技术摘要：
本发明涉及一种肿瘤标志物。具体地，本发明一方面提供了一种确定受试者是否患有癌症或者具有罹患癌症风险的方法，包括检测该受试者的血液样本中Hsp90α的浓度，如果该浓度达到或超过预先设定的阈值，则判定该受试者患有癌症或者具有罹患癌症的风险，其中所述阈值选自50  全部
背景技术：
热休克蛋白90α(Hsp90α)是一个含量丰富的细胞内伴侣蛋白。近年来研究  显示， Hsp90α可以被癌细胞特异性的分泌到细胞外，且与癌症的发生和发展密  切相关。本研究组 已发现，分泌到胞外的Hsp90α可以在外周血中很方便的被定  量检测，其含量与肿瘤的负荷 和恶性程度呈现一定的相关性，但并没有任何数据  能够指导该项指标在肿瘤临床中的应 用。因此，如何将分泌型Hsp90α应用于肿  瘤临床实践是亟待解决的问题。
技术实现要素：
本发明一方面提供了一种确定受试者是否患有癌症或者具有罹患癌症风险 的方 法，包括检测该受试者的血液样本中Hsp90α的浓度，如果该浓度达到或超  过预先设定的阈 值，则判定该受试者患有癌症或者具有罹患癌症的风险，其中所  述阈值选自50ng/ml到 120ng/ml的范围内，例如所述阈值可以为50、53、56、  62、63、64、67、72、82、85或117ng/ml， 且所述阈值±15％范围内的数值  均被视为具有等同判定意义。 本领域技术人员可以理解，由于检测方法的局限性，要做到浓度测定结果完  全准 确是相当困难的。根据本领域的惯常做法，上下偏差15％以内可以被认为  是合理误差。例 如当所述阈值选定为50ng/ml时，如果受试者的测量值为43  ng/ml，也可以判定该受试者患 有癌症，或者具有较高的罹患癌症的风险。 在本发明中，所述血液样本可以为血浆或血清样本。在本发明的优选实施方  案 中，血浆样本是优选的，其测量精度更高。 所述Hsp90α的阈值可以为50、53、56、62、63、64、67、72、82、85  或117ng/ml。例如， 在本发明一个具体实施方案中，针对肺癌的特别优选的阈  值是67.47ng/ml(可以四舍五入 取67ng/ml)，此时对应的特异度为85％，灵  敏度为64％。在上述阈值±15％的范围内的数 值均可视为等同的判定范围。 在本发明一个具体实施方案中，针对肺癌的一个优选的阈值是82ng/ml，  即Hsp90 α的浓度为0-82ng/ml时被认为是正常值范围；在本发明一个优选实  施方案中，针对肺癌的 一个特别优选的阈值是53ng/ml，即Hsp90α的浓度为  0-53ng/ml时被认为是正常值范围。同 样的，在上述阈值±15％的范围内的数  值均可视为具有等同判定意义。所述血液样本优选 为血浆样本。 3 CN 111596054 A 说　明　书 2/29 页 本发明另一方面提供了一种用于对正在接受治疗的癌症患者进行病情监测  和/ 或疗效评价或者用于对候选治疗药物进行疗效评价的方法，包括在治疗前及  治疗后分别 检测受试者的血液样本中Hsp90α的浓度，如果治疗后Hsp90α的浓  度相对于治疗前Hsp90α 浓度增加的百分比达到或超过预先设定的阈值，则判定  该受试者病情进展和/或疗效较 差，或者判定所述候选治疗药物疗效较差，其中  所述阈值选自10％到50％的范围内，例如 所述阈值可以为34％，且所述阈值±  15％范围内的数值均被视为具有等同判定意义；优选 地，所述血液样本为血浆样  本。 此处所用的术语“治疗”应当做广义的理解。例如，在对肺癌患者进行治疗  时，可 能涉及多个治疗周期，例如总共8个治疗周期。如果将整个治疗过程作为  一个整体来看，可 以在第1个治疗周期开始前和第8个治疗周期结束后，分别  对Hsp90α的浓度进行检测，并据 此判断整个治疗过程的效果。或者，也可以将  每个治疗周期视为一次“治疗”(例如出于获 得更精确评估结果的目的)。例如，  可以在每个治疗周期开始前和结束后，均对Hsp90α的浓 度进行检测，并据此判  断单个治疗周期的效果。或者，还可以进行更精确的评估。例如，在 单个治疗周  期包括总共20天治疗的情况下，可以将每一天视为一次“治疗”，在当天的治  疗开始前和当天的治疗结束后，分别对Hsp90α的浓度进行检测，从而判断当天  的治疗效 果。