技术摘要：
本发明公开了一种化湿败毒组合物特征图谱的构建方法，其中，化湿败毒组合物主要包括以下组分：麻黄，炒苦杏仁，生石膏，甘草，广藿香，厚朴，麸炒苍术，炒草果仁，法半夏，茯苓，大黄，黄芪，葶苈子，赤芍；化湿败毒组合物特征图谱的构建方法包括：制备芍药苷、甘草素  全部
背景技术：
2019新型冠状病毒（COVID-19）感染引起的肺炎疫情，由于传染性强，传播迅速，人 群普遍易感，且特效药缺乏，已在全球范围内形成大流行，成为了全球性的超重大公共卫生 突发事件。中医药在抗击新冠肺炎疫情的过程中，发挥了独特的、重要的作用。中国中医药 管理局指出，经研究筛选，“三药三方”中的金花清感颗粒、连花清瘟颗粒、血必净注射液、清 肺排毒汤、化湿败毒方、宣肺败毒方在此次抗击疫情中发挥了良好的作用。 化湿败毒方由14味中药组成，包括生麻黄、杏仁、生石膏、甘草、藿香、厚朴、苍术、 草果、法半夏、茯苓、生大黄、生黄芪、葶苈子和赤芍。临床实验表明，化湿败毒方对改善患者 症状、提高核酸转阴率具有突出的作用。但目前对于化湿败毒方的研究多集中在药理、疗效 的研究，尚无对于其质量标准的研究。且现有的生产也仅限于小范围内进行，无大规模工业 化生产，对质量监控的要求也相对较低。 文献《抗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的化湿败毒颗粒药味的物质基础研究》（中 国现代中药，2020年第3期）研究了各味药物的物质基础。但并未对药品的具体质量控制方 法进行研究。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题在于，提供一种化湿败毒组合物特征图谱的构建方 法，该方法重现性良好，准确可靠，可为化湿败毒组合物大生产质量控制提供数据基础，保 证化湿败毒组合物产品质量的稳定性和可控性。 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种化湿败毒组合物特征图谱的构建方 法，所述化湿败毒组合物主要包括以下组分：麻黄，炒苦杏仁，生石膏，甘草，广藿香，厚朴， 麸炒苍术，炒草果仁，法半夏，茯苓，大黄，黄芪，葶苈子，赤芍； 所述化湿败毒组合物特征图谱的构建方法包括： （1）分别取芍药苷对照品、甘草素对照品、大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品、甘草酸对照 品、和厚朴酚对照品、厚朴酚对照品适量，加入溶剂溶解或提取，制得对照品溶液； （2）取化湿败毒组合物，加提取溶剂提取，制得供试品溶液； （3）取预设量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷 基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱，建立化湿 败毒组合物的特征图谱。 作为上述技术方案的改进，步骤（2）中，所述提取溶剂为50~100%甲醇或50~70%乙 醇；提取方式为超声提取或回流提取。 作为上述技术方案的改进，步骤（2）包括： 4 CN 111735896 A 说　明　书 2/20 页 取化湿败毒组合物，研细，取0.5~1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50%~70%甲醇 20~30mL，称定重量，加热回流处理30~90分钟，取出，放冷，再称定重量，用50%~70%甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品溶液。 作为上述技术方案的改进，步骤（2）包括： 取化湿败毒组合物，研细，取0.5~1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50%~70%甲醇 20~30mL，称定重量，采用功率为200~300  kW，频率为35~45  kHz的超声处理30~90分钟，取 出，放冷，再称定重量，用50%~70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品 溶液。 作为上述技术方案的改进，步骤（3）中，所述甲酸溶液的体积浓度为0.05~0.2%。 作为上述技术方案的改进，所述甲酸溶液的体积浓度为0.05%。 作为上述技术方案的改进，所述梯度洗脱按下述程序进行： 0~1min，流动相A从3%→6%，流动相B从97%→94%； 1~3min，流动相A从6%→11%，流动相B从94%→89%； 3~5min，流动相A从11%→13%，流动相B从89%→87%； 5~15min，流动相A从13%→16%，流动相B从87%→84%； 15~22min，流动相A从16%→19%，流动相B从84%→81%； 22~30min，流动相A从19%→23%，流动相B从81%→77%； 30~35min，流动相A从23%→27%，流动相B从77%→73%； 35~40min，流动相A从27%→34%，流动相B从73%→66%； 40~45min，流动相A从34%→36%，流动相B从66%→64%； 45~50min，流动相A从36%→50%，流动相B从64%→50%； 50~65min，流动相A从50%→60%，流动相B从50%→40%。 作为上述技术方案的改进，步骤（3）中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1~3μ L，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm；以乙腈为 流动相A，以0.05%~0.2%的甲酸溶液为流动相B；流速为0.28~0.32  mL/min；柱温为28~32℃， 检测波长为235~250  nm。 