技术摘要：
本发明公开了制备微管溶素化合物、微管溶素药物接头化合物及其中间体的改进方法。
背景技术：
本发明涉及用于制备具有微管缬氨酸成分的酰胺氮原子取代的微管溶素及其中 间体的合成方法。 微管溶素是一类强效的细胞抑制剂，它们通过抑制微管蛋白聚合而表现出活性。 天然存在的微管溶素是线性四肽，由N-甲基D-哌啶酸(Mep)、异亮氨酸(Ile)、微管缬氨酸 (Tuv)、非天然氨基酸微管酪氨酸(Tut，酪氨酸的类似物)或微管苯丙氨酸(Tup，苯丙氨酸的 类似物)组成，其中微管酪氨酸和微管苯丙氨酸是非天然氨基酸，如式T所示： 已经研究微管溶素作为潜在的癌症化学疗法以及作为配体-药物偶联物(LDC)上 的有效载荷。包含N-取代的微管缬氨酸的微管溶素由于其效力而特别受关注(Sasse,F.et  al.J.Antibiot.(Tokyo)(2000)53(9):879-885，N-取代的微管溶素类似物的开发以及更有 效的制备方法具有临床意义。 通常，N-取代的微管溶素是通过肽合成从N-取代的微管缬氨酸衍生物开始组装 的。制备这种微管缬氨酸中间体和相应的微管溶素化合物的示例性方法参见Patterson等 人，具有高细胞毒性的N-甲基微管溶素类似物的简便合成(“Expedient  Synthesis  of  N- Methyl  Tubulysin  Analogues  with  High  Cytotoxicity”)J.Org .Chem.(2008)73(12): 4362-4369。 迄今为止，文献中报道的具有微管缬氨酸成分的酰胺氮原子取代的微管溶素化合 物的合成方法涉及多个步骤，这些步骤不容易规模化。因此，在本领域中需要改进的方法来 生产用于制备微管溶素化合物的N-取代的微管缬氨酸。本文描述的方法解决了未满足的需 求。 发明概述 本发明的主要实施方案提供了一种用于制备式2的微管缬氨酸化合物： 或者包含该化合物或基本上由该化合物组成的组合物的方法，所述化合物任选地 18 CN 111601803 A 说　明　书 2/185 页 为盐形式，式中：环Ar为1,3-亚苯基或含氮的5元或6元1,3-杂亚芳基，其在剩余的位置任选 地被取代；R1是叔丁基、9-芴基、烯丙基、任选取代的苯基或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的 C 63-C8杂烃基；R 是任选取代的C1-C8烃基， 所述方法包括以下步骤：(a)使式A的微管缬氨酸中间体： 任选地为盐形式，其中R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20 烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代 的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、 任选取代的C3-C20杂环基、或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基， 接触式B的化合物： R3NHC(O)OR1(B) , 该接触在合适的极性非质子溶剂中，在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催 化剂存在下，特别是包含选自Cu(II)，Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂存在下进行， 以形成由式AB表示的两种对映异构体微管缬氨酸中间体的混合物： 或者包含这些对映异构体中间体或基本上由这些对映异构体中间体组成的组合 物，各自任选地为盐形式；和 (b)使对映异构体的式AB微管缬氨酸中间体、或者包含这些中间体或基本上由这 些中间体组成的组合物(这些中间体各自任选地为盐形式)与合适的还原剂，特别是手性还 原剂接触，以形成由式R-1a的结构表示的两种非对映异构体的混合物，所述非对映异构体 各自为盐形式： 或者包含这些非对映异构体或这些盐或基本上由这些非对映异构体或这些盐组 成的组合物。 (c)使式R-1a的非对映异构体混合物、或包含该混合物或基本上由该混合物组成 的组合物与合适的水解剂接触，以形成由具有以下结构的式R-2表示的两种微管缬氨酸非 对映异构体化合物的混合物，所述化合物各自为盐形式： 或者包含这些非对映异构体或其盐或基本上由这些非对映异构体或其盐组成的 19 CN 111601803 A 说　明　书 3/185 页 组合物，其中式A、B和AB的可变基团如式2所定义。 其他主要实施方案提供了制备微管缬氨酸组合物的方法，所述组合物包含式R-1a 或式R-2所示的非对映异构体或者基本上由其组成，所述非对映异构体任选地为盐形式，作 为主要的光学异构体，其中R6为R-构型，在本文中分别描述为(R,R)-式1a或(R,R)-式2，其 中，相对于组合物中存在的式1a或式2光学异构体的总量，可归因于这些非对映异构体及其 各自的对映异构体，所述组合物包含的非对映异构体杂质或其盐不超过约10重量％，优选 不超过约5重量％，更优选不超过约1重量％或约0.5重量％，或基本不含式R-1a或式R-2的 R6是S构型的非对映异构体，其在本文中分别描述为(R,S)-式1a或(R,S)-式2，并且基本上 不含相应的对映异构体，即描述为(S,R)-式1a或(S,R)-式2的对映异构体，各自任选地为盐 形式，并且任选地包含主要光学异构体的对映异构体或其盐作为主要的光学杂质，其分别 描述为(S,S)-式1a或(S,S)-式2。在相关的实施方案中，提供了分别为纯化形式的式1a和式 2光学异构体，用作分析标准品，用于通过水解从中获得的(R,R)-式1a或(R,R)-式2的微管 缬氨酸化合物的立体选择性制备的其他方法的开发中。 其他主要实施方案提供了由具有相关结构的式R-1a或式R-2的微管缬氨酸化合物 的制备方法，所述相关结构中另一个O-连接的取代基取代了羟基。这些实施方案包括式R- 1a中的羟基被式-OR2的醚代替，其中R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3- C8烃基、任选取代的C -C 烯基或任选取代的C -C 炔基，或者其中R2是R2A，其中R2A是–CH 2C2 8 2 8 2R ， 其中R2C是任选取代的饱和C1-C8醚、任选取代的不饱和C3-C8醚、任选取代的C2-C8烯基或任选 取代的C2-C8炔基，然后是羧酸保护基的水解，由–OR1表示，并且在进一步的实施方案中，式2 中的羟基被式-OR2A的酯取代基代替，其中R2A是R2BC(＝O)-，其中R2B是任选取代的饱和C1-C8 烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C2-C8炔基。 其他主要实施方案提供了药物接头组合物，其中所述组合物的化合物具有季铵化 的微管缬氨酸药物单元，其由微管缬氨酸组合物制备并进一步提供由其衍生的配体药物偶 联物组合物。 在下面的“发明详述”和“权利要求”中更详细地描述了本发明的那些和其他实施 方案。
技术实现要素：
概述 本发明部分地基于以下发现，即可以使用显著简化的合成步骤顺序，从可商购的 起始原料制备微管缬氨酸类似物，从而大大缩短路线。具体而言，本发明提供了使用过渡金 属(II)-催化的Michael加成将适当保护的仲胺引入到微管缬氨酸前体中，容易地产生微管 缬氨酸衍生物，而不需要惰性气氛并且难以控制反应条件，因此增加了收率和缩短了总反 应时间。因此，本发明进一步提供了制备某些微管溶素化合物和相关药物接头化合物和配 体药物偶联物的改进方法。 1.定义 除非另外说明或上下文暗示，本文所用的术语具有以下定义的含义。除非另有禁 忌或暗示，例如，通过在这些定义和整个说明书中包括相互排斥的要素或选项，术语“一”和 “一个”表示一个或多个，术语“或”表示和/或，如果上下文允许的话。因此，在本说明书和所 20 CN 111601803 A 说　明　书 4/185 页 附权利要求书中所用的单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数的指代物，除非上下文中 另有明确的说明。 在本公开的多个位置，例如，在任意公开的实施方案或在权利要求中，参考“包括” 一个或多个具体组分、元素或步骤的方法、组合物或化合物。本发明的实施方案还具体包括 那些化合物、组合物、组合物或方法，这些化合物、组合物、组合物或方法由那些指定的组 分、元素或步骤组成或基本上由这些指定的组分、元素或步骤组成。例如，“包含”组分或步 骤的所公开的组合物，装置，制造制品或方法是开放式的，并且它们包括或读取那些组合物 或方法以及另外的组分或步骤。然而，这些术语不包括会破坏所公开的组合物，装置，制品 或其预期目的方法的功能的未列举元素。术语“包括”与术语“包含”可互换使用，并且被陈 述为等同术语。类似地，所公开的“由(组分或步骤)组成”的组合物，装置，制造制品或方法 是封闭式的，并且它们不包括或读取具有可观量的另外组分或附加步骤的那些组合物或方 法。此外，术语“基本上由......组成”允许包含对所公开的组合物，装置，制造制品或方法 用于其指定目的而言的功能性没有实质性影响的未列举的元素或步骤，如本文进一步定 义。本文所用章节标题仅用于组织目的，而不应理解为限制所述主题。除非另有说明，否则 采用质谱，NMR，HPLC，蛋白质化学，生物化学，重组DNA技术和药理学的常规方法。 与提供用于描述化合物或组合物的具体性质的数值或数值范围联用时，本文所用 的“约”表示该数值或数值范围可偏差到本领域普通技术人员认为合理的程度同时仍然描 述特定性质。合理的偏差包括那些在测量，确定或推导特定特性时所用仪器的精度或精确 度之内的偏差。具体地，在本文中使用时，术语“约”表示数值或数值范围可相对列出的数值 或数值范围变化10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、 0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％或0.01％，一般是10％至0.5％，更一般是5％至 1％，同时仍然描述具体性质。 关于下标p，其表示如本文进一步定义的配体药物偶联物组合物中的药物接头部 分的平均数目，术语“约”反映了本领域公认的不确定性，该不确定性是通过尺寸排阻或HIC 色谱法或HPLC-MS的标准方法由配体药物偶联化合物在该组合物中的分布确定该值的。 本文所用的术语“基本保留”和类似术语是指化合物或组合物或其部分的性质、特 征、功能或活性没有可检测地改变或在确定相关结构的化合物或组合物或部分的相同活 性、特征或性质的实验误差内。 本文所用的“基本上保留”和类似术语是指一种化合物或组合物或其部分的物理 性质或特征的测量值，其在统计学上不同于相关结构的另一种化合物或组合物或部分的相 同物理性质的确定，但是这种差异并不在用于评价活性或特性的合适生物测试系统中代表 生物活性或药理学特性的统计学意义上显著或有意义的差异(即生物学活性或特性基本保 留)。因此，短语“基本上保留”是指化合物或组合物的物理性质或特性对与该物理性质或特 征明确相关的生理化学或药理学性质或生物学活性的影响。 本文所用的“可忽略”或“可忽略的”是低于通过HPLC分析定量的水平的杂质的量， 并且如果存在光学杂质，则占其污染的组合物的约0.5重量％至约0.1重量％。根据上下文， 这些术语可以替代地表示在测量值或结果之间未观察到统计学上的显著差异，或在用于获 得这些值的仪器的实验误差之内。通过实验确定的参数值的可忽略的差异并不意味着以该 参数为特征的杂质的存在量可以忽略不计。 21 CN 111601803 A 说　明　书 5/185 页 如本文所用的“主要含有”、“主要具有”和类似术语是指混合物的主要组分。当混 合物具有两种组分时，则主要组分占混合物的50重量％以上。对于三种或更多种组分的混 合物，主要组分是混合物中存在量最大的组分，并且可以代表或可以不代表混合物的大部 分质量。 本文使用的术语“吸电子基团”是指通过感应和/或通过共振(无论哪个更主要)从 与其键连的原子吸去电子密度的官能团或电负性原子(即，官能团或原子可通过共振供电 子，但可以总体上通过感应吸电子)，并且往往使阴离子或富电子部分稳定化。吸电子效应 通常通过感应(虽然是衰减形式)传递到与键合原子相连的其他原子，该原子已经通过吸电 子基团(EWG)变得缺电子，由此降低更远反应中心的电子密度。 