒理学研究的主要模式指示生物。对蚯蚓生态毒性的研究不仅可以反映污染物的毒性 效应，还能反映土壤的污染状况，同时也可以提供一个保护整个土壤动物区系的安全阈值。 鉴于农药在土壤中的浓度相对较低，通常不会引起急性毒性的发生，但通过低剂量长期暴 露可对蚯蚓繁殖毒性产生毒副作用。因此，研究农药复合污染对蚯蚓繁殖毒性的影响，对于 评价土壤环境健康具有重要的意义。 目前，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯复配杀虫剂也仍在大面积使用，尽管已有对辛硫 磷、高效氯氟氰菊酯单一污染的毒性效应进行研究，但至今还没有针对辛硫磷和高效氯氟 氰菊酯复合污染对蚯蚓联合慢性毒性效应的报道，也未对该两种杀虫剂在同一片土壤施用 时，从保护土壤生态系统降低污染考虑，应该如何进行正确施用进行深入研究，也没有提供 关于这类施用方法的相应指导。 3 CN 111596048 A 说 明 书 2/8 页
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明开展辛硫磷和高效氯氟氰菊酯对蚯蚓慢性毒性研究，为 农药的科学合理使用和评价农药复合污染的生态风险奠定理论基础，并为辛硫磷和高效氯 氟氰菊酯在同一片土壤施用时提供施用方法指导。 本发明提供两种杀虫剂的施用方法，其中，所述两种杀虫剂分别为辛硫磷和高效 氯氟氰菊酯，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯分别按照行业推荐用量进行施用，辛硫磷和高效氯 氟氰菊酯在同一块土壤施用时须有施用间隔期。 这里的行业推荐用量，是指根据辛硫磷和高效氯氟氰菊酯办理农药登记并记录在 农药登记证中的推荐用量，其中辛硫磷的施用剂量为1-50g(有效成份)/亩，高效氯氟氰菊 酯的施用剂量为0.1-20g(有效成份)/亩。根据辛硫磷和高效氯氟氰菊酯的施用特性，农药 与土壤表面1cm厚度的土壤均匀混合，且土壤容量为1.5g/cm3，因此，每亩地约有10000kg土 壤将于农药均匀混合。由此可以推算出，按照行业推荐用量进行施用时，辛硫磷的施用剂量 为0.1-5mg/kg，高效氯氟氰菊酯的施用剂量为0.01-2mg/kg。 这里的施用间隔期，是指在同一块土壤需要单独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟 氰菊酯时，中间必须存在一定的时间间隔。 进一步地，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯在同一块土壤施用时的施用间隔期为1周以 上。 优选的，在同一块土壤上先施用辛硫磷后施用高效氯氟氰菊酯时，施用间隔期为3 周；先施用高效氯氟氰菊酯后施用辛硫磷时，施用间隔期为2周。 另一方面，本发明还提供了如何获得所述的两种杀虫剂的施用方法的测定办法， 主要是测定两种杀虫剂对蚯蚓的毒性。 进一步地，所述测定两种杀虫剂对蚯蚓的毒性主要包括：单一杀虫剂对蚯蚓的毒 性测试；两种杀虫剂联合暴露对蚯蚓的毒性测试；两种杀虫剂实行施用间隔期后对蚯蚓的 毒性测试。单一杀虫剂对蚯蚓的毒性测试是指测定辛硫磷或高效氯氟氰菊酯单独施用时开 展对蚯蚓的毒性测试；两种杀虫剂联合暴露对蚯蚓的毒性测试是指辛硫磷和高效氯氟氰菊 酯联合暴露时开展对蚯蚓的毒性测试，测试辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露时对蚯蚓的 毒性是否存在协同增效作用；两种杀虫剂实行施用间隔期时对蚯蚓的毒性测试，是指在单 独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟氰菊酯之间，必须存在一定的施用间隔期，检测如果施 用间隔期时间较短，单独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟氰菊酯是否依然存在对蚯蚓毒性 的协同增效作用，从而选出时间长短最合适的施用间隔期。 