本领域技术人员可以根据不同的评估要求，具体设定“治疗”的时 间跨度。 本发明还提供了确定受试者是否患有癌症或者具有罹患癌症风险的方法，包  括 联合检测该受试者的血液样本中Hsp90α的浓度以及至少一种其他肿瘤标志  物的浓度，如 果Hsp90α的浓度和所述至少一种其他肿瘤标志物的浓度达到或超  过预先设定的阈值，则 判定该受试者患有癌症或者具有罹患癌症的风险，其中  Hsp90α的阈值选自50ng/ml到 120ng/ml的范围内，例如所述阈值可以为50、  53、56、62、63、64、67、72、82、85或117ng/ml， 且所述阈值±15％范围  内的数值均被视为具有等同判定意义。所述血液样本优选为血浆 样本，所述至少  一种其他肿瘤标志物优选选自由癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段抗原 21-1  (CYFRA21-1)、AFP、CA19-9、CA125、CA15-3、PSA和CA72-4构成的组。 根据本发明的优选实施方案，本发明方法中Hsp90α的浓度优选地采用  EDTA-K2作 为抗凝剂进行检测。 本发明的方法适用的癌症种类包括：肺癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、胃癌、  胰腺 癌、卵巢癌、淋巴瘤、食管癌、黑色素瘤、肾癌、子宫癌、鼻咽癌、骨肉瘤、  膀胱癌和前列腺癌。 本发明还提供了用于确定受试者是否患有癌症或者具有罹患癌症风险的试  剂 盒，包括：任选的人分泌型Hsp90α、人分泌型Hsp90α单克隆抗体、检测试  剂以及说明书，其 中所述说明书中标明了健康人血液样本中Hsp90α浓度的阈  值，如果受试者的血液样本中 Hsp90α的浓度达到或超过所述阈值，则判定该受  试者患有癌症或者具有罹患癌症的风险， 其中所述阈值选自50ng/ml到120  ng/ml的范围，例如所述阈值可以为50、53、56、62、63、64、 67、72、82、  85或117ng/ml，且所述阈值±15％范围内的数值均被视为具有等同判定意义；  优选地，所述血液样本为血浆样本。 此处所用的术语“任选的”表示可以有，也可以没有。例如，“任选的人分  泌型 Hsp90α”，是指本发明的试剂盒可以包括人分泌型Hsp90α，也可以不包括  人分泌型Hsp90α。 例如，可以将人分泌型Hsp90α单独包装，并与试剂盒的主  体部分联合使用。优选地，出于方 便使用的目的，本发明的试剂盒中包括人分泌  型Hsp90α，用作检测时的标准品。特别优选 4 CN 111596054 A 说　明　书 3/29 页 的是重组人分泌型Hsp90α。 根据本发明的优选实施方式，所述试剂盒中可以包括用于采集血液样本的容  器， 并且该容器中包含EDTA-K2。在本发明的优选实施方案中，所述用于采集  血液样本的容器 为包含EDTA-K2的采血管。 根据在本发明的具体实施方案，Hsp90α的浓度采用EDTA-K2作为抗凝剂  进行检测 是优选的。 本发明的试剂盒适用的癌症种类包括：肺癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、胃  癌、胰腺 癌、卵巢癌、淋巴瘤、食管癌、黑色素瘤、肾癌、子宫癌、鼻咽癌、骨 肉瘤、膀胱癌和前列腺癌。 本发明的实施例中还将Hsp90α定量检测在癌症辅助诊断和疗效监测中的有 效性 研究方法应用于多种癌症，发现Hsp90α浓度在癌症诊断中的阈值范围对肺  癌、肝癌、结直 肠癌和乳腺癌等同样适用，并提供了肿瘤标志物Hsp90α定量检  测用于肺癌、肝癌、结直肠 癌和乳腺癌诊断的具体统计学参数。 本发明的实施例中根据不同人群的数据绘制相应的ROC曲线。根据本领域  公知技 术，每一条ROC曲线都提供了一系列阈值及与之相对应的灵敏度和特异  度。因此，使用这些 ROC曲线，本领域技术人员能很容易地查出选取任意阈值  (即cut-off值)时该项检测对疾 病的识别能力，即诊断相应癌种的灵敏度、特  异度和符合率。