吸电子基团(EWG)通常选自：-C(＝O) ,-CN ,-NO2 ,-CX3 ,-X ,-C(＝O)OR’,-C(＝O) NH ,-C(＝O)N(R’)Rop2 ,-C(＝O)R’,-C(＝O)X,-S(＝O)2Rop,-S(＝O)2OR’,-SO3H2,-S(＝O) 2NH2,-S(＝O)2N(R’)Rop,-PO3H2,-P(＝O)(OR’)(ORop)2,-NO,-NH 3 ,-N(R’)(Rop) ,-N(Rop) 3 ,及 其盐(适当时)，其中X是-F、-Br、-Cl或-I，以及Rop在每次出现时独立地选自针对任选的取代 基的本文所述的基团，以及在一些方面，独立地选自C1-C6烃基和苯基，以及其中R’是氢且 Rop选自针对任选的取代基的本文所述的基团，以及在一些方面是C1-C12烃基、C1-C8烃基、C1- C6烃基或C1-C4烃基。EWG也可以是芳基(例如苯基)或杂芳基，取决于其取代基和某些缺电子 的杂芳基(例如吡啶)。因此，在一些方面，“吸电子基团”还包括缺电子的C5-C24杂芳基和C6- C24芳基，由于被吸电子取代基取代而缺电子。更典型地，吸电子基团独立地选自：-C(＝O) ,- CN,-NO2,-CX3和–X，其中X是卤素，通常选自-F和-Cl。取决于其取代基，任选取代的烃基部分 也可以是吸电子基团，因此在这种情况下，该术语被吸电子基团所涵盖。 本文使用的术语“供电子基团”是指通过感应和/或通过共振(无论哪个更主要)对 与其键连的原子增加电子密度的官能团或电正性原子(即，官能团或原子可通过感应吸电 子，但可以总体上通过共振供电子)，并且往往使阳离子或缺电子系统稳定化。供电子效应 通常通过共振传递到与键合原子相连的其他原子上，该原子被供电子基团(EDG)富电子化， 从而增加了更远反应中心的电子密度。通常，供电子基团选自：–OH ,-OR’,-NH2 ,-NHR’和N (R’)2,，其中每个R’独立地选自C1-C12烃基，通常为C1-C6烃基，前体是氮原子未质子化。取决 于它们的取代基，C6-C24芳基，C5-C24杂芳基或不饱和C1-C12烃基部分也可以是供电子基团， 并且在一些方面，这些部分包括在供电子基团的术语中。在某些方面，供电子基团是PAB或 PAB型自分解型间隔单元的取代基，其在活化时加速其断裂，据信这是通过醌甲基化物副产 物的稳定化而发生的。 本文所用的术语“化合物”是指并涵盖化合物本身，命名或通过结构表示，包括其 盐形式，无论是否明确说明，除非上下文明确表明此类盐形式为被排除在外。化合物盐包括 具有有机抗衡离子或无机抗衡离子的两性离子盐形式和酸加成盐和碱加成盐形式，以及涉 及两种或更多种相同或不同的抗衡离子的盐形式。在一些方面，盐形式是化合物的药学上 可接受的盐形式。术语“化合物”还包括化合物的溶剂化物形式，其中溶剂与化合物非共价 结合或与化合物可逆地共价结合，例如当化合物的羰基被水合形成偕二醇(gem-diol)醇或 化合物的亚胺键被水合形成醇胺。溶剂化物形式包括化合物本身及其盐形式的形式，包括 半溶剂化物，单溶剂化物，二溶剂化物，包括半水合物，水合物和二水合物；当化合物可以与 两个或更多个溶剂分子缔合时，两个或更多个溶剂分子可以相同或不同。在某些情况下，本 22 CN 111601803 A 说　明　书 6/185 页 发明的化合物将明确提及一种或多种上述形式，例如盐和/或溶剂化物，其通常并不意味着 该化合物为固态形式；然而，该参考仅是为了强调，并且不应被解释为排除以上确定的任何 其他形式。此外，当未明确提及化合物或配体药物偶联物组合物或其化合物的盐和/或溶剂 化物形式时，该省略不应解释为排除该化合物或偶联物的盐和/或溶剂化物形式，除非上下 文清楚地排除了这些盐和/或溶剂化物形式。 如本文所用，术语“光学异构体”是指与参考化合物进行比较的相关化合物，它们 均具有相同的原子连接性，但在结构上以相反的立体化学构型在一个或多个手性中心上不 同。例如，具有R,R-构型的两个手性中心的参考化合物将涉及其光学异构体，其中这些中心 处于R,S-,S,S-和S,R-构型。具有R,R-和R,S-构型的光学异构体与具有S,S-和S,R-构型的 光学异构体被称为非对映异构体。如果不存在其他手性中心，则R,R-和R,S-非对映异构体 分别作为对映异构体与S,S-和S,R-非对映异构体相关。在参考化合物仅具有两个R,R-构型 的手性中心的情况下，具有R,S和S,R-构型的相关化合物与该参考化合物是非对映异构体， 而具有S,S-构型的相关化合物成为其对映异构体。 本文所用的“部分”表示分子或化合物的具体区段、片段或官能团。化学部分有时 表示为嵌入或附加至(即取代基或可变基团)分子、化合物或化学式的化学实体。 除非上下文另有说明或暗示，否则对于本文中由给定碳原子范围描述的取代基或 部分，指定范围表示描述了任意单个的碳原子数。因此，提及例如“任选取代的C1-C4烃基”或 “任选取代的C2-C6烯基”具体分别是指存在如本文所定义的任选取代的1,2,3或4个碳的烃 基部分，存在如本文所定义的任选取代的2,3,4,5或6个碳的烯基部分。所有这些数字标记 明确地旨在公开所有单个碳原子基团；因此，“任选取代的C1-C4烃基”包括甲基，乙基，3-碳 烃基和4-碳烃基，包括它们的所有位置异构体，无论是取代的还是未取代的。因此，当烃基 部分被取代时，数字标记是指未取代的基础部分，并不旨在包括未直接连接至该基础部分 的取代基中可能存在的基础部分的碳原子。对于由给定范围的碳原子定义的本文所述的 酯、碳酸酯、氨基甲酸酯和脲，标号范围包括相应官能团的羰基碳。因此，C1酯是指甲酸酯，C2 酯是指乙酸酯。 本文所述的有机取代基、部分或基团，和本文所述的任意其他部分通常将排除不 稳定部分，除非这种不稳定部分是可用于制备对于本文所述的一种或多种用途具有足够化 学稳定性的化合物的瞬态物质。通过操作本文提供的定义导致具有五价碳的那些的取代 基，部分或基团被特别排除。 除非上下文另有说明或暗示，本文所用的“烃基(alkyl)”本身单独或作为另一个 术语的一部分是指甲基或连续碳原子的集合，其中一个或多个碳原子是饱和的(即，包含一 个或多个sp3碳)，并且以正、仲、叔或环状排列，即线性、分支、环状排列或其一些组合共价 连接到一起。当连续的饱和碳原子处于环状排列时，在某些方面，这些烃基部分被称为如本 文所定义的碳环基。 当将烃基部分或基团称为烃基取代基时，与其相关的马库什结构或另一有机部分 的该烃基取代基是甲基或连续碳原子链，除非上下文另有说明或暗示是非环状的，通过烃 基取代基的sp3一价碳共价连接至该结构或部分。因此，本文所用的烃基取代基包含至少一 个饱和部分，并且还可以任选地被环烃基或芳族或杂芳族部分或基团或被烯基或炔基部分 取代，从而产生不饱和的烃基。因此，任选取代的烃基取代基可以另外包含一个、两个、三个 23 CN 111601803 A 说　明　书 7/185 页 或更多个独立选择的双键和/或三键，或者可以被烯基或炔基部分或它们的某种组合取代 以定义不饱和烃基取代基，并且可以被包括如本文所述的合适的任选取代基的其它部分所 取代。饱和烃基(即，烷基)中的碳原子数可以变化，通常为1-50、1-30或1-20，更通常为1-8 或1-6，并且在不饱和烃基部分或基团中的碳原子数通常为3-50、3-30或3-20，通常在3-8或 3-6之间变化。 饱和的烃基部分包含饱和的非环状碳原子(即非环状的sp3碳原子)，并且不含sp2 或sp碳原子，但是可以用本文所述的任选取代基取代，条件是除非特别说明，这种取代不是 通过任选取代基的sp3、sp2或sp碳原子进行，这样会影响如此取代的基础烃基部分的身份。 除非上下文另有说明或暗示，否则术语“烃基”将指示饱和的非环状烃基基团，其中所述烃 基基团具有指定数目的共价连接的饱和碳原子，使得术语例如“C1-C6烃基”或“C1-C6烃基” 是指含有1个饱和碳原子(即甲基)或2、3、4、5或6个连续的非环状饱和碳原子的饱和烃基部 分或基团，并且“C1-C8烃基”是指具有1个饱和碳原子或2、3、4、5、6、7或8个连续的饱和非环 碳原子的饱和烃基部分或基团。通常，饱和烃基是在其连续碳链中不包含sp2或sp碳原子的 C1-C6或C1-C4烃基部分，有时将其称为低级烃基，在某些方面，当未指定碳原子数时，是指在 其连续的碳链中具有1至8个连续的非环状sp3碳原子且不包含sp2或sp碳原子的饱和C1-C8 烃基部分。在其他方面，当一定范围的连续碳原子定义术语“烃基”但未将其指定为饱和或 不饱和时，则该术语涵盖具有指定范围的饱和烃基和不饱和烃基，其中该范围的下限存在 两个碳原子的差异。例如，术语“C1-C8烃基”没有进一步限制是指饱和的C1-C8烃基和C3-C8不 饱和烃基。 当指定饱和的烃基取代基、部分或基团时，物质包括由从母体烃中去除氢原子衍 生的那些物质(即，烃基部分是一价的)，并且可包括甲基、乙基、1-丙基(正丙基)、2-丙基 (异丙基，-CH(CH3)2)、1-丁基(正丁基)、2-甲基-1-丙基(异丁基，-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(仲 丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(叔丁基，-C(CH3)3)、戊基、异戊基、仲戊基和其他直 链和支链烃基部分。 除非上下文另有说明或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的“亚烃基”是指取代或未取代的饱和的支链或直链烃双基团，其中一个或多个碳原子是 饱和的(即，由一个或多个sp3碳组成)，其具有所述数目的碳原子，通常为1至50个碳原子或 1至30个碳原子，典型的1至20个碳原子或1至12个碳原子，更典型的1至8个，1至6个或1至4 个碳原子，并且具有通过从母体烃的相同或两个不同的饱和(即sp3)碳原子中去除两个氢 原子而衍生的两个基团中心(即，是二价的)。在一些方面，亚烃基部分是如本文所述的烃基 基团，其中氢原子已经从其另一个饱和碳中或从烃基基团的基团碳上去除以形成双基团。 在其他方面，亚烃基部分被或进一步由从母体烃基部分的饱和碳原子上去除氢原子而衍生 的二价部分涵盖，并且例如但不限于亚甲基(-CH2-)、1,2-亚乙基(-CH2CH2-)、1,3-亚丙基(- CH2CH2CH2-)、1,4-亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)以及类似双基团。通常，亚烃基是仅含有sp3碳的 支链或直链烃(即，尽管存在基团碳原子，但是完全饱和的)并且在一些方面是未取代的。在 其他方面，亚烃基包含一个或多个双键和/或三键官能团，通常为1或2，更通常为1的此类官 能团形式的不饱和内部位点，不饱和亚烃基部分的末端碳原子是一价sp3碳原子。在其他方 面，亚烃基被1-4个，典型地1-3个，或1或2个取代基取代，如本文中对任选的取代基所定义 的，除非另有特别说明，否则不包括在饱和亚烃基部分的饱和碳原子或不饱和亚烃基部分 24 CN 111601803 A 说　明　书 8/185 页 的饱和和/或不饱和碳原子上的烃基、芳基烃基、烯基、炔基和任何其他部分，使得取代的亚 烃基/亚烃基的连续的非芳族碳原子的数目相对于未取代的亚烃基没有区别。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的“碳环基”是指单环、双环或三环环系的基团，其中形成环系的原子(即，骨架原子)中的 每一个为碳原子，并且其中环状环系的每个环中的这些碳原子中的一个或多个是饱和的 (即，由一个或多个sp3碳构成)。因此，碳环基是饱和碳的环状排列，但也可含有一个或多个 不饱和碳原子并且因此其碳环可以是饱和的或部分不饱和的，或者可以与芳族部分稠合， 其中与环烃基或芳族环的稠合点与碳环基部分的不饱和碳相邻并与芳族部分的芳族碳相 邻。 除非另有说明，否则碳环基可以被关于烃基、烯基、炔基、芳基、芳基烃基、烃基芳 基等描述的部分取代(即，任选地被取代)，或者可以被另一个环烃基部分取代。环烃基部 分、基团或取代基包括环丙基、环戊基、环己基、金刚烷基或其他在其环系统中仅具有碳原 子的环部分。 当使用碳环基作为马库什基团(即取代基)时，碳环基通过包括在碳环基部分的碳 环环系中的碳原子连接至与其相关的马库什式或另一有机部分，条件是碳原子不是芳族 的。