进一步地，所述两种杀虫剂实行施用间隔期后对蚯蚓的毒性测试，是指先单独施 用辛硫磷，施用间隔期后，再单独施用高效氯氟氰菊酯并开展对蚯蚓的毒性测试，或是先单 独施用高效氯氟氰菊酯，施用间隔期后，再单独施用辛硫磷并开展对蚯蚓的毒性测试。 进一步地，所述两种杀虫剂实施施用间隔期时对蚯蚓的毒性测试，是指通过在施 用间隔期从1周到4周或以上的范围，测试两种杀虫剂对蚯蚓的联合毒性，根据测试结果进 行分析判断，选出辛硫磷和高效氯氟氰菊酯在同一土壤施用时的施用间隔期。 进一步地，所述测试结果的分析判断依据，是辛硫磷和高效氯氟氰菊酯对蚯蚓毒 性的协同增效作用。 进一步地，所述对蚯蚓的毒性测试是指对蚯蚓的繁殖毒性评价。 4 CN 111596048 A 说 明 书 3/8 页 本发明对蚯蚓繁殖毒性试验数据采用DPS统计分析软件(版本号：V14.10)处理，利 用机率值分析法将蚯蚓繁殖毒性数据进行统计分析，求出EC50及其95％置信限。本发明采用 Marking相加指数法对辛硫磷和高效氯氟氰菊酯的联合毒性进行评价。 本发明通过开展辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性的研究，获得 辛硫磷和高效氯氟氰菊酯复合污染产生联合毒性的基础数据，为正确评价两种杀虫剂作为 污染物对蚯蚓的生物效应提供基础资料，并为土壤动物的资源保护和环境风险评估提供科 学依据。 本发明发现辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性产生了显著的协 同效应，说明他们共存时可对土壤生态环境产生严重不利影响。尽管辛硫磷和高效氯氟氰 菊酯混剂在农业生产中广泛使用，以提高对有害生物的控制效果，但它们共存时对生态环 境也会产生毒副作用。因此，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯混剂在农业生产中应谨慎使用，以减 少对生态环境的不利影响。 同时本发明通过对施用隔离期的研究，确定当在同一土壤单独施用辛硫磷或高效 氯氟氰菊酯，施用间隔期少于2周时，依然存在对蚯蚓毒性的协同增效作用。因此，建议辛硫 磷和高效氯氟氰菊酯在同一块土壤施用时，施用间隔期不得少于1周，优选的，在同一土壤 先施用辛硫磷后使用高效氯氟氰菊酯时，施用间隔期为3周；先施用高效氯氟氰菊酯后使用 辛硫磷时，施用间隔期为2周。 本研究开展了辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性评价，并提出了 该两种杀虫剂在使用时需存在施用间隔期的概念，为其它不同种类的污染物联合暴露对蚯 蚓慢性毒性测试及施用间隔期的研究提供了借鉴，这也将为土壤复合污染的监测预警及修 复治理提供重要科学依据。
本发明开展了辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性评价，并通过对施用隔离期的研究，提出该两种杀虫剂在同一土壤施用时需存在施用间隔期，辛硫磷的施用剂量为1‑50g(有效成份)/亩，高效氯氟氰菊酯的施用剂量为0.1‑20g(有效成份)/亩，施用间隔期不得少于1周。 全部
背景技术：
在农业生产中，为了防治病虫草等有害生物，往往需要同时或先后使用多种农药， 此外，为了扩大防治对象或者提高对单一害虫的防治效果以及延缓抗药性的产生，大量的 农药混剂也被投入使用。不同农药之间往往具有复杂的相互作用，影响彼此的吸收、分布、 代谢转化和毒性效应，形成复合污染效应，如协同作用、相加作用和拮抗作用。目前，许多生 态毒理效应无法用单一农药的作用机理来解释，过去依赖单一效应制定的有关评价标准无 法真实反映环境质量客观要求。