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一种可分泌抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用

技术摘要:
本发明公开了一种可分泌抗新型冠状病毒(SARS‑COV‑2)N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。本发明提供了杂交瘤细胞株N‑3G3,保藏编号为CCTCC NO:C202075。本发明还保护杂交瘤细胞株N‑3G3分泌的单克隆抗体。灵敏性高且特异性高的抗体是抗原检测技术的开  全部
背景技术:
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科 (Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的β属冠状病毒。新型冠状病毒传播途径主要 经呼吸道飞沫和密切接触传播,在相对密闭环境中也存在经气溶胶传播的可能。新型冠状 病毒其传染性极高,感染后潜伏期1-14天,在临床上存在无症状感染者,且目前没有有效的 疫苗及治疗药物。因此对新型冠状病毒进行早诊早治,切断传播源,防止病毒的传播和扩散 极为重要。 新型冠状病毒感染引起的新冠肺炎在临床表现为发热和/或呼吸道症状,其诊断 主要通过RT-PCR、血清学检查、肺部影像CT等。目前常用的RT-PCR方法检测时间长,且需要 昂贵的仪器与设备及专业人员在专门的PCR实验室进行检测,而血清学检查通常要在感染7 天以后才能检出IgM和/或IgG抗体,发展快速实时的、价格低廉的、灵敏性和特异性高的抗 原检测新技术和新方法,对于早期诊断新型冠状病毒,防止其传播和扩散具有必要性和重 要性。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种可分泌抗新型冠状病毒(SARS-COV-2)N蛋白单克隆抗体 的杂交瘤细胞、单克隆抗体及应用。 本发明提供了杂交瘤细胞株N-3G3,已于2020年5月13日保藏于中国典型培养物保 藏中心(简称CCTCC;地址:中国武汉,武汉大学;邮编:430072),保藏编号为CCTCC  NO: C202075。 本发明还保护杂交瘤细胞株N-3G3分泌的单克隆抗体。将杂交瘤细胞株N-3G3分泌 的单克隆抗体命名为单克隆抗体N-3G3。 本发明还保护杂交瘤细胞株N-3G3在制备产品中的应用;所述产品的功能为如下 (a)、(b)或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 本发明还保护单克隆抗体N-3G3在制备产品中的应用;所述产品的功能为如下 (a)、(b)或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; 3 CN 111733141 A 说 明 书 2/8 页 (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 本发明还保护一种试剂盒,包括杂交瘤细胞株N-3G3;所述试剂盒的功能为如下 (a)、(b)、或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 本发明还保护一种试剂盒,包括单克隆抗体N-3G3;所述试剂盒的功能为如下(a)、 (b)或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 本发明还保护一种胶体金试纸条,其特征在于:胶体金垫上包被胶体金标记的单 克隆抗体N-3G3,检测垫的T线上包被单克隆抗体N-3G3,检测垫的C线上包被抗鼠IgG抗体。 胶体金试纸条包括底板(又称背衬)、胶体金垫(又称样品垫)、检测垫和吸水垫。沿样品流动 方向,胶体金垫、检测垫和吸水垫依次固定于底板上。抗鼠IgG抗体具体可为羊抗鼠IgG抗 体。 本发明还保护一种荧光试纸条,其特征在于:荧光垫上包被荧光微球标记的单克 隆抗体N-3G3,检测垫的T线上包被单克隆抗体N-3G3,检测垫的C线上包被抗鼠IgG抗体。荧 光试纸条包括底板(又称背衬)、荧光垫(又称样品垫)、检测垫和吸水垫。沿样品流动方向, 荧光垫、检测垫和吸水垫依次固定于底板上。抗鼠IgG抗体具体可为羊抗鼠IgG抗体。 以上任一所述试纸条中,单克隆抗体N-3G3作为检测抗体,同时作为捕获抗体。 检测垫的材质具体可为硝酸纤维素膜。 胶体金垫的材质具体可为玻璃纤维纸。 荧光垫的材质具体可为玻璃纤维纸。 单克隆抗体N-3G3针对新型冠状病毒N蛋白的优势表位,在特异性和灵敏度上具有 显著的优势。 本发明还保护以上任一所述试纸条在制备产品中的应用;所述产品的功能为如下 (a)、(b)或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 本发明还保护一种试剂盒,包括以上任一所述试纸条;所述试剂盒的功能为如下 (a)、(b)或(c): (a)检测SARS-CoV-2的N蛋白; (b)检测SARS-CoV-2; (c)检测待测样本中是否含有SARS-CoV-2。 以上任一所述产品可为试剂或试剂盒。 灵敏性高且特异性高的抗体是抗原检测技术的开发和实施的关键。本发明基于单 克隆抗体技术获得了抗SARS-CoV-2的N蛋白的特异性抗体,并用其制备了SARS-COV-2检测 4 CN 111733141 A 说 明 书 3/8 页 试纸条。采用本发明提供的试纸条检测SARS-CoV-2,操作简单、灵敏度高、特异性强,可实现 对SARS-COV-2的快速监测及预防。 附图说明 图1为实施例2中单克隆抗体N-3G3与SARS-COV-2的N蛋白的结合曲线。 图2为试纸条的结构示意图。
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