当包括碳环基取代基的烯烃部分的不饱和碳连接至与其相关的马库什式时，所述碳环 基有时被称为环烯基取代基。碳环基取代基中的碳原子的数目由其碳环环系的骨架原子的 总数目限定。除非另有说明，所述数目可以变化，通常为3至50、1至30、或1至20，更典型地3 至8或3至6个碳原子的范围内，例如，C3-C8碳环基是指含有3、4、5、-6、7、或8个碳环碳原子的 碳环基取代基、部分或基团，并且C3-C6碳环基是指含有3、4、5、或6个碳环碳原子的碳环基取 代基、部分或基团。碳环基可以是通过从母体环烷烃或环烯烃的骨架环原子上去除一个氢 原子而衍生的。代表性的C3-C8碳环基包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环戊二烯基、 环己基、环己烯基、1,3-环己二烯基、1,4-环己二烯基、环庚基、1,3-环庚二烯基、1,3,5-环 庚三烯基、环辛基和环辛二烯基。 因此，碳环基取代基、部分或基团在其碳环系统中通常具有3、4、5、6、7、8个碳原 子，并且可以含有外或内环双键或内环三键或两者的组合，其中内环双键或三键或两者的 组合不会形成4n 2个电子的环状共轭体系。双环系统可以共享两个碳原子，而三环系统可 以共享总共3个或4个碳原子。在一些方面，碳环基是C3-C8或C3-C6碳环基，其可以被本文所 述的烃基、烯基、炔基、芳基、芳基烃基和烃基芳基和/或具有其他部分中的一个或多个，例 如1-4个，典型地1-3个，或1或2个部分取代(即任选地取代)，包括如本文所定义的用于任选 取代基的取代基，并且在一些方面是未取代的。在其他方面，环烃基部分、基团或取代基是 选自环丙基、环戊基和环己基的C3-C6环烃基，或者是C3-C8环烃基，包括该基团并进一步包 括其环状环系统中具有不超过8个碳原子的其他环状部分。当未指出碳原子数时，碳环基部 分、基团或取代基在其碳环系统中具有3至8个碳原子。 除非上下文另行指出或暗示，否则“碳环”本身或作为另一术语的一部分是指如上 定义的任选取代的碳环基，其中其环烃基环系的另一个氢原子已被去除(即，它是二价的)， 通常为C3-C50或C3-C30碳环，典型地C3-C20或C3-C12碳环，更典型地C3-C8或C3-C6碳环，并且在 一些方面是未取代或任选取代的C3、C5或C6碳环。当未指出碳原子数时，碳环部分、基团或取 代基在其碳环系统中具有3至8个碳原子。 25 CN 111601803 A 说　明　书 9/185 页 在一些方面，从环烃基的一价碳原子上除去该另一个氢原子以提供二价碳原子， 在某些情况下，该二价碳原子是螺环碳原子，该螺碳原子中断了与该碳环碳原子的烃基部 分。在这样的情况下，螺碳原子归属于中断的烃基部分和碳环系统的碳原子计数，其中碳环 被指示结合到烃基部分中。在该方面，碳环部分、基团或取代基是螺环系统形式的C3-C6碳 环，选自：环丙-1,1-二基，环丁-1,1-二基，环戊-1,1-二基和环己-1,1-二基，或者是环系统 中具有不超过8个碳原子的C3-C8碳环或其他二价环状部分。碳环可以是饱和的或不饱和的 碳环，和/或可以以与对于碳环基部分所述相同的方式被取代或未被取代。如果不饱和，则 碳环部分的一个或两个单价碳原子可以是来自相同或不同的双键官能团的sp2碳原子，或 者两个单价碳原子可以是相邻或不相邻的sp3碳原子。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“烯基”是指包括一个或多个双键官能团或1、2、3、4、5、或6或更多个，通常1、2、或3 个这样的官能团、更通常一个这样的官能团的有机部分、取代基或基团(例如，-CH＝CH-部 分)，并且在一些方面可以被芳基部分或基团诸如苯基取代(即，任选取代)，或者可以包含 非芳族连接的正构、仲、叔或环碳原子，即线性、支链、环状或它们的任何组合，作为基础部 分的一部分，除非烯基取代基、部分或基团是乙烯基部分(例如，-CH＝CH2部分)。具有多个 双键的烯基部分、基团或取代基可以具有与一个或多个中间饱和碳原子或其组合连续或不 连续地排列的双键(即1,3-丁二烯基部分)，前提是双键的环状连续排列不会形成4n 2个电 子的环状共轭体系(即不是芳族的)。 烯基部分、基团或取代基包含至少一个sp2碳原子，其中该碳原子为二价并与与其 相关的另一有机部分或马库什结构双重键合，或者包含至少两个彼此共轭的sp2碳原子，其 中一个sp2碳原子为单价并且单键结合至与其相关的另一有机部分或马库什结构。通常，当 烯基用作马库什基团(即，是取代基)时，烯基通过烯基部分的烯基官能团的sp2碳单键键合 至与其相关的马库什式或另一种有机部分。在一些方面，当指定烯基部分时，物质涵盖与任 何具有一个或多个内双键的本文所述的任选取代的烃基或碳环基、基团部分或取代基相对 应的基团，其中其sp2碳原子为单价和从母体烯烃化合物的sp2碳上除去氢原子后得到的单 价部分。这种单价部分例如但不限于：乙烯基(-CH＝CH2)、烯丙基、1-甲基乙烯基、丁烯基、 异丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、环戊烯基、1-甲基-环戊烯基、1-己烯基、3-己烯基 以及环己烯基。在一些方面，术语烯基涵盖那些和/或其他直链、环状和支链的、包含至少一 个双键官能团的所有含碳部分，其中sp2碳原子之一为单价。 烯基部分中的碳原子数目由将其定义为烯基取代基的一个或多个烯烃官能团的 sp2碳原子的数目以及连接至这些sp2碳中的每一个的连续非芳族碳原子的总数目确定，其 不包括对其而言烯基部分是可变基团的其他部分或马库什结构的任何碳原子，以及对于烯 基部分的任何任选的取代基。当烯基部分的双键官能团双键合至马库什结构时(例如＝ CH2)，所述数目可以在1至50、通常1至30、1至20、或1至12，更通常1至8、1至6、或1至4个碳原 子的范围内变化，或者当双键官能团单键合至马库什结构时(例如，-CH＝CH2)，可以在2至 50、通常2至30、2至20、或2至12，更通常2至8、2至6、或2至4个碳原子的范围内变化。例如， C2-C8烯基或C2-C8烯基是指含有2、3、4、5、6、7、或8个碳原子的烯基部分，其中至少两个是彼 此共轭的sp2碳原子，其中这些碳原子中的一个是单价的，并且C2-C6烯基或C2-C6烯基是指 含有2、3、4、5、或6个碳原子的烯基部分，其中至少两个是彼此共轭的sp2碳，其中这些碳原 26 CN 111601803 A 说　明　书 10/185 页 子中的一个是单价的。在一些方面，烯基取代基或基团是仅具有两个彼此共轭的sp2碳的C2- C6或C2-C4烯基部分，这些碳原子之一为单价，而在其他方面，烯基部分未被取代，或被1-4个 或更多个，通常为1-3个，更通常为1或2个，如本文所公开的独立选择的部分所取代，包括如 本文所定义的用于任选取代基的取代基，除非另有具体说明，否则不包括烃基、芳基烃基、 杂芳基烃基、烯基、炔基和任何其他部分，因此相对于未取代的烯基，取代的烯基的区别仅 在于连续的非芳族碳原子数，其中取代可以在烯基部分的连续sp2碳原子和sp3碳原子上的 任何一个上发生(如果有的话)。通常，烯基取代基是仅具有两个彼此共轭的sp2碳的C2-C6或 C2-C4烯基部分。当未指出碳原子的数目时，烯基部分具有2至8个碳原子。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身作为另一术语的一部分所用 的“亚烯基”是指包括如先前针对烯基所述的具有所述数目的碳原子的一个或多个双键部 分的有机部分、取代基或基团，并且其具有通过从母体烯烃中的烯烃官能团的相同或两个 不同的sp2碳原子上去除两个氢原子而衍生的两个基团中心。在一些方面，亚烯基部分是如 本文所述的烯基基团的部分，其中氢原子已经从烯基基团的双键官能团的相同或不同的 sp2碳原子上去除，或从不同的双键合部分的sp2碳上去除以提供双基团。通常，亚烯基部分 涵盖含有-C＝C-或-C＝C-X1-C＝C-结构的双基团，其中X1不存在或是如本文所定义的任选 取代的饱和亚烃基，其通常为C1-C6亚烃基，更通常是未取代的。亚烯基部分中碳原子的数目 由将其定义为亚烯基部分的一个或多个其烯烃官能团的sp2碳原子的数目限定，并且连接 至其sp2碳中的每一个的连续非芳族碳原子的总数目不包括其中烯基部分作为可变基团存 在的其他部分或马库什结构的任何碳原子。所述数目可以变化且除非另外指明，在2至50、 通常2至30、2至20、或2至12、更通常2至8、2至6、或2至4的范围内变化。例如，C2-C8亚烯基或 C2-C8亚烯基是指含有2、3、4、5、6、7、或8个碳原子的亚烯基部分，其中至少两个是彼此共轭 的sp2碳，其中一个是二价或者都是单价，并且C2-C6亚烯基或C2-C6亚烯基是指含有2、3、4、 5、或6个碳原子的烯基部分，其中至少两个是彼此共轭的sp2碳，其中一个是二价或者都是 单价。在一些方面，亚烯基部分是具有两个彼此共轭的sp2碳的C2-C6或C2-C4亚烯基，其中两 个sp2碳都是单价，并且在一些方面是未取代的。当未指出碳原子的数目时，亚烯基部分具 有2至8个碳原子，并且未取代或以与烯基部分所述相同的方式取代。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“炔基”是指包括一个或多个三键官能团(例如，-C≡C-部分)或1、2、3、4、5、或6或 更多个，通常1、2、或3个这样的官能团、更通常一个这样的官能团的有机部分、取代基或基 团，并且在一些方面可以被芳基部分诸如苯基、或被烯基部分或连接的正构、仲、叔或环碳 原子，即线性、支链、环状或它们的任何组合取代(即，任选取代)，除非炔基取代基、部分或 基团为-C≡CH)。具有多个三键的炔基部分、基团或取代基可具有连续排列的三键或具有一 个或多个插入的饱和或不饱和碳原子的不连续排列的三键或它们的组合，条件是三键的环 状、连续排列不形成4n 2电子的环状共轭体系(即，不是芳族的)。 炔基部分、基团或取代基含有至少两个sp碳原子，其中碳原子彼此共轭并且其中 sp碳原子中的一个单独键合至与其相关的另一有机部分或马库什结构。当炔基用作马库什 基团(即，是取代基)时，炔基通过末端炔烃官能团中的三键碳(即sp碳)单独键合至与其相 关的马库什式或另一有机部分。在一些方面，当指定炔基部分、基团或取代基时，物质涵盖 本文所述的任何任选取代的烃基或碳环基、基团部分或取代基，其具有一个或多个内三键 27 CN 111601803 A 说　明　书 11/185 页 和由从母体炔烃化合物的sp碳上去除氢原子而衍生的单价部分。这种单价部分包括但不限 于：-C≡CH、-C≡C-CH3、-C≡C-Cl和-C≡C-Ph。 炔基取代基中碳原子的数目由将其定义为炔基取代基的炔烃官能团的sp碳原子 的数目限定，并且连接至这些sp碳中的每一个的连续非芳族碳原子的总数目不包括对其而 言炔基部分是可变基团的其他部分或马库什结构的任何碳原子。所述数目可以在2至50，通 常2至30、2至20、或2至12，更通常2至8、2至6、或2至4个碳原子的范围内变化，其中三键官能 团单键合至马库什结构(例如，-CH≡CH)。例如，C2-C8炔基或C2-C8炔基是指含有2、3、4、5、6、 7、或8个碳原子的炔基部分，其中至少两个是彼此共轭的sp碳原子，其中这些碳原子中的一 个是单价的，并且C2-C6炔基或C2-C6炔基是指含有2、3、4、5、或6个碳原子的炔基部分，其中 至少两个是彼此共轭的sp碳，其中这些碳原子中的一个是单价的。在一些方面，炔基取代基 或基团是具有两个彼此共轭的sp碳的C2-C6或C2-C4炔基部分，其中这些碳原子中的一个是 单价的，并且在其他方面，所述炔基部分是未取代的。当未指出碳原子的数目时，炔基部分、 基团或取代基具有2至8个碳原子。炔基部分可以与对烯基部分所述相同的方式被取代或未 被取代，除了不允许在单价sp碳上进行取代。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“芳基”是指包括1、2、3、或4至6个芳环、通常1至3个芳环、更通常1或2个芳环或者 由这些芳环组成的具有没有环杂原子的芳族或稠合的芳族环系的有机部分、取代基或基 团，其中每个环原子独立地被任选取代，其中环仅由参与4n 2电子的环状共轭体系(休克尔 规则(Hückel  rule))的碳原子构成，通常为6、10或14个电子，其中的一些可另外参与和杂 原子的环外共轭(交叉共轭，例如醌)。