因此，开展农药复合污染研究，对于建立复合污染的生态诊 断指标和风险评价技术体系，正确评价复合污染条件下污染物的迁移转化行为，帮助人们 采取有效的诊治措施具有重要的意义，同时为合理指导对土壤施加农药提供参考的方法。 辛硫磷(Phoxim)是我国目前使用量最大的有机磷类杀虫剂之一，在农业生产中被 广泛用于防治多种作物害虫。虽然该种农药在土壤处理和种子处理过程中控制有害生物发 挥了重要作用，但同时也对土壤生态系统造成了一定影响，其所产生的土壤生态毒理学效 应已经受到越来越多的关注。高效氯氟氰菊酯(Lambda-cyhalothrin)是目前世界上使用量 最大的拟除虫菊酯类杀虫剂，杀虫谱广，具有对靶标害虫高效和对哺乳动物低毒特征。土壤 作为储存高效氯氟氰菊酯的重要汇集地，大量积累的该类农药可对土壤生态系统造成严重 的污染，进而直接或间接危害人类健康。因此，为了避免高效氯氟氰菊酯污染风险以及限定 其毒性危害，开展其在接近环境浓度下的土壤毒性污染诊断研究是非常必要的。由于辛硫 磷和高效氯氟氰菊酯混剂对靶标害虫具有良好的防效，在农业生产中它们被大量广泛使用 和混合使用。因此，这两种农药在使用过程中往往通过药液滚落或漂移同时或先后进入土 壤中，构成复合污染。 蚯蚓是土壤生态环境中普遍存在的环节动物，对土壤物理性质的改良及植物的营 养循环起着重要的作用，被OECD、ISO和EEC等国际组织推荐为土壤生态环境污染及其陆地 生物毒理学研究的主要模式指示生物。对蚯蚓生态毒性的研究不仅可以反映污染物的毒性 效应，还能反映土壤的污染状况，同时也可以提供一个保护整个土壤动物区系的安全阈值。 鉴于农药在土壤中的浓度相对较低，通常不会引起急性毒性的发生，但通过低剂量长期暴 露可对蚯蚓繁殖毒性产生毒副作用。因此，研究农药复合污染对蚯蚓繁殖毒性的影响，对于 评价土壤环境健康具有重要的意义。 目前，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯复配杀虫剂也仍在大面积使用，尽管已有对辛硫 磷、高效氯氟氰菊酯单一污染的毒性效应进行研究，但至今还没有针对辛硫磷和高效氯氟 氰菊酯复合污染对蚯蚓联合慢性毒性效应的报道，也未对该两种杀虫剂在同一片土壤施用 时，从保护土壤生态系统降低污染考虑，应该如何进行正确施用进行深入研究，也没有提供 关于这类施用方法的相应指导。 3 CN 111596048 A 说 明 书 2/8 页
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明开展辛硫磷和高效氯氟氰菊酯对蚯蚓慢性毒性研究，为 农药的科学合理使用和评价农药复合污染的生态风险奠定理论基础，并为辛硫磷和高效氯 氟氰菊酯在同一片土壤施用时提供施用方法指导。 本发明提供两种杀虫剂的施用方法，其中，所述两种杀虫剂分别为辛硫磷和高效 氯氟氰菊酯，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯分别按照行业推荐用量进行施用，辛硫磷和高效氯 氟氰菊酯在同一块土壤施用时须有施用间隔期。 这里的行业推荐用量，是指根据辛硫磷和高效氯氟氰菊酯办理农药登记并记录在 农药登记证中的推荐用量，其中辛硫磷的施用剂量为1-50g(有效成份)/亩，高效氯氟氰菊 酯的施用剂量为0.1-20g(有效成份)/亩。根据辛硫磷和高效氯氟氰菊酯的施用特性，农药 与土壤表面1cm厚度的土壤均匀混合，且土壤容量为1.5g/cm3，因此，每亩地约有10000kg土 壤将于农药均匀混合。由此可以推算出，按照行业推荐用量进行施用时，辛硫磷的施用剂量 为0.1-5mg/kg，高效氯氟氰菊酯的施用剂量为0.01-2mg/kg。 这里的施用间隔期，是指在同一块土壤需要单独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟 氰菊酯时，中间必须存在一定的时间间隔。 进一步地，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯在同一块土壤施用时的施用间隔期为1周以 上。 