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一种海洋节杆菌及其活性组分和筛选方法


技术摘要:
本发明公开了一种海洋节杆菌Arthrobacter sp.MTL5‑86,所述菌株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2019407。本发明还公开了所述菌株的抗肺癌活性组分的筛选方法和用该筛选方法筛选获得的活性组分。本发明还公开了所述菌株的抗肺癌活性组分的制药用途  全部
背景技术:
肿瘤是指在致癌基因作用下,细胞基因发生了改变,失去了对细胞正常生长的调 控,导致单克隆性异常增生而形成的新生物。恶性肿瘤由于分化不成熟、生长较快,进入破 坏器官的结构和功能,进而发生转移,所以对机体的影响较为严重。目前,癌症在中国的发 病率占到世界的22%,发病人数全球第一;由于癌症在中国造成的死亡率占到世界的27%, 位居第29位。观察全球抗肿瘤药物研发现状,发现市场增速呈现放缓趋势,新兴国家市场中 上市15  年以上的老药仍是主力军,新上市的药物价格呈现越来越昂贵的趋势,因此抗肿瘤 药物的研发仍具有巨大的市场潜力,应不断投入各方面资源,治疗肿瘤疾病。 由于深海环境目前仍处于探索的高潮期,各方面新的发现正在不断涌现。对于深 海中存在的大量微生物资源,其在药物研发方面具有巨大的潜在价值。通过提取微生物代 谢产物,寻找蕴藏其中的抗肿瘤药物,不断促进海洋活性物的开发和利用,就具有了重大的 研究价值与研究意义。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种从马里亚纳海沟海水中培养分离得到的能够产生抗癌 物质的菌株、其抗癌活性组分及其筛选方法和用途。 本发明的第一方面是提供了一种节杆菌Arthrobacter  sp.MTL5-86,所述菌株保 藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC  NO:M  2019407。 在一优选例中,所述菌株的基因组16S  rDNA碱基序列如SEQ  ID  No.1所示。 本发明的第二方面是提供了一种节杆菌Arthrobacter  sp.MTL5-86的活性组分的 筛选方法,所述方法包括如下步骤: (1)发酵培养 将节杆菌Arthrobacter  sp.MTL5-86菌株接种于20~40mL的培养基,于15~30℃、 150~300  r/min的摇床里恒温培养18~28h,得种子发酵液; 将种子发酵液按照4~8%的接种量接种于200~400mL的培养基中,于相同条件下 继续培养30~40h,得菌种发酵液; 所述培养基为:蛋白胨3~7g/L,酵母粉0.8~1.2g/L,磷酸高铁0.005~0.2g/L,以 海水配制,121℃、15min灭菌。 (2)超滤分离 将菌种发酵液分批次离心,8000~10000g,8~15min,收集上清液,用分子量为 0.3kDa  和30kDa的超滤膜超滤,获得分子量为0.3~30kDa的超滤浓缩液; (3)真空冷冻干燥 将分子量为0.3~30kDa的超滤浓缩液真空冷冻干燥,即得活性组分。 3 CN 111593007 A 说 明 书 2/8 页 本发明的第三方面是提供了一种可用上述筛选方法筛选获得的节杆菌 Arthrobacter  sp.  MTL5-86的活性组分。 本发明的第四方面是提供了上述活性组分在制备预防或者治疗肺癌的药物中的 用途。 本发明还提供了一种抗肺癌药物,所述药物包含上述节杆菌Arthrobacter  sp.MTL5-86的活性组分。 本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求 的描述,本发明的特点、目的和优势将更为明显。 附图说明 图1菌株Arthrobacter  sp.MTL5-86的菌落形态 图2菌株Arthrobacter  sp.MTL5-86的活性组分对人非小细胞肺癌细胞A549的细 胞形态的影响 A.PBS阴性对照,B.58μg/mL的MTL5-86的活性组分 图3不同浓度的菌株Arthrobacter  sp.MTL5-86的活性组分对人非小细胞肺癌细 胞A549 的增殖的抑制作用
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