芳基取代基、部分或基团通常由6、8、10、或更多个芳 族碳原子形成，最多至24个，以包括C6-C24芳基，并且在一些方面是C6-C20或C6-C12芳基。芳基 取代基、部分或基团是任选取代的，并且在一些方面是未取代的或被1、2、3或更多个，通常1 或2个如本文针对烃基、烯基、炔基或其他部分所定义的独立选择的取代基取代，包括另一 芳基或杂芳基以形成联芳基或杂联芳基以及本文定义的其他任选取代基。在其他方面，芳 基是C6-C10芳基，例如苯基、萘基和菲基。由于中性芳基部分中的芳香性需要偶数个电子，应 理解，所述部分的给定范围将不涵盖具有奇数个芳族碳的物质。当芳基用作马库什基团(即 取代基)时，芳基通过芳基基团的芳族碳连接至与其相关的马库什式或另一有机部分。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“杂环基”是指其中碳环环系内的一个或多个但并非所有骨架碳原子连同它们连 接的氢原子一起被独立选择的杂原子或杂原子部分代替的碳环基，所述杂原子在允许的情 况下被任选取代，包括但不限于N/NH、O、S、Se、B、Si、以及P，其中两个或更多个杂原子或杂 原子部分(通常是2个)可以彼此相邻或由相同环系内的一个或多个碳原子(通常为1至3个 原子)分开。那些杂原子或杂原子部分通常是N/NH、O和S。杂环基通常包含一价骨架碳原子 或一价杂原子或杂原子部分，并且在杂环环系中含有总共1至10个、通常总共1至5个，或者 更典型地总共1至3个、或1或2个杂原子和/或杂原子部分，条件是杂环环系中任何一个环的 并非所有骨架原子都是杂原子和/或杂原子部分(即每个环中至少一个碳原子未被取代并 且其中一个环中至少有一个碳原子被取代)，其中一个或多个环中在允许的情况下被任选 取代的每个杂原子或杂原子部分独立地选自N/NH、O和S，条件是任何一个环不含有两个相 邻的O或S原子。示例性的杂环基和杂芳基统称为杂环，由Paquette ,Leo  A.；"Principles  28 CN 111601803 A 说　明　书 12/185 页 of  Modern  Heterocyclic  Chemistry"(W.A.Benjamin,纽约,1968) ,具体地第1、3、4、6、7和 9章；"The  Chemistry  of  Heterocyclic  Compounds ,A  series  of  Monographs"(John  Wiley&Sons ,纽约,1950至今) ,具体地第13、14、16、19和28卷；以及J.Am.Chem.Soc.1960, 82:5545-5473，具体地5566-5573)提供。 当杂环基用作马库什基团(即取代基)时，杂环基的饱和或部分不饱和的杂环通过 所述杂环的碳原子或杂原子连接至与其相关的马库什结构或其他部分，其中这种连接不导 致所述碳或杂原子的不稳定或不允许的形式氧化态。该上下文中的杂环基是单价部分，其 中将其定义为杂环基的杂环环系的杂环是非芳族的，但可以与碳环、芳基或杂芳基环稠合 并包括苯基-(即苯并)稠合的杂环部分。 杂环基是C3-C50或C3-C30碳环基，通常是C3-C20或C3-C12碳环基，更通常是C3-C8或C3- C6碳环基，其中其环烃基环系统中的1、2、3或更多个，但不是所有的碳与其连接的氢一起被 通常1、2、3或4个，更典型地1或2个杂原子或杂原子部分代替，所述杂原子或杂原子部分独 立地选自N/NH、O和S，如果允许的话任选地取代，因此形成C3-C50或C3-C30杂环基，通常是C3- C20或C3-C12杂环基，更通常是C3-C6或C5-C6杂环基，其中下标表示杂环基的杂环系统中骨架 原子的总数(包括其碳原子和杂原子)。在一些方面，杂环基含有0至2个N、0至2个O、或0至1 个S骨架杂原子，其任选地被取代或它们的某种组合，条件是至少一个所述杂原子存在于杂 环基的杂环系统中。杂环基可以是饱和的或部分不饱和的和/或未被取代的或在骨架碳原 子上被氧代(＝O)部分取代，如在吡咯烷-2-酮中，和/或在骨架杂原子上被一个或两个氧代 部分取代，它们是存在的示例性杂原子任选取代基，以包含氧化的杂原子，例如但不限于-N (＝O)、-S(＝O)-、或-S(＝O)2-。完全饱和或部分不饱和的杂环基可以被烃基、(杂)芳基、 (杂)芳基烃基、烯基、炔基或本文所述的其他部分取代或进一步取代，包括本文所定义的任 选取代基或2、3或更多种的组合，典型地1或2种这样的取代基。在某些方面，杂环基选自吡 咯烷基、哌啶基、吗啉基和哌嗪基。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“杂环”是指如上文定义的杂环基部分、基团或取代基，其中来自单价碳原子的氢 原子、来自其他骨架原子(碳或氮原子，如果存在氮的话)的氢原子，或来自骨架氮原子的电 子(在允许的情况下)被去除，或者来自尚未单价的氮环原子的电子被去除并且被键取代 (即它是二价的)。在一些方面，被取代的第二氢是母体杂环基的一价碳原子的第二氢，从而 形成螺碳原子，在某些情况下，螺碳原子可以中断与该碳环碳原子的烃基部分。在这样的情 况下，螺碳原子归属于中断的烃基部分的碳原子计数和结合到烃基部分中的杂环的杂环环 系统的骨架原子计数。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“杂芳基”是指如本文所定义的芳基部分、基团或取代基，其中芳基的芳族环系的 一个或多个但并非全部芳族碳被杂原子替代。杂芳基通常在杂芳基环系的一个或多个环中 含有总共1至4个骨架杂原子，条件是杂芳基中任何一个环系的并非全部骨架原子都是杂原 子，在允许的情况下可以被任选取代，具有0至3个N原子、1至3个N原子、或0至3个N原子，通 常0至1个O原子和/或0至1个S原子，条件是存在至少一个杂原子。杂芳基可以是单环、双环 或多环的。多环杂芳基通常是C5-C50或C5-C30杂芳基，更通常是C5-C20或C5-C12杂芳基，双环杂 芳基通常是C5-C10杂芳基，单环杂芳基通常是C5-C6杂芳基，其中下标指示杂芳基的一个或多 29 CN 111601803 A 说　明　书 13/185 页 个芳族环系的骨架原子(包括其碳原子和杂原子)的总数。在一些方面，杂芳基是双环芳基 部分，其中母体双环部分的一个或多个芳环的一个1、2、3、4或更多个，更典型地1、2或3个碳 原子及其连接的氢原子被独立选择的杂原子或杂原子部分替代，或者是单环芳基部分，其 中母体单环芳基部分的一个或多个芳环的一个1、2、3或更多个，更典型地1或2个碳原子及 其连接的氢原子被独立选择的杂原子或杂原子部分替代，其中杂原子或杂原子部分在允许 的情况下被任选取代，包括N/NH、O和S，条件是母体芳基部分中任何一个芳族环系的并非所 有骨架原子都被杂原子替代且更通常被氧(-O-)、硫(-S-)、氮(＝N-)或-NR-替代，-NR-即杂 原子部分，由此使得氮杂原子被任选取代，其中R为-H、氮保护基或任选取代的C1-C20烃基或 是任选取代的C6-C24芳基或C5-C24杂芳基以形成联芳基。在其他方面，母体芳基部分的一个 或多个芳环的1、2或3个碳原子及其连接的氢原子以保留环状共轭体系的方式被用另一个 有机部分替代的氮取代。在其他方面，母体芳基部分的芳族碳基团被芳族氮基团取代。在这 些方面的任一种情况下，氮、硫或氧杂原子通过与环系中的相邻原子的π键合或通过杂原子 上的孤对电子参与共轭体系。在其他方面，杂芳基具有如本文所定义的杂环基的结构，其中 其环系统已被芳香化。 通常，杂芳基是单环的，其在一些方面具有5元或6元杂芳族环系。5元杂芳基是在 其杂芳族环系内含有1至4个芳族碳原子以及必需数量的芳族杂原子的单环C5-杂芳基。6元 杂芳基是在其杂芳族环系内含有1至5个芳族碳原子以及必需数量的芳族杂原子的单环C6- 杂芳基。5元的杂芳基具有4、3、2或1个芳族杂原子，6元的杂芳基包括具有5、4、3、2、或1个芳 族杂原子的杂芳基。 C5-杂芳基，也称为5元杂芳基，是由在允许的情况下从来自母体芳族杂环化合物 的骨架芳族碳上去除氢原子或从骨架芳族杂原子上去除电子而衍生的单价部分，所述母体 芳族杂环化合物在一些方面选自：吡咯、呋喃、噻吩、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、咪唑、吡 唑、三唑和四唑。在其他方面，母体杂环选自：噻唑、咪唑、噁唑和三唑，并且通常为噻唑或噁 唑，更通常为噻唑。 6元的C6杂芳基是由在允许的情况下从来自母体芳族杂环化合物的芳族碳上去除 氢原子或从芳族杂原子上去除电子而衍生的单价部分，所述母体芳族杂环化合物在一些方 面选自：吡啶、哒嗪、嘧啶和三嗪。杂芳基可以被烃基、(杂)芳基烃基、烯基、炔基取代或进一 步取代，或被芳基或另一杂芳基取代或进一步取代以形成杂联芳基，或者被本文所述的其 他部分取代或进一步取代，包括本文所定义的任选取代基，或2、3或更多种的组合，典型地1 或2种这样的取代基。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“5元含氮杂芳基”是指在其芳环系统中包含至少一个氮原子的单价5元杂芳族部 分，通常为单环杂芳基或与芳基或另一个杂芳基环系统稠合，其中，5元杂芳部分含有一个 或多个独立地选自N/NH、O和S的其他杂原子和/或杂原子部分，在允许的情况下任选地被取 代。示例性的5元杂亚芳基包括其中母体杂环是噻唑、咪唑、噁唑和三唑并且通常是噻唑或 噁唑，更通常是噻唑的那些。 如在本文通过自身或作为另一术语的一部分使用的术语“芳基烃基”或“杂芳基烃 基”是指与烃基部分键合的芳基或杂芳基部分，即(芳基)-烃基-，其中烃基和芳基基团如上 文所述。通常，芳基烃基是(C6-C24芳基)-C1-C12烃基部分、基团或取代基，并且杂芳基烃基是 30 CN 111601803 A 说　明　书 14/185 页 (C5-C24杂芳基)-C1-C12烃基部分、基团或取代基。当(杂)芳基烃基用作马库什基团(即取代 基)时，(杂)芳基烃基的烃基部分通过其烃基部分的sp3碳连接至与其相关的马库什式。在 一些方面，芳基烃基是(C6-C24芳基)-C1-C12烃基-或(C6-C20芳基)-C1-C20烃基-，通常为(C6- C12芳基)-C1-C12烃基-或(C6-C10芳基)-C1-C12烃基-，更通常为(C6-C10芳基)-C1-C6烃基-，例 如但不限于C6H5-CH2-、C6H5-CH(CH3)CH2-和C6H5-CH2-CH(CH2CH2CH3)-。(杂)芳基烃基-可以是 未取代的或以与(杂)芳基和/或烃基部分所述相同的方式取代。如本文定义的被任选取代 的芳基取代的任选取代的烃基部分也是任选取代的芳基烃基，因此落入任选取代的烃基的 定义之内，除非上下文另有说明或暗示。 除非上下文另行指出或暗示，否则本文所用的“亚芳基”或”杂亚芳基”本身或作为 另一术语的一部分是芳族或杂芳族双基团部分，在另一有机部分内形成二个共价键(即，它 是二价的)，所述键可以是邻位、间位或对位构型。亚芳基和一些杂亚芳基包括通过从如本 文定义的母体芳基或杂芳基部分、基团或取代基中去除氢原子而得到的二价物质。其他杂 亚芳基是二价物质，其中已从母体芳族杂环的两个不同芳族碳原子上除去氢原子以形成二 价基团，或从母体芳族杂环的芳族碳原子或杂原子上除去氢原子以及从不同的芳族杂原子 除去另一个氢原子或电子以形成二价基团，其中一个芳族碳原子和一个芳族杂原子为单价 或两个不同的芳族杂原子为单价。杂亚芳基进一步包括其中杂原子和/或杂原子部分取代 母体亚芳基的一个或多个但不是全部芳族碳原子的那些。 任选在其余位置上取代的非限制性示例性亚芳基为1,2-亚苯基，1,3-亚苯基和1, 4-亚苯基，如以下结构所示： 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或作为另一术语的一部分所 用的术语“5元含氮杂亚芳基”是指在其芳环系统中包含至少一个氮原子的二价5元杂芳族 部分，通常为单环杂亚芳基或与芳基或另一个杂芳基环系统稠合，其中，5元杂芳族部分可 额外地含有一个或多个独立地选自N/NH、O和S的其他杂原子和/或杂原子部分，在允许的情 况下任选地被取代。示例性的5元杂亚芳基包括其中母体杂环是噻唑、咪唑、噁唑和三唑并 且通常是噻唑或噁唑，更通常是噻唑的那些。