优选的，在同一块土壤上先施用辛硫磷后施用高效氯氟氰菊酯时，施用间隔期为3 周；先施用高效氯氟氰菊酯后施用辛硫磷时，施用间隔期为2周。 另一方面，本发明还提供了如何获得所述的两种杀虫剂的施用方法的测定办法， 主要是测定两种杀虫剂对蚯蚓的毒性。 进一步地，所述测定两种杀虫剂对蚯蚓的毒性主要包括：单一杀虫剂对蚯蚓的毒 性测试；两种杀虫剂联合暴露对蚯蚓的毒性测试；两种杀虫剂实行施用间隔期后对蚯蚓的 毒性测试。单一杀虫剂对蚯蚓的毒性测试是指测定辛硫磷或高效氯氟氰菊酯单独施用时开 展对蚯蚓的毒性测试；两种杀虫剂联合暴露对蚯蚓的毒性测试是指辛硫磷和高效氯氟氰菊 酯联合暴露时开展对蚯蚓的毒性测试，测试辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露时对蚯蚓的 毒性是否存在协同增效作用；两种杀虫剂实行施用间隔期时对蚯蚓的毒性测试，是指在单 独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟氰菊酯之间，必须存在一定的施用间隔期，检测如果施 用间隔期时间较短，单独施用辛硫磷和单独施用高效氯氟氰菊酯是否依然存在对蚯蚓毒性 的协同增效作用，从而选出时间长短最合适的施用间隔期。 进一步地，所述两种杀虫剂实行施用间隔期后对蚯蚓的毒性测试，是指先单独施 用辛硫磷，施用间隔期后，再单独施用高效氯氟氰菊酯并开展对蚯蚓的毒性测试，或是先单 独施用高效氯氟氰菊酯，施用间隔期后，再单独施用辛硫磷并开展对蚯蚓的毒性测试。 进一步地，所述两种杀虫剂实施施用间隔期时对蚯蚓的毒性测试，是指通过在施 用间隔期从1周到4周或以上的范围，测试两种杀虫剂对蚯蚓的联合毒性，根据测试结果进 行分析判断，选出辛硫磷和高效氯氟氰菊酯在同一土壤施用时的施用间隔期。 进一步地，所述测试结果的分析判断依据，是辛硫磷和高效氯氟氰菊酯对蚯蚓毒 性的协同增效作用。 进一步地，所述对蚯蚓的毒性测试是指对蚯蚓的繁殖毒性评价。 4 CN 111596048 A 说 明 书 3/8 页 本发明对蚯蚓繁殖毒性试验数据采用DPS统计分析软件(版本号：V14.10)处理，利 用机率值分析法将蚯蚓繁殖毒性数据进行统计分析，求出EC50及其95％置信限。本发明采用 Marking相加指数法对辛硫磷和高效氯氟氰菊酯的联合毒性进行评价。 本发明通过开展辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性的研究，获得 辛硫磷和高效氯氟氰菊酯复合污染产生联合毒性的基础数据，为正确评价两种杀虫剂作为 污染物对蚯蚓的生物效应提供基础资料，并为土壤动物的资源保护和环境风险评估提供科 学依据。 本发明发现辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性产生了显著的协 同效应，说明他们共存时可对土壤生态环境产生严重不利影响。尽管辛硫磷和高效氯氟氰 菊酯混剂在农业生产中广泛使用，以提高对有害生物的控制效果，但它们共存时对生态环 境也会产生毒副作用。因此，辛硫磷和高效氯氟氰菊酯混剂在农业生产中应谨慎使用，以减 少对生态环境的不利影响。 同时本发明通过对施用隔离期的研究，确定当在同一土壤单独施用辛硫磷或高效 氯氟氰菊酯，施用间隔期少于2周时，依然存在对蚯蚓毒性的协同增效作用。因此，建议辛硫 磷和高效氯氟氰菊酯在同一块土壤施用时，施用间隔期不得少于1周，优选的，在同一土壤 先施用辛硫磷后使用高效氯氟氰菊酯时，施用间隔期为3周；先施用高效氯氟氰菊酯后使用 辛硫磷时，施用间隔期为2周。 本研究开展了辛硫磷和高效氯氟氰菊酯联合暴露对蚯蚓繁殖毒性评价，并提出了 该两种杀虫剂在使用时需存在施用间隔期的概念，为其它不同种类的污染物联合暴露对蚯 蚓慢性毒性测试及施用间隔期的研究提供了借鉴，这也将为土壤复合污染的监测预警及修 复治理提供重要科学依据。
