技术摘要：
种植体液态存储方法，依次用SiC防水砂纸同方向逐级打磨钛片至表面呈金属光泽，表面划痕一致，再依次以双蒸水、无水乙醇和双蒸水超声清洗；将上步所得钛片经喷砂，再依次置于丙酮、乙醇、蒸馏水中超声清洗并干燥；硝酸，氢氟酸混合液室温处理，双蒸水超声，干燥；盐酸硫  全部
背景技术：
临床常用的口腔种植系统Straumann、3i、Nobel  Biocare等，均为纯钛种植体。这 些系统分别采用大颗粒喷砂-酸蚀（SLA）、双重酸蚀、微弧氧化等技术构建表面微米级粗糙 形貌，以促进成骨细胞的黏附、增殖和分化，增加种植体与骨的接触面积和机械嵌合力。然 而，纯钛本身缺乏骨诱导性能，与周围骨组织无法形成化学结合，在植入后需要较长时间形 成有力的骨结合。针对这一点，国内外学者对钛种植体表面修饰与活化进行了大量研究，期 望通过合适的修饰方法，提高种植体的成骨活性，加快植入后的成骨速度，增加骨结合的强 度，缩短成骨周期。因此，钛表面的修饰活化技术是口腔种植领域的研究热点之一。 但最近的研究发现，纯钛表面和修饰改性钛表面均存在时间依赖的生物活性老化 现象。与新制备钛表面相比，旧的钛表面成骨细胞的黏附数量、增殖活性和成骨功能表型均 显著降低。机械抛光、喷砂-酸蚀以及物理沉积钛表面均会发生老化，制备后四周钛表面的 骨传导率仅为新制备钛表面的一半以下。钛表面老化后的生物相容性降低，究其原因，可能 与亲水性减弱有关。新制备的钛表面具有优异的亲水性，而老化后的钛表面往往是疏水的。 有研究证实：新制备钛表面在四周后即可发生老化，其表面接触角可高达60度。而钛表面的 亲水性是钛种植体形成骨结合的关键性能之一。不仅如此，钛表面碳元素含量也会随着制 备后时间的延长而增高，碳元素主要以碳氢化合物形式在钛表面不断积存，可使碳百分比 从20%增加至60%以上。而钛表面的碳元素含量越高，成骨细胞在钛表面的黏附越少，两者呈 显著的负相关。因此，碳累积效应也是钛表面老化后影响钛生物相容性的重要因素。 维生素C是胶原蛋白合成和正常骨骼发育所必需的。研究表明，维生素C可减少活 性氧引起的氧化应激所导致骨吸收过程。此外，维生素C在羟脯氨酸残基的形成过程中起主 要作用，它稳定了胶原的三螺旋结构。值得一提的是，大约90-95%的骨骼是由胶原蛋白组成 的。因此，缺乏维生素C会阻碍胶原蛋白的合成，进而导致新骨形成的抑制。研究表明，维生 素C还通过下调RANKL的表达抑制骨吸收过程。课题组前期实验将光滑钛密闭、避光储存在 含维生素C的生理盐水溶液中，有利于成骨细胞的黏附、增殖和分化。基于上述理由，我们认 为将钛种植体密闭、避光储存于含维生素C的溶液中使得钛种植体表面提前活化，钛种植体 表面存留的维生素C能够更好的促进骨结合的过程。 随着近年来我国种植体植入数的爆发式增长，防止钛种植体老化的临床重要性日 益显现。解决这一问题的关键，在于钛种植体的存储环节。然而，与钛种植体表面修饰研究 的如火如荼相比，种植体存储的针对性研究相当匮乏。因此，研究提前活化钛种植体表面技 术防止钛种植体表面老化使粗糙钛种植体表面具备亲水表面，使在种植体植入之初能够释 3 CN 111588506 A 说　明　书 2/4 页 放维生素C元素，也许可以更好的促进骨性结合的进程。
技术实现要素：
解决的技术问题：本发明针对现有钛种植体储存方式不足，提供一种植体液态存 储方法。 技术方案：种植体液态存储方法，包括如下步骤：（1）依次用SiC防水砂纸同方向逐 级打磨钛片至表面呈金属光泽，表面划痕一致，再依次以双蒸水、无水乙醇和双蒸水超声清 洗；（2）将上步所得钛片用Al(OH)3喷砂，再依次置于丙酮、75vt.%乙醇、蒸馏水中超声清洗 并干燥；硝酸，氢氟酸混合液室温处理10min，双蒸水超声15min，干燥；盐酸、硫酸混合酸，80 ℃水浴处理至起泡后，双蒸水超声清洗；（3）配制含维生素C的生理盐水溶液；（4）将步骤（2） 所得钛片经双蒸水超声清洗后密闭、避光储存于配制好的维生素C溶液中。 上述SiC防水砂纸逐级打磨的目数为320目、600目、800目、1200目、1500目。 优选的，上述Al(OH)3喷砂的压力：0.3MPa，粒度：80目，距离：1.5cm，角度：80度，时 间：15s。 优选的，上述硝酸，氢氟酸混合液体积比为双蒸水:0.22wt.%HF:0.57  wt.%HNO3= 1000:2:4。 优选的，上述盐酸、硫酸混合酸按体积比为双蒸水:37  wt.%HCl:98  wt.%H2SO4=6: 1:1。 优选的，上述维生素C溶液是将维生素C粉末溶于0.9  vt .%生理盐水中，配制成 100mM或10mM的含维生素C溶液。 有益效果：本发明提供的种植体液态存储方法，钛表面能够被储存液提前活化，具 有促进成骨细胞黏附、增殖和分化的作用，  更好的促进新骨形成。同时具有良好的润湿性 和生物相容性，有广泛的应用价值。 附图说明 图1为光滑钛片表面MC3T3-E1成骨细胞接种2h、4h后的粘附形态荧光图像  ； 图2为光滑钛片在不同存储液中储存10天表面接种MC3T3-E1成骨细胞1、3、6天cck-8检 测细胞增殖活性对比图； 图3为光滑钛片在不同存储液中储存10天表面接种MC3T3-E1成骨细胞western  blot检 测OPN、OSX  、OCN  、Runx2成骨相关蛋白的表达电泳图； 图4为光滑钛片在不同存储液中储存10天，钛片表面水接触角对比图； 图5为SLA钛片表面MC3T3-E1成骨细胞接种2h、4h后的粘附形态荧光图像； 图6为SLA钛片在不同存储液中储存10天表面接种MC3T3-E1成骨细胞1、3、6天cck-8检 测细胞增殖活性； 图7为SLA钛片在不同存储液中储存10天表面接种MC3T3-E1成骨细胞western  blot检 测OPN、OSX  、OCN  、Runx2成骨相关蛋白的表达电泳图； 图8为SLA钛片在不同存储液中储存10天，钛片表面水接触角对比图。 4 CN 111588506 A 说　明　书 3/4 页