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或与另一术语组合使用的 “杂烃基”是指任选取代的直链或支链烃，完全饱和或含有1至3个不饱和度且由1至12个碳 原子和1至6个杂原子、通常1至5个碳原子、更通常1或2个杂原子组成，所述杂原子或杂原子 部分选自O、N/NH、Si和S，在允许的情况下被任选取代，并且包括独立地被任选氧化成N-氧 化物、亚砜或砜的每个氮和硫原子，或其中一个或多个氮原子中的一个被任选取代或季铵 化。一个或多个杂原子或杂原子部分O、N、S、和/或Si可以位于杂烃基基团的任何内部位置 或杂烃基的任选取代的烃基基团的末端位置。在一些方面，杂烃基是完全饱和的或含有1个 不饱和度并且含有1至6个碳原子和1至2个杂原子，并且在其他方面，杂烃基是未取代的。非 限制性例子包括：–CH2-CH2-O-CH3 ,-CH2-CH2-NH-CH3 ,-CH2-CH2-N(CH3)-CH3 ,-CH2-S-CH2- CH3,-CH2-CH2-S(O)-CH3,-NH-CH2-CH2-NH-C(O)-CH2-CH3,-CH2-CH2-S(O)2-CH3,-CH＝CH-O- 31 CN 111601803 A 说　明　书 15/185 页 CH3,-Si(CH3)3,-CH2-CH＝N-O-CH3和–CH＝CH-N(CH3)-CH3。最多达两个杂原子可以是连续 的，例如-CH2-NH-OCH3和–CH2-O-Si(CH3)3。 除非上下文另行指出，否则杂烃基通常通过其邻接的一个或多个杂原子和非芳族 碳原子的数目表示，包括与杂原子邻接的那些连续的碳原子。因此，–CH2-CH2-O-CH3和-CH2- CH2-S(O)-CH3均为C4-杂烃基，-CH2-CH＝N-O-CH3和–CH＝CH-N(CH3)2均为C5杂烃基。亚烃基可 以未取代或者在其杂原子或杂原子组分处被本文描述的部分之一取代(即任选地取代)，包 括本文描述的任选取代基，和/或在其烃基组分被1至4或更多、通常1至3或1或2个如本文所 述独立选择的部分取代，包括本文所述的任选取代基，除非另外特别说明，不包括烃基、 (杂)芳基烃基、烯基、炔基和另一杂烃基。 本文所定义的氨基烃基是示例性杂烃基，其中氨基烃基的烃基部分的碳原子是用 于连接与其相关的另一有机部分的单价，在编号上的区别在于仅指出其烃基部分的连续碳 原子数。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或与另一术语组合使用的 “杂亚烃基”是指通过从母体杂烃基中去除氢原子或杂原子电子以提供二价部分而衍生自 杂烃基(如上所述)的二价基团，其例如但不限于–CH2-CH2-S-CH2-CH2-和–CH2-S-CH2-CH2- NH-CH2-。对于杂亚烃基，其一个或多个杂原子可以在其任选取代的亚烃基链的内部或可以 占据其任一或两个末端，使得这些杂原子中的一个或两个为单价。当杂亚烃基是接头单元 的组分时，除非上下文指示或暗示，否则允许该组分在接头单元内的两个取向。 除非上下文另行指出或暗示，否则如在本文通过自身或与另一术语组合使用的 “氨基烃基”是指具有碱性氮的部分、基团或取代基，所述碱性氮与如上文定义的亚烃基部 分的一个基团末端键合以提供伯胺，其中碱性氮不被进一步取代，或提供仲胺或叔胺，其中 碱性胺分别被如上所述的一个或两个独立选择的任选取代的C1-C12烃基部分进一步取代。 在一些方面，每个任选取代的烃基部分独立地是C1-C8烃基或C1-C6烃基，并且在其他方面， 一个或两个烃基部分是未取代的。在其他方面，氨基烃基的碱性氮与那些氮取代基一起定 义含有碱性氮作为骨架原子的任选取代的C3-C8杂环基，通常为含氮C3-C6或C5-C6杂环基的 形式，任选地被取代。当氨基烃基用作马库什结构的可变基团时，氨基烃基的亚烃基部分与 马库什式连接，通过亚烃基部分的sp3碳与其结合，在一些方面，其可以是上述亚烃基的不 同基团末端。氨基烃基通常通过其亚烃基部分的连续碳原子的数目表示。因此，C1氨基烃基 例如但不限于：–CH2NH2,–CH2NHCH3和–CH2N(CH3)2，C2氨基烃基例如但不限于–CH2CH2NH2,– CH2CH2NHCH3和–CH2CH2N(CH3)2。 “任选取代的烃基”，“任选取代的烯基”，“任选取代的炔基”，“任选取代的烃基芳 基”，“任选取代的芳基烃基”，“任选取代的杂环”，“任选取代的芳基”，“任选取代的杂芳 基”，“任选取代的烃基杂芳基”，“任选取代的杂芳基烃基”和类似术语指烃基，烯基，炔基， 烃基芳基，芳基烃基，芳基烃基杂环，芳基，杂芳基，烃基杂芳基，杂烃基芳基，或本文定义或 公开的其它取代基、部分或基团，其中所述取代基、部分或基团的氢原子已被不同的部分或 基团或其中包含那些取代基之一的脂环族碳链任选替代，部分或基团被具有不同部分或基 团的链的替代碳原子间杂。在一些方面，烯烃官能团替代烃基取代基的两个连续的sp3碳原 子，条件是烃基部分的基团碳不被替代，使得任选取代的烃基变成不饱和的烃基取代基。 在任何一个前述取代基、部分或基团中替代一个或多个氢的任选取代基独立地选 32 CN 111601803 A 说　明　书 16/185 页 自：C6-C24芳基、C5-C24杂芳基、羟基、C1-C20烃基氧基、C6-C24芳氧基、氰基、卤素、硝基、C1-C20 氟代烃基氧基、以及氨基(其涵盖-NH2和单-、二-和三-取代的氨基基团)，以及它们的受保 护的衍生物，或选自：-X、-OR’、-SR’、-NH 、-N(R’)(Rop2 )、-N(Rop)3、＝NR’、-CX3、-CN、-NO2、- NR’C(＝O)H、-NR’C(＝O)Rop、-NR’C(＝O)Rop、-C(＝O)R’、-C(＝O)NH2、-C(＝O)N(R’)Rop、-S (＝O) op op2R 、-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2N(R’)R 、-S(＝O)2NH2、-S(＝O)2N(R’)Rop、、-S(＝O)2OR’、- S(＝O)Rop、-OP(＝O)(OR’)(ORop)、-OP(OH)3、-P(＝O)(OR’)(ORop)、-PO3H2、-C(＝O)R’、-C(＝ S)Rop、-CO R’、-C(＝S)ORop2 、-C(＝O)SR’、-C(＝S)SR’、-C(＝S)NH2、-C(＝S)N(R’)(Rop)2、-C (＝NR’)NH2、-C(＝NR’)N(R’)Rop、以及它们的盐，其中每个X独立地选自卤素：-F、-Cl、-Br 和–I；每个Rop独立地选自：C1-C20烃基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、C6-C24芳基、C3-C24杂环基、C5- C 杂芳基、保护基，前药部分或两个Rop24 与它们所连接的杂原子一起限定C3-C24杂环基；R’为 氢或Rop，其中Rop选自：C1-C20烃基、C6-C24芳基、C3-C24杂环基、C5-C24杂芳基、以及保护基。 通常，存在的任选的取代基选自：-X、-OH、-ORop、-SH、-SRop、-NH2、-NH(Rop)、-NR’ (Rop) 、-N(Rop) 、＝NH、＝NRop2 3 、-CX3、-CN、-NO2、-NR’C(＝O)H、NR’C(＝O)Rop、–CO2H、-C(＝O) H、-C(＝O)Rop、-C(＝O)NH 、-C(＝O)NR’Rop、-S(＝O) Rop、-S(＝O) NH 、-S(＝O) N(R’)Rop2 2 2 2 2 、-S (＝O)2NH2、-S(＝O)2N(R’)(Rop)、-S(＝O)2OR’、-S(＝O)Rop、-C(＝S)Rop、-C(＝S)NH2、-C(＝S) N(R’)Rop、-C(＝NR’)N(Rop)2、以及它们的盐，其中每个X独立地选自-F和-Cl，其中Rop通常选 自C1-C6烃基、C6-C10芳基、C3-C10杂环基、C5-C10杂芳基以及保护基；R’通常独立地选自氢、C1- C6烃基、C6-C10芳基、C3-C10杂环基、C5-C10杂芳基以及保护基，独立地选自Rop。 更典型地，存在的任选的取代基选自：-X、-Rop、-OH、-ORop、-NH2、-NH(Rop)、-N (Rop) 、-N(Rop) 、-CX 、-NO 、-NHC(＝O)H、-NHC(＝O)Rop2 3 3 2 、-C(＝O)NH 、-C(＝O)NHRop2 、-C(＝O) N(Rop) 、-CO H、-CO Rop、-C(＝O)H、-C(＝O)Rop2 2 2 、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NH(Rop)、-C(＝O)N (Rop)2、-C(＝NR’)NH2、-C(＝NR’)NH(Rop)、-C(＝NR’)N(Rop)2、保护基以及它们的盐，其中每 个X为-F；Rop独立地选自C1-C6烃基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基和保护基；R’选自氢、C1-C6烃基 和保护基，独立地选自Rop。 在一些方面，存在的任选烃基取代基选自：-NH 、-NH(Rop)、-N(Rop op2 )2、-N(R )3、-C (＝NR’)NH 、-C(＝NR’)NH(Rop)、以及-C(＝NR’)N(Rop2 )2，其中R’和Rop如针对以上R’或Rop基 团中的任一个所定义的。在那些方面的一些中，R’和/或Rop取代基与它们所连接的氮原子一 起提供碱性单元(BU)的基本官能团，如在Rop独立地选自由氢和C1-C6烃基组成的组时。如上 所述的亚烃基，碳环基，碳环，芳基，亚芳基，杂烃基，杂亚烃基，杂环基，杂环，杂芳基和杂亚 芳基类似地被取代或未被取代，除非在这些部分的定义中描述(如果有的话)。 在其他方面，存在的任选的烃基取代基是任选取代的C6-C10芳基或C5-C10杂芳基， 以定义任选取代的(杂)芳基烃基-，如本文进一步定义，其中烃基组分是饱和的C1-C8烃基或 不饱和的C3-C8烃基。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“任选取代的杂原子”是指官能团 或其他有机部分内的杂原子或杂原子部分，其中杂原子或杂原子部分未被进一步取代或被 任何一个具有单价碳原子的上述部分取代，所述部分包括但不限于烃基、环烃基、烯基、芳 基、杂环基、杂芳基、杂烃基以及(杂)芳基烃基-，或通过被一个或两个＝O取代基取代而被 氧化。在一些方面，“任选取代的杂原子”是指芳族或非芳族的-NH-部分，其未被取代或者其 中的氢原子被任一个上述的取代基替代。在其他方面，“任选取代的杂原子”是指杂芳基中 33 CN 111601803 A 说　明　书 17/185 页 的芳族骨架氮原子，其中所述杂原子的电子被任一个上述的取代基替代。为了涵盖这两个 方面，有时将氮杂原子或杂原子部分称为任选取代的N/NH。 因此，在一些方面，存在的氮原子的任选取代基选自：任选取代的C1-C20烷基、C2- C20烯基、C2-C20炔基、C6-C24芳基、C5-C24杂芳基、(C6-C24芳基)-C1-C20烷基-、以及(C5-C24杂芳 基)-C1-C20烷基-，如同那些术语在本文定义。在其他方面，存在的氮原子的任选取代基独立 地选自：任选取代的C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C6-C24芳基、C5-C24杂芳基、(C6-C24芳 基)-C1-C12烷基-、以及(C5-C24杂芳基)-C1-C12烷基-；选自由以下各项组成的组：C1-C8烷基、 C2-C8烯基、C2-C8炔基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、(C6-C10芳基)-C1-C8烷基-、以及(C5-C10杂芳 基)-C1-C8烷基；或选自由以下各项组成的组：C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基、 C5-C10杂芳基、(C6-C10芳基)-C1-C6烷基-、以及(C5-C10杂芳基)-C1-C6烷基-。 