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一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法


技术摘要:
本发明公开了一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法,包括供试品溶液的制备和使用HPLC获取指纹图谱的步骤。色谱条件包括:色谱柱为C18色谱柱;检测波长为200‑400nm;流速0‑2mL/min;流动相:流动相A为甲醇或乙腈,流动相B为水,流动相A和/或流动相B添加0.01%‑5%的三氟  全部
背景技术:
羊蹄甲来源于绵羊或是山羊的蹄甲,民间用来调剂免疫及催乳,但需炮制后使用。 目前尚无羊蹄甲药用标准,也无相关鉴定研究,市场上也有将羊蹄甲炮制品与猪蹄甲炮制 品混用的现象,从而影响羊蹄甲炮制品的品质。因此,为了鉴定掺假的羊蹄甲炮制品,有必 要建立一种羊蹄甲炮制品的鉴定方法,有效保证羊蹄甲炮制品的药材品质,保证药材的临 床疗效。
技术实现要素:
为了解决以上现有技术存在的问题,本发明的目的在于提供一种羊蹄甲炮制品指 纹图谱的建立方法和羊蹄甲炮制品的鉴定方法。 为了实现上述目的,本发明提供以下技术方案: 一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法,该方法采用HPLC法对羊蹄甲炮制品进行鉴 定,其中色谱条件包括: 色谱柱为C18色谱柱; 检测波长为200-400nm; 流速0-2mL/min; 流动相:流动相A为甲醇或乙腈,流动相B为水,流动相A和/或流动相B添加0.01%-5%的 三氟乙酸(TFA); 流动相A的洗脱范围为0-10%。 进一步的,流动相A的洗脱浓度: 0~20  min,流动相A为1%; 20~30  min,流动相A为1-2%; 30~45min,流动相A为2%; 45~50  min,流动相A为2-10%; 50~55min,流动相A为10-1%; 55~60min,流动相A为1%。 进一步的,所述方法还包括供试品溶液的制备方法:取净羊蹄甲,大小分开,用砂 烫至鼓起呈金黄色时,取出,筛去砂子,放凉后粉碎;精密称取80目样品粉末1.0g,加15倍量 水,称定质量,回流30min,冷却至室温,水补足减失的质量,收取滤液,用0.45μm微孔滤膜滤 过,得供试品溶液。 进一步的,所述方法还包括吸取10μL供试品注入液相色谱仪进行测定,得到羊蹄 甲炮制品水溶性成分指纹图谱。 3 CN 111579674 A 说 明 书 2/3 页 一种羊蹄甲炮制品的鉴定方法,包括以下步骤: (1)根据权利要求1-4任一项所述的方法测定待测样本的指纹图谱; (2)将待测样本的指纹图谱与建立的标准指纹图谱进行对比,以特征峰计算,相似度不 低于0.85为合格。 进一步的,保留时间为19.49min的成分峰为羊蹄甲炮制品的特征峰。 有益效果:本发明提供了一种羊蹄甲炮制品指纹图谱的建立方法,该方法简单方 便、重现性好、准确率高,提高了羊蹄甲炮制品鉴定的准确性,确保了羊蹄甲炮制品的中药 品质。使用本发明的流动相体系和洗脱方法建立的指纹图谱,更好的呈现了羊蹄甲炮制品 的特征峰,便于对样本进行区分和鉴定。该方法具有良好的精密度、重复性和稳定性,对羊 蹄甲炮制品的鉴定起到重要的作用。 附图说明 图1 为羊蹄甲炮制品HPLC指纹图谱。 图2 为羊蹄甲、猪蹄甲炮制品HPLC指纹图谱对比图。
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