作为上述技术方案的改进，步骤（3）中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1μL， 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.7μm；以乙腈为流 动相A，以0.05%的甲酸溶液为流动相B；流速为0.3mL/min；柱温为30℃，检测波长为235~250  nm。 作为上述技术方案的改进，步骤（3）中，检测时间为0~18分钟时，检测波长为235  nm；检测时间为18~65分钟时，检测波长为250  nm。 作为上述技术方案的改进，所述化湿败毒组合物特征图谱包括11个特征峰；其中， 与大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品峰相对应的峰为S峰，各特征峰与S峰的相对保留时间应该 在规定值的±10％之内；所述规定值包括：峰2为0.43、峰3为0.60、峰5为0.82、峰6为0.96、 峰8为1.25。 实施本发明，具有如下有益效果： 本发明首次建立了化湿败毒组合物的特征图谱，该特征图谱可充分展示化湿败毒组合 物的化学成分特征，特征峰信息量丰富，可全面地反映化湿败毒组合物的质量信息，从而能 5 CN 111735896 A 说　明　书 3/20 页 够达到全面、有效地控制化湿败毒组合物产品质量的目的。同时，本发明中的特征图谱构建 方法重现性良好，准确可靠，稳定性好。 附图说明 图1是本发明中化湿败毒组合物采用不同洗脱梯度测定的特征图谱； 图2是本发明中化湿败毒组合物采用不同色谱柱测定的特征图谱； 图3是本发明中化湿败毒组合物采用不同吸收波长测定的特征图谱； 图4是本发明中化湿败毒组合物采用不同流动相测定的特征图谱； 图5是本发明中化湿败毒组合物采用不同浓度流动相测定的特征图谱； 图6是本发明化湿败毒组合物采用不同提取溶剂提取的特征图谱； 图7是本发明化湿败毒组合物采用不同提取方式提取的特征图谱； 图8是本发明化湿败毒组合物采用不同提取时间提取的特征图谱； 图9是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、葶苈子对照药 材、缺葶苈子阴性样品的特征图谱； 图10是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、甘草对照药 材、缺甘草阴性样品的特征图谱； 图11是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、赤芍对照药 材、缺赤芍阴性样品的特征图谱； 图12是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、厚朴对照药 材、缺厚朴阴性样品的特征图谱； 图13是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、石膏工作对照 药材、茯苓对照药材的特征图谱； 图14是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、大黄对照药 材、缺大黄阴性样品的特征图谱； 图15是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、麻黄对照药 材、缺麻黄阴性样品的特征图谱； 图16是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、炒草果仁工作 对照药材、缺炒草果仁阴性样品的特征图谱； 图17是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、广藿香对照药 材、缺广藿香阴性样品的特征图谱； 图18是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、麸炒苍术工作 对照药材、缺麸炒苍术阴性样品的特征图谱； 图19是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、法半夏工作对 照药材、缺法半夏阴性样品、缺法半夏和甘草双阴性样品的特征图谱； 图20是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、黄芪对照药 材、缺黄芪阴性样品的特征图谱； 图21是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中化湿败毒组合物、炒苦杏仁工作 对照药材、缺炒苦杏仁阴性样品的特征图谱； 图22是本发明化湿败毒组合物特征图谱专属性考察中各对照品、阴性样品、化湿败毒 6 CN 111735896 A 说　明　书 4/20 页 组合物的特征图谱； 图23是本发明化湿败毒组合物特征图谱中间精密度考察中采用不同仪器测定时化湿 败毒组合物的特征图谱； 图24是本发明化湿败毒组合物特征图谱耐用性考察中采用不同柱温测定时化湿败毒 组合物的特征图谱； 图25是本发明化湿败毒组合物特征图谱耐用性考察中采用不同流速测定时化湿败毒 组合物的特征图谱； 图26是本发明化湿败毒组合物特征图谱耐用性考察中采用不同色谱柱测定时化湿败 毒组合物的特征图谱； 图27是本发明15批次化湿败毒组合物小试样品的特征图谱叠加图；其中，峰1为芍药苷 峰，峰4为甘草素峰，峰7为大黄酚-8-O-葡萄糖苷峰，峰9为甘草酸峰，峰10为和厚朴酚峰，峰 11为厚朴酚峰； 图28是本发明6批次化湿败毒组合物生产样品的特征图谱叠加图；其中，峰1为芍药苷 峰，峰4为甘草素峰，峰7为大黄酚-8-O-葡萄糖苷峰，峰9为甘草酸峰，峰10为和厚朴酚峰，峰 11为厚朴酚峰； 图29是本发明化湿败毒组合物小试样品的对照特征图谱；其中，峰1为芍药苷峰，峰4为 甘草素峰，峰7为大黄酚-8-O-葡萄糖苷峰，峰9为甘草酸峰，峰10为和厚朴酚峰，峰11为厚朴 酚峰； 图30是本发明化湿败毒组合物生产样品的对照特征图谱，其中，峰1为芍药苷峰，峰4为 甘草素峰，峰7为大黄酚-8-O-葡萄糖苷峰，峰9为甘草酸峰，峰10为和厚朴酚峰，峰11为厚朴 酚峰。