在一些方面，存在的任选的取代基替代烃基或亚烃基部分、基团或取代基的非环 状碳链中的碳原子以提供C3-C12杂烃基或C3-C12杂亚烃基，并且出于该目的，通常选自由以 下各项组成的组：-O-、-C(＝O)-、-C(＝O)O-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)2-、-NH-、-NHC(＝ O)-、-C(＝O)NH-、S(＝O)2NH-、-NHS(＝O)2-、-OC(＝O)NH-、以及-NHC(＝O)O，其中-NH-是任 选取代的杂原子部分，其中取代是通过来自先前针对杂原子部分所描述的组的独立选择的 取代基替代其氢原子而产生。 在其他方面，如本发明的实施方案所述，当自分解型间隔单元内的PAB或PAB型自 分解型间隔单元的可变基团J/J’是任选被取代的-NH-时，氮原子的取代是通过用合适地保 留其氮孤对电子的取代基取代其氢原子，使得当W为肽可裂解单元的接头单元中的W-J键断 裂时，允许包含该任选取代的氮原子的自分解型间隔单元的PAB或PAB型部分实现自分解。 在其他方面，如本发明的实施方案所述，当在葡糖醛酸苷单元的W’和Y之间的糖苷键的可变 基团E’是任选取代的-NH-部分时，在参与糖苷键时，氮原子在被取代时具有其连接的氢被 适当保留其氮孤对电子的定位的取代基取代，从而允许该葡糖醛酸苷单元的自分解型间隔 单元的PAB或PAB型部分在糖苷键断裂时自分解，并提供糖苷酶裂解的识别位点，使得裂解 有效地与该键的自发水解竞争。在葡糖醛酸酐单元中，J’是与接头单元(LU)其余部分的连 接位点，其是-O-，-S-或任选取代的NH，其中从J’至LU其余部分的键在正常生理条件下或在 靶向的异常细胞附近范围内不会发生酶或非酶裂解。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“O-连接的部分”是指通过O-连接 的部分的氧原子直接连接至与其相关的马库什结构或另一有机部分的部分、基团或取代 基。单价O-连接的部分通过单价氧原子连接，通常是-OH，-OC(＝O)Rb(酰氧基)，其中Rb是-H， 任选取代的饱和C1-C20烃基，任选取代的不饱和C1-C20烃基，任选取代的环烃基，其中环烃基 部分是饱和或部分不饱和的，任选取代的C3-C20烯基，任选取代的C2-C20炔基，任选取代的 C6-C24芳基，任选取代的C5-C24杂芳基或任选取代的C3-C b24杂环基，或R 为任选取代的C1-C12 烃基、任选取代的C3-C12环烃基、任选取代的C3-C12烯基或任选取代的C2-C12炔基，并且其中， 单价O-连接的部分进一步包括醚基团，例如C1-C12烃基氧基(即，C1-C12脂族醚)部分，任选地 被取代，其中，烃基部分是饱和或不饱和的。 在其他方面，单价O-连接的部分是选自以下的单价部分：任选取代的苯氧基、任选 取代的C1-C8烃基氧基(即C1-C8脂族醚)和-OC(＝O)Rb，其中Rb是任选取代的C1-C8烃基，其通 常是饱和的或是不饱和的C3-C8烃基，任选地被取代。 34 CN 111601803 A 说　明　书 18/185 页 在其他方面，O-连接的取代基是单价部分，其选自由以下各项组成的组：-OH，饱和 的C1-C6烃基醚，不饱和的C3-C6烃基醚，任选地被取代，-OC(＝O)Rb，其中Rb通常是C1-C6饱和 烃基，C3-C6不饱和烃基，C3-C6环烃基，C2-C6烯基，或苯基，任选地被取代，或者选自不包括– OH和/或-OC(＝O)Rb的组，其中Rb是苯基，或者Rb是选自以下的单价部分：C1-C6饱和烃基，C3- C6不饱和烃基和C2-C6烯基，任选地被取代，或单价O-连接的不部分是选自以下的未取代的 O-连接的取代基：饱和C -C 烃基醚，不饱和C -C 烃基醚，-OC(＝O)Rb，其中Rb1 6 3 6 是未取代的饱 和C1-C6烃基或未取代的不饱和C3-C6烃基。 其他示例性O-连接的取代基通过如本文所公开的用于氨基甲酸酯基、醚和碳酸酯 基的定义提供，其中氨基甲酸酯、醚和碳酸酯官能团的单价氧原子键合至与其相关的马库 什结构或其他有机部分。 在其他方面，连接至碳的O-连接的部分是二价的并且包括＝O和-X-(CH2)n-Y-，其 中X和Y独立地为S和O并且下标n为2或3，以形成具有与X和Y均连接的碳的螺环系统。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“卤素”是指氟、氯、溴、或碘，并且 通常为-F或-Cl。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“保护基”是指防止或基本上降低 与其连接的原子或官能团参与不想要的反应的能力的部分。Greene(1999)“, 有机合成中的 保护基团，第3版”，Wiley  Interscience给出了典型的原子或官能团的保护基团。杂原子诸 如氧、硫和氮的保护基有时用于最小化或避免它们与亲电子化合物的不想要的反应。其他 时候，保护基用于降低或消除未受保护的杂原子的亲核性和/或碱度。保护的氧的非限制性 实施例由-ORPR给出，其中-ORPR是羟基的保护基团，其中羟基通常是作为酯被保护(例如乙 酸酯，苯酸酯或苯甲酸酯)。羟基的其它保护基团避免干扰有机金属试剂或其它高碱性试剂 的亲核性，为此目的，羟基通常以醚的形式被保护，包括但不限于烃基醚或杂环基醚(例如， 甲醚或四氢吡喃基醚)、烷氧基甲基醚(例如，甲氧基甲基或乙氧基甲基醚)、任选取代的芳 基醚、以及甲硅烷基醚(例如，三甲基甲硅烷基(TMS)、三乙基甲硅烷基(TES)、叔丁基二苯基 甲硅烷基(TBDPS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS/TBDMS)、三异丙基甲硅烷基(TIPS)以及[2- (三甲基甲硅烷基)乙氧基]-甲基甲硅烷基(SEM))。氮保护基包括如-NHRPR或-N(RPR)2中的用 于伯胺或仲胺的那些，其中RPR中的至少一个是氮原子保护基或两个RPR一起限定氮原子保 护基。 当保护基能够防止或基本上避免不想要的副反应和/或保护基在实现分子中其他 地方的一个或多个期望的化学转化所需的反应条件下和在新形成分子的纯化(当期望时) 过程中的过早损失，并且可以在不对所述新形成的分子的结构或立体化学完整性产生不利 影响的条件下去除时，该保护基是适合保护的。在一些方面，合适的保护基是先前针对保护 性官能团所描述的那些。在其他方面，合适的保护基是用于肽偶联反应的保护基。例如，适 用于非环状或环状碱性单元的碱性氮原子的保护基是酸不稳定的氨基甲酸酯保护基，例如 叔丁氧羰基(BOC)。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“酯”是指具有-C(＝O)-O-结构以 定义酯官能团的取代基、部分或基团，其中所述结构的羰基碳原子不与另一个杂原子直接 连接，而是直接连接至与其相关的有机部分的氢或另一个碳原子，并且其中单价氧原子在 不同的碳原子上连接至相同的有机部分以提供内酯，或连接至马库什结构，或连接至一些 35 CN 111601803 A 说　明　书 19/185 页 其他有机部分。通常，除酯官能团之外的酯包括含有1至50个碳原子、典型地1至20个碳原子 或更典型地1至8、1至6或1至4个碳原子以及0至10个独立选择的杂原子(例如，O、S、N、P、Si， 但通常是O、S和N)、典型地0至2个杂原子的有机部分或由其组成，其中有机部分通过-C(＝ O)-O-结构(即，通过酯官能团)键合，以提供具有有机部分-C(＝O)-O-的式或–C(＝O)-O-有 机部分的结构。 当酯是与其相关的马库什结构或其他有机部分的取代基或可变基团时，所述取代 基通过酯官能团的单价氧原子与该结构或其他有机部分键合，由此使得它是单价的O-连接 的取代基，有时称为酰氧基。在此类情况下，与酯官能团的羰基碳连接的有机部分通常是 C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、C6-C24芳基、C5-C24杂芳基、C3-C24杂环基，或是这些中的 任何一个的取代衍生物，例如，具有1、2、3或4个取代基，更通常是C1-C12烷基、C2-C12烯基、 C2-C12炔基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C3-C10杂环基或这些中的任一个的取代衍生物，例如， 具有1、2、或3个取代基，或者是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、或苯基或这些中的任一个 的取代衍生物，例如，具有1或2个取代基，其中每个独立选择的取代基如本文针对任选的烃 基取代基所定义，或是未取代的C1-C6烷基或未取代的C2-C6烯基。 示例性酯例如但不限于是乙酸酯、丙酸酯、异丙酸酯、异丁酸酯、丁酸酯、戊酸酯、 异戊酸酯、己酸酯(caproate)、异己酸酯、己酸酯(hexanoate)、庚酸酯、辛酸酯、苯基乙酸酯 以及苯甲酸酯，或具有-OC(＝O)Rb的结构，其中Rb如针对酰氧基O-连接的取代基所定义的并 且通常选自：甲基、乙基、丙基、异丙基、2-甲基-丙-1-基、2,2-二甲基-丙-1-基、丙-2-烯-1- 基和乙烯基。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“醚”是指包括不与一个或多个羰 基部分(通常1或2个)键合的1、2、3、4或更多个-O-(即，氧基)部分的有机部分、基团或取代 基，其中不存在彼此直接相邻(即，直接连接)的两个-O-部分。通常，醚含有式-O-的有机部 分，其中有机部分如针对与酯官能团键合的有机部分(例如，有机部分-O-C(＝O)-O-)所述 或如本文针对任选取代的烃基基团所述。当醚被列举为与其相关的马库什结构或其他有机 部分的取代基或可变基团时，醚官能团的氧连接至与其相关的马库什式，并且有时被称为 “烃基氧基”基团，其为示例性的O-连接的取代基。在一些方面，醚O-连接的取代基为C1-C20 烃基氧基或C1-C12烃基氧基，任选地被1、2、3或4个(通常1、2或3个)取代基取代，并且在其他 方面，是C1-C8烃基氧基或C1-C6烃基氧基，任选地被1或2个取代基取代，其中每个独立选择 的取代基如本文对任选的烃基取代基的定义，并且在其他方面，醚O-连接的取代基是未取 代的饱和或不饱和C1-C4烃基样机，例如但不限于：甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧 基和烯丙氧基(即-OCH2CH＝CH2)。 除非上下文另行指出或暗示，否则如本文所用的“酰胺”是指具有结构为R-C(＝O) N(Rc)-或-C(＝O)N(Rc)2的任选取代的官能团的部分，没有其他杂原子直接连接于羰基碳并 且其中每个Rc独立地为氢、保护基或独立选择的有机部分，以及R为氢或有机部分，其中有 机部分独立地选自Rc，如本文针对键合于酯官能团的有机部分所述(例如，R-C(＝O)N(Rc)- 有机部分或有机部分-C(＝O)N(Rc)2)或如本文针对任选取代的烃基所述。当酰胺被陈述为 与其相关的马库什结构或其他有机部分的取代基或可变基团时，酰胺官能团的酰胺氮原子 或羰基碳原子键合至所述结构或其他有机部分。酰胺通常通过使酰卤(诸如酰氯)与含有伯 胺或仲胺的分子缩合来制备。或者，使用肽合成领域熟知的酰胺偶联反应，其在一些方面通 36 CN 111601803 A 说　明　书 20/185 页 过含羧酸分子的活化酯进行。通过肽偶联方法进行的酰胺键的示例性制备参见Benoiton (2006)肽合成化学(“Chemistry  of  peptide  synthesis”) ,CRC  Press；Bodansky(1988)肽 合成“实践手册(“Peptide  synthesis:A  practical  textbook”)Springer-Verlag； Frinkin,M.等人，肽合成(“Peptide  Synthesis”)Ann.Rev.Biochem.(1974)43:419-443。用 于制备活化羧酸的反应试剂参见Han等人，肽偶联剂在有机合成中的最新进展(“Recent  development  of  peptide  coupling  agents  in  organic  synthesis”)Tet.(2004)60: 2447-2476。 因此，在一些方面，酰胺通过在偶联剂的存在使羧酸与胺反应进行制备。