例如： 当适应症为肝癌时，患者相对于健康人的cut-off值是52.79ng/ml时，灵敏  度、特 异度和符合率分别是93.7％，85％和94.5％，当cut-off值是62.20ng/ml  时，灵敏度、特异 度和符合率分别是91.4％，90％和92.2％；患者相对于非癌症  肝部相关疾病的cut-off值 是63.66ng/ml时，灵敏度、特异度和符合率分别是  90.7％，90％和90.3％，当cut-off值是 85.24ng/ml时，灵敏度、特异度和符合率 分别是80.7％，95％和88.6％。 当适应症是结直肠癌时，患者相对于健康人及非癌症结直肠相关疾病组的  cut- off值是52.79ng/ml时，灵敏度、特异度和符合率分别是89.9％，85％和87％，  当cut-off值 是62.20ng/ml时，灵敏度、特异度和符合率分别是83.4％，90％和  87％。 当适应症为乳腺癌时，患者相对于健康人的cut-off值是52.66ng/ml时，灵  敏度、 特异度和符合率分别是65.6％，85％和73.85％，当cut-off值是61.92ng/ml 时，灵敏度、特 异度和符合率分别是54.6％，90％和69.68％；患者相对于非癌症  乳腺相关疾病组的cut- off值是63.41ng/ml时，灵敏度、特异度和符合率分别是  52.4％，84.9％和68.29％，当cut- off值是72.21ng/ml时，灵敏度、特异度和符合 率分别是41.9％，90.1％和65.41％。 本领域技术人员可以理解，由于受试人群和瘤种的不同，cut-off值的选取及  其 对应的灵敏度、特异度和符合率等参数会有所差别，但均包含在本发明限定的  阈值范围 内。本领域技术人员可以根据实际使用需求，如对特定瘤种、灵敏度、  特异度等的要求，从 本发明公开的ROC曲线或阈值范围内选取适当的优选阈值。 本发明还验证了肺癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌患者手术后血浆Hsp90α含  量比手 术前显著降低，因此该项检测指标可以作为手术治疗效果评价的手段。同  时，临床获益的 (CR PR SD)接受内科治疗的患者，在治疗后的检测值显著低  于治疗前，说明该项指标可以 用于上述癌症的内科治疗疗效评价。 本发明的实施例中检测了胃癌、胰腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、食管癌、黑色素  瘤、肾 癌、子宫癌、鼻咽癌、骨肉瘤、膀胱癌、前列腺癌等多种癌症患者血浆  Hsp90α含量，发现与健 5 CN 111596054 A 说　明　书 4/29 页 康人相比均显著升高(具有统计显著性)，并分别提供  了上述不同癌种患者血浆Hsp90α含 量的平均参考值。这说明肿瘤标志物Hsp90α  可用于胃癌、胰腺癌、卵巢癌、淋巴瘤、食管癌、 黑色素瘤、肾癌、子宫癌、鼻 咽癌、骨肉瘤、膀胱癌、前列腺癌等多癌症的诊断。 附图说明 图1是Hsp90α检测结果的ROC曲线(基于所有检测Hsp90α的受试者)。 图2是Hsp90α检测结果的ROC曲线AUC  95％CI(0.788,0.829)。 图3是Hsp90α检测结果的ROC曲线AUC  95％CI(0.811,0.854)。 图4是Hsp90α检测结果的ROC曲线AUC  95％CI(0.804,0.850)。 图5是Hsp90α检测结果的ROC曲线AUC  95％CI(0.731,0.777)。 图6是根据斜率判定肿瘤增大的ROC曲线。 图7是根据变化百分比判定PD的ROC曲线。 图8是根据变化值判定PD的ROC曲线。 图9显示了EDTA-K2采血管样本和EDTA-K3采血管样本的对比。 图10是肝癌患者相对于健康人的ROC曲线。 图11是肝癌患者相对于非癌肝部相关疾病人群的ROC曲线。 图12是结直肠癌患者相对于健康人及非癌结直肠相关疾病的ROC曲线。 图13是乳腺癌患者相对于健康人的ROC曲线。 图14是乳腺癌患者相对于非癌乳腺相关疾病人群的ROC曲线。 图15是多种癌症患者血浆Hsp90α含量检测结果汇总。 图中，“ROC  Curve  for  Model”表示针对模型的ROC曲线，“Area  under  the Curve”表示曲线下面积，“Specificity”表示特异度，“Sensitivity”表示灵敏度。