如本文所 用，“在偶联剂的存在下”包括使羧酸与偶联剂接触，从而将酸转化成其活化的衍生物，例如 活化的酯或混合酸酐，分离或不分离所述酸得到的活化的衍生物，然后或同时使所得活化 的衍生物与胺接触。在某些情况下，活化衍生物是原位制备的。在其他情况下，可以分离活 化的衍生物以除去任何不希望的杂质。 如在此所用的“碳酸酯”是指具有结构-O-C(＝O)-O-的官能团的取代基、部分或基 团。通常，如本文所用的碳酸酯基团包括键合至-O-C(＝O)-O-结构的有机部分，其中有机部 分如本文所述针对键合至酯官能团的有机部分(例如有机部分-O-C(＝O)-O-)所述。当碳酸 酯被描述为与其相关的马库什结构或其他有机部分的取代基或可变基团时，碳酸酯官能团 的单价氧原子中的一个连接于所述结构或有机部分，而另一个键合至另一有机部分的碳原 子，所述另一有机部分如先前针对键合至酯官能团的有机部分所述或如本文针对任选取代 的烃基基团所述。在这种情况下，碳酸酯是示例性的O-连接的取代基。 如本文所用，“氨基甲酸酯”是指含有任选取代的氨基酸甲酸酯基官能团结构的取 代基、部分或基团，所述结构通过-O-C(＝O)N(Rc)-或-O-C(＝O)N(Rc)2、或-O-C(＝O)NH(任 选取代的烃基)或-O-C(＝O)N(任选取代的烃基)2表示，其中一个或多个任选取代的烃基是 示例性氨基甲酸酯官能团取代基，其中Rc和任选取代的烃基独立选择，其中独立选择的Rc为 氢、保护基或有机部分，其中有机部分如本文针对键合至酯官能团的有机部分所述或如本 文针对任选取代的烃基基团所述。通常，氨基甲酸酯基团另外包括独立地选自Rc的有机部 分，其中有机部分如本文针对通过-O-C(＝O)-N(Rc)-结构键合的键合至酯官能团的有机部 分(例如，有机部分-O-C(＝O)-O-)所述，其中所得结构具有有机部分-O-C(＝O)-N(Rc)-或- O-C(＝O)-N(Rc)-有机部分的式。当氨基甲酸酯基被列举为与其相关的马库什结构或其他 有机部分的取代基或可变基团时，氨基甲酸酯官能团的单价氧(O-连接的)或氮(N-连接的) 连接至马库什式或其他有机部分。氨基甲酸酯基取代基的连接是明确陈述的(N-或O-连接 的)或隐含在涉及该取代基的上下文中。本文所述的O-连接的氨基甲酸酯基是示例性的单 价O-连接的取代基。 如本文所用，“微管溶素药物”或“微管溶素化合物”是指具有细胞毒性、抑制细胞 生长或抗炎活性的基于肽的微管蛋白破坏试剂，包含一种天然或非天然氨基酸组分和三种 其他非天然氨基酸组分，其中，所述非天然组分中的一种的特征为中心5元或6元杂亚芳基 部分，而另一种非天然组分提供了叔胺，可用于与靶向剂连接以形成季铵化胺形式的配体 药物偶联物(LDC)，从而使微管溶素药物成为季铵化的药物单元。 微管溶素化合物通常具有结构DG或DH： 37 CN 111601803 A 说　明　书 21/185 页 其中，虚直线表示任选的双键，虚曲线表示任选的环化，圆圈Ar表示在微管溶素的 碳骨架中被1,3-取代并在其他位置任选取代的亚芳基或杂亚芳基，其中亚芳基或杂亚芳基 和其他可变基团如本发明的实施方案中所定义。 天然存在的微管溶素化合物具有DG-6的结构。 可方便地分为四个氨基酸亚基(如垂直虚线所示)，分别称为N-甲基-哌啶酸 (pipecolinic  acid)(Mep)，异亮氨酸(Ile)，微管缬氨酸(Tuv)以及微管苯丙氨酸(Tup，R7A 为氢)或微管酪氨酸(Tut，R7A为–OH)。目前已知约有十二种天然存在的微管溶素，它们被称 为微管溶素A-I，微管溶素U，微管溶素V和微管溶素Z，其结构由基于微管溶素的季铵化药物 单元的实施方案中定义的结构DG-6的可变基团表示。 前微管溶素通常具有结构DG,DG-6,或DH，其中R3是–CH 以及R2A3 是氢，去甲基微管溶 素具有结构DG,D 3G-6,或或DH，其中R 为氢，并包括通过基于微管溶素的季铵化药物单元的实 施方案给定的其他微管溶素结构，其中R3是氢，并且其中其他可变基团如针对微管溶素的 描述。前微管溶素和去甲基微管溶素任选地包括在微管溶素的定义中。 在基于微管溶素的季铵化药物单元的实施方案中本文所述的结构DG,DG-6,DH和其 他微管溶素结构中，当此类结构对应于配体或结合到配体药物偶联物、药物接头化合物、或 其前体作为季铵化微管溶素药物单元中时，指示的 氮原子是季铵化的位点。通常，D 的 季铵化部分是由于微管溶素化合物的含叔胺的N末端组分的氮原子与自分解型间隔单元中 PAB或PAB型部分的苄基碳原子共价连接而成。 如本文所用，“药学上可接受的盐“是指药学上可接受的化合物的有机或无机盐。 该化合物通常包含至少一个氨基基团，因此可以与该氨基基团形成酸加成盐。示例性的盐 包括但不限于：硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢 38 CN 111601803 A 说　明　书 22/185 页 盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸酯、乳酸酯、水杨酸酯、柠檬酸、酒石酸酯、油酸酯、单宁酸 酯、泛酸酯、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸 盐、葡糖醛酸盐、蔗糖、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯 磺酸盐和扑酸盐(即1,1’-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐)。 药学上可接受的盐可涉及包括另一种分子，例如乙酸根离子，琥珀酸根离子或其 他抗衡离子。抗衡离子通常是稳定引入母体化合物上的电荷的有机或无机部分。药学上可 接受的盐在其结构中具有一个或多个带电原子。在多个带电原子是药学上可接受的盐的一 部分的情况下，通常存在多个抗衡离子，或存在多个带电抗衡离子。因此，药学上可接受的 盐可具有一个或多个带电原子和一个或多个抗衡离子。通常，季铵化微管溶素药物单元为 药学上可接受的盐形式。在那些方面，季铵化微管溶素药物单元的N-末端组分的季铵化氮 与药学上可接受的抗衡阴离子缔合，在其他方面，C-末端组分的羧酸也以离子化形式存在 并与药学上可接受的抗衡阳离子缔合。 通常，药学上可接受的盐选自P.H.Stahl和C.G.Wermuth编撰《, 药用盐的手册：性 质、选择和使用》(Handbook  of＝Pharmaceutical  Salts:Properties ,Selection  and  Use) ,Weinheim/Zürich:Wiley-VCH/VHCA,2002中描述的那些。盐的选择取决于药物产品必 须具有的性质，包括在各种pH值下的足够的水溶性，取决于预期的给药途径，具有适合于处 理的流动特性和低吸湿性(即吸水性)的结晶度，以及通过确定加速条件下的化学和固态稳 定性(即，用于确定在40℃和75％相对湿度下储存时的降解或固态变化)所要求的保质期。 如本文所用的“抗体”以最广泛的含义使用，并且具体包括完整的单克隆抗体、多 克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)、以及表现出期望的生物活 性的抗原结合片段，条件是抗体片段具有所需数目的位点，以连接至所需数目的季铵化药 物-接头部分。抗体的天然形式是四聚体，通常由两对相同的免疫球蛋白链组成，每一对具 有一条轻链和一条重链。在各对中，轻链和重链可变区(VL和VH)一起在与抗原的结合中起 主要作用。轻链和重链可变结构域包含掺杂有三个高变区(也称作“互补决定区”或”“CDR”) 的框架区。在一些方面，恒定区可由免疫系统识别并且与其相互作用(例如参见Janeway等 人,2001“, Immunol.Biology ,第5版”,Garland  Publishing ,纽约)。抗体包括任何同种型 (例如，IgG,IgE,IgM,IgD和IgA)、或其亚型(例如，IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgA1和IgA2)。抗 体可源自任何合适的物种。在一些实施方案中，抗体是人或鼠源性的。这种抗体包括人抗 体，人源化抗体或嵌合抗体。抗体或其抗体片段是对应于本发明的配体药物偶联物或作为 抗体配体单元掺入本发明的配体药物偶联物的示例性靶向剂。 在一些方面，抗体选择性地和特异性地结合过度增殖的细胞或过度刺激的哺乳动 物细胞上的表位，所述过度增殖的细胞或过度刺激的哺乳动物细胞是示例性异常细胞，其 中，与正常细胞相比，所述表位优先由异常细胞展示或更具特征性，或者，与未定位到异常 细胞部位的正常细胞相比，优先由异常细胞附近的正常细胞展示或更具特征性。在那些方 面，哺乳动物细胞通常是人细胞。掺入配体单元中的抗体的其他方面在配体药物偶联物的 实施方案中进行了描述。 本文所用术语“单克隆抗体”指获自基本均一抗体群体的抗体，即除了少数中存在 的可能的天然发生的突变和/或糖基化模式的差异之外，群体包含的单独抗体是相同的。单 克隆抗体具有针对某一抗原性位点的高度特异性。修饰语“单克隆”指示该抗体获自基本均 39 CN 111601803 A 说　明　书 23/185 页 质的抗体群这一特点，而不应被解释为需要通过任何特定的方法来产生抗体。 如本文所用，术语“配体药物偶联物”或“LDC”是指包含掺入或对应于靶向剂的配 体单元(L)和掺入或对应于结构的季铵化微管溶素化合物的药物单元(D )的构建体，其中L 和D 通过接头单元(LU)彼此结合，其中，配体药物通过其靶向配体单元选择性地结合至被 靶向部分。在一些情况下，术语配体药物偶联物是多个(即，组合物)单独的偶联物化合物， 其主要区别在于结合至每个配体单元的D 单元的数目和/或配体单元上结合D 单元的位置。 在其他情况下，术语配体药物偶联物适用于组合物中单独的成员或化合物。如下定义的抗 体药物偶联物是配体药物偶联物的一种类型，其中其配体单元是抗体或其抗原结合片段。 配体药物偶联物的通式为L-(LR-Bb-(A-W-Y-D )n)p，其中LR为LSS/LS或其他一级接头，其具有 含Lb的部分，以及其他变量基团，在其他地方定义。 本文所用术语“抗体药物偶联物”或“ADC”是指抗体残基或其抗原结合片段，在某 些方面称为抗体配体单元，其通过中间接头单元共价连接于季铵化微管溶素药物单元。通 常，该术语是指具有相同D 、接头单元和配体单元的偶联化合物的集合(即群体或多个)，其 序列和糖基化模式的允许的变化如先前针对单克隆抗体或基本上相同的抗体配体单元所 描述，如在多克隆抗体中通常发现的那样，在某些方面其具有连接于每个抗体残基的季铵 化微管溶素药物接头部分的可变负载和/或分布(例如，当多个这样的化合物中的任意两个 抗体药物偶联物的季铵化微管溶素药物单元(D )的数量相同，但它们与靶向部分的连接位 点的位置不同)。在那些情况下，抗体药物偶联物通过偶联物化合物的平均载药量来描述。 抗体药物偶联物组合物中每个抗体配体单元或其抗原结合片段的平均季铵化药物单元数 量(即，抗体药物偶联物化合物的群体中的平均数量)，在某些方面主要区别在于该群体中 存在的每一个抗体药物偶联物化合物中抗体配体单元上偶联的季铵化微管溶素药物单元 的数量和/或它们的位置。在这种情况下，p为约2至约24或约2至约20的数，并且通常为约2， 约4，约8，约10或约12。在其他情况下，p表示在抗体药物偶联物化合物群体中与抗体药物偶 联物的单个抗体配体单元共价结合的季铵化微管溶素药物单元的数量，其中，在一些方面， 该群体的化合物的主要区别在于偶联的季铵化微管溶素药物单元的数量和/或位置。在该 情况下，p被指定为p’，并且是1至24或1至20，典型地1至12或1至10，并且更典型地1至8的整 数。在其他方面，抗体靶向剂的基本上所有的可用反应性官能团形成共价键以偶联季铵化 药物单元，从而提供连接最大数量的季铵化药物接头部分的抗体配体单元，因此抗体药物 偶联物组合物的p值与该组合物中每一个抗体药物偶联物化合物的p’值相同或几乎相同， 因此，使用电泳或合适的色谱方法，例如HIC、反相HPCL或尺寸排阻色谱检测，则仅存在少量 的p’值较低的抗体药物偶联物，如果有的话。 在一些方面，由偶联反应制备的制剂中每个抗体配体单元的季铵化微管溶素药物 单元的平均数目通过如上所述的常规色谱方法结合质谱检测进行表征。在其他方面，根据 p’值确定偶联物化合物的定量分布。在那些情况下，可以通过诸如前述色谱法的方法，分 离、纯化和表征均相的抗体药物偶联物化合物，其中p’是来自那些具有其他D 负载的抗体 药物偶联物组合物的某一值。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用术语“药物接头化合物”是指具有一级 接头，存在的任选二级接头和季铵化微管溶素药物单元(D )的化合物，其中一级接头包括 配体共价结合前体(Lb’)部分组成，其能够与靶向剂反应以在Lb和掺入或对应于靶向剂的配 40 CN 111601803 A 说　明　书 24/185 页 体单元之间形成共价键。药物接头化合物的通式为L -(B -(A-W-Y-D R b )n)p，其可变基团在其 他地方定义，其中LR在某些方面为LSS，有时显示为LR’和LSS’，以分别明确指出它们是配体药 物偶联物中LR和LSS的前体。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用术语“选择性和结合”和“选择性结合” 是指抗体、其抗原结合片段或抗体配体单元作为抗体药物偶联物中的靶向部分能够以免疫 学选择性和特异性方式与其关联靶向抗原而不与多种其他抗原结合。通常，抗体或其抗原 结合片段以至少约1×10-7M，优选约1×10-8M至1×10-9M，1×10-10M，或1x  10-11M的亲和力结 合其靶抗原，以比其与非特异性抗原(例如BSA，酪蛋白)(不是紧密相关的抗原)结合的亲和 力至少高两倍的亲和力与预定抗原结合，其中当抗体或其抗原结合片段对应于或掺入配体 药物偶联物作为抗体配体单元时，所述亲和力基本保留。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“靶向剂”是指能够选择性结合至被 靶向部分并在将其作为配体单元掺入配体药物偶联物中时基本上保留该能力的试剂，或者 当配体药物偶联物的配体单元在结构上对应于靶向剂或掺入靶向剂的结构时，则配体单元 是偶联物的靶向部分。在一些方面，所述靶向剂是抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗 原结合片段选择性地和特异性地结合异常细胞特征性或以比正常细胞更高拷贝数存在于 该细胞上的可及抗原，或者是特定于周围环境的可及抗原，在这些环境中发现这些细胞的 程度达到了免疫选择性细胞毒性，应转化为可接受的治疗指数。在其他方面，靶向剂是受体 配体，其选择性结合异常细胞特征性或在异常细胞上大量存在的可及受体，或选择性结合 发现异常细胞的周围环境的细胞特有的可及受体。通常，靶向剂是如本文所定义的抗体或 其抗原结合片段，其选择性地结合至异常哺乳动物细胞的被靶向部分，更通常地是异常人 类细胞的被靶向部分。 如本文所定义的“被靶向部分”是未偶联形式的靶向剂或者配体药物偶联物的靶 向部分将特异性识别的部分，所述靶向部分是对应于或掺入靶向剂的偶联物的配体单元。 在一些方面，被靶向部分存在于异常细胞上、异常细胞内或其附近，并且与正常细胞相比， 通常以更高的丰度或拷贝数存在于那些细胞上，或者与没有异常细胞存在的正常细胞的环 境相比，以更高的丰度和拷贝数存在于异常细胞的环境中，存在的程度足以提供免疫选择 性细胞毒性，应转化为可接受的治疗指标。在一些方面，靶向部分是可被抗体选择性和特异 性结合的可及抗原，其是作为配体药物偶联物组合物或其化合物中的抗体配体单元掺入或 与之对应的示例性靶向剂。在其他方面，靶向部分是细胞外可及的细胞膜受体的配体的部 分，其可在结合在结构上掺入或对应于受体配体的配体药物偶联物或其化合物的配体单元 提供的关联靶向部分时内化，或者能够在结合细胞表面受体之后被动或促进转运配体药物 偶联物。在某些情况下，被靶向部分存在于异常哺乳动物细胞上或这种异常细胞的环境特 征的哺乳动物细胞上。在这些情况的其他情况下，被靶向部分是异常哺乳动物细胞的抗原， 更通常是异常人类细胞的被靶向部分。 “抗原”是能够与未偶联的抗体或其抗原结合片段或与包含对应或掺入该抗体或 抗原结合片段的抗体配体单元的抗体药物偶联物选择性结合的实体。在一些方面，与不定 位于异常细胞的正常细胞相比，抗原是异常细胞优先展示的细胞外可及的细胞表面蛋白、 糖蛋白或碳水化合物，并且更通常是细胞表面糖蛋白。在某些情况下，具有抗原的异常细胞 是哺乳动物中的过度增殖细胞。在其他情况下，具有抗原的异常细胞是哺乳动物中的过度 41 CN 111601803 A 说　明　书 25/185 页 活化的免疫细胞。在其他方面，与不存在这种异常细胞的正常细胞通常经历的环境相比，特 异性结合的抗原存在于哺乳动物中过度增殖的细胞或过度活化的免疫细胞的特定环境中。 在其他方面，细胞表面抗原能够在选择性结合抗体药物偶联物(ADC)化合物后内化，并且与 存在过度增殖或过度刺激的免疫细胞的环境中特定的附近细胞缔合。抗原是抗体药物偶联 物的示例性被靶向部分，所述抗体药物偶联物中的靶向抗体配体单元对应于或掺入优先识 别被靶向抗原并因此能够选择性结合该抗原的抗体或其抗原结合片段。 本发明的ADC的细胞表面可及的与癌细胞相关的抗原包括但不限于：CD19，CD70， CD30和CD33。 除非上下文另有说明或暗示，否则“靶细胞”，“被靶向的细胞”或本文所用的类似 术语是指，配体药物偶联物与之相互作用的目标细胞，以抑制异常细胞的增殖或其他有害 活性。在一些方面，靶细胞是过度增殖细胞或过度活化的免疫细胞，其是示例性异常细胞。 通常，那些异常细胞是哺乳动物细胞，更通常是人细胞。在其他方面，靶细胞在异常细胞的 附近，使得配体药物偶联物对附近细胞的作用对异常细胞具有预期的作用。例如，附近细胞 可以是具有肿瘤的异常脉管系统特征的上皮细胞。通过配体药物偶联物靶向那些血管细胞 将对这些细胞具有细胞毒性或细胞抑制作用，据信这将导致抑制营养物向肿瘤附近异常细 胞的递送。这种抑制将对异常细胞具有间接的细胞毒性或抑制作用，并且在释放其季铵化 药物单元作为微管溶素化合物后，也可能对附近的异常细胞具有直接的细胞毒性或抑制作 用(即旁观者效应)。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文中使用的术语“配体单元”是配体药物偶联 物的组分，并且是该偶联物的靶向部分，其能够选择性地结合至其关联的被靶向部分，并掺 入或对应于优先识别被靶向部分的靶向剂的结构。配体单元(L)包括但不限于来自受体配 体、针对细胞表面抗原的抗体和转运蛋白底物的那些。在一些方面，与正常细胞相比，与配 体药物偶联物组合物的偶联物化合物结合的受体、抗原或转运蛋白以更高的丰度存在于异 常细胞上，从而实现免疫选择性细胞毒性，应转化为可接受的治疗指数。在其他方面，与远 离异常细胞部位的正常细胞相比，被组合物的配体药物偶联物化合物结合的受体、抗原或 转运蛋白大量存在于异常细胞附近的正常细胞上，因此从配体药物偶联物释放D 后，选择 性地将附近的异常细胞暴露于微管溶素化合物。本文和本发明的实施方案进一步描述了配 体单元的各个方面，包括抗体配体单元。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文中使用的术语“接头单元”是指配体药物偶 联物中的有机部分，其介于季铵化微管溶素药物单元(D )和配体单元(L)之间并与之共价 连接，如这些术语在本文中的定义。接头单元(LU)包含一级接头(LR)，它是该单元的必需组 件，以及任选的二级接头(LO)，该二级接头存在于配体药物偶联物的季铵化药物接头部分 的L 和D R 之间或者药物接头化合物的D 和LR之间，在后一种情况下可以表示为LR’以明确指 示其是配体药物偶联物中LR的前体。在一些方面，LR包含琥珀酰亚胺(M2)或琥珀酰胺(M3)部 分，并且当LR为LSS或Ls时，有时还包含配体药物偶联物化合物的接头单元内的碱性单元(非 环状或环状)，以及在其他方面，一级接头包含药物接头化合物中的马来酰亚胺(M1)部分， 并且当LR’是LSS’时，有时还包含受保护或质子化的碱性单元(非环状或环状)。由于本文所 述的药物接头化合物有时包含马来酰亚胺(M1)部分，实现配体单元(L)的靶向剂的连接通 过靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子，通过硫原子与M1的马来酰亚胺环系统的迈克尔加 42 CN 111601803 A 说　明　书 26/185 页 成而与这种药物接头化合物发生连接。当靶向剂是抗体或其抗原结合片段时，在一些方面， 反应性巯基官能团由抗体的半胱氨酸巯基提供，该半胱氨酸巯基由天然抗体氨基酸残基的 二硫键还原和/或其他化学修饰和/或通过基因工程引入。作为该添加的结果，配体药物偶 联物的接头单元包含具有硫取代的琥珀酰亚胺环系统的琥珀酰亚胺(M2)部分。当接头单元 包含碱性单元时，由于存在非环状或环状碱性单元作为自稳定接头(LSS)的一部分而在受控 条件下随后该环系统水解，其中配体药物偶联物内的LR为L 3SS，产生琥珀酸-酰胺(M )部分， 其是自稳定化接头(LS)的组分，如本文进一步描述的。结果，配体药物偶联物中的LSS被水 解，使得作为LSS的LR变成LS。如本文进一步描述的，由于碱性单元(BU)适当地接近琥珀酰亚 胺环系统，因此该水解是可控制的。如果LR中不存在碱性单元，则琥珀酰亚胺部分的水解可 能仍会发生，但可能会不受控制地发生。 除非另有说明或由上下文暗示，否则本文中使用的“一级接头”是指接头单元(LU) 的必需组件，其提供了配体药物偶联物的配体单元的连接位点并且药物接头化合物能够提 供该连接。在一些方面，如本文进一步所述，一级接头是配体药物偶联物或药物接头化合物 中的自稳定(LSS)接头，而在其他方面是配体药物偶联物中的自稳定化(LS)接头。药物接头 化合物或配体药物偶联物中的LSS一级接头的特征是分别在碱性单元附近的马来酰亚胺 (M1)或琥珀酰亚胺(M2)部分，而配体药物偶联物组合物或其化合物中的LS一级接头的特征 在于在碱性单元附近的琥珀酸-酰胺(M3)部分。本发明的LSS或LS一级接头的特征还在于与M1 或M2的马来酰亚胺或琥珀酰亚胺环系统的酰亚胺氮或M3的酰胺氮键合的C1-C12亚烃基部分， 其中，在一些方面，所述亚烃基部分被非环状的碱性单元取代并且可以进一步被任选取代 基取代，或者在其他方面，掺入被任选取代的环状碱性单元。不包含碱性单元的一级接头也 可以包含与M1或M2的马来酰亚胺或琥珀酰亚胺环系统的酰亚胺氮键合的C1-C12亚烃基部分。 具有LSS一级接头的药物接头化合物通常表示为LSS-LO-D ，而具有LSS一级接头的配体药物偶 联物通常表示为L-(LSS-LO-D )p，具有Ls一级接头的化合物通常表示为L-(LS-LO-D )p，其中 可变基团如本文先前所定义。 L 1SS的马来酰亚胺(M )部分(其有时显示为LSS’，以明确表明它是药物接头化合物或 其他含M1一级接头的化合物中配体药物偶联物中LSS的前体)能够与靶向剂的巯基官能团反 应以形成配体药物偶联物的一级接头中的巯基取代的琥珀酰亚胺部分(M2)，其中，巯基取 代基是掺入或对应于靶向剂的结构的配体单元，其中配体单元通过靶向剂的巯基官能团之 一的硫原子键合至M2。该反应的结果是，靶向剂与配体单元的一级接头共价键合。随后LSS一 级接头中M2水解，得到LS一级接头，其中M2转化为琥珀酸-酰胺部分(M3)。该接头部分可以作 为两种区域异构体(M3A和M3B)的混合物存在，这取决于琥珀酰亚胺环系统的两个羰基对水 解的相对反应性。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用术语“配体共价结合部分”是指配体药 物偶联物中与配体单元(L)和接头单元的其余部分互联的接头单元(LU)部分，其源自药物 接头化合物中相应的配体共价结合前体(Lb’)部分与靶向部分的反应。例如，当Lb’包含马来 酰亚胺部分(M1)时，该部分与靶向部分的反应性巯基官能团反应将Lb’转化为配体共价结合 (Lb)部分，从而得到硫取代的琥珀酰亚胺部分，其中硫取代基包含对应或掺入靶向部分的 配体单元的硫原子。在另一实施例中，当Lb’包含活化的羧酸官能团时，该官能团与靶向部 分中赖氨酸的ε氨基的反应将官能团转化为酰胺，其中该酰胺官能团共享在Lb和连接的配 43 CN 111601803 A 说　明　书 27/185 页 体单元之间。在本发明的实施方案中描述了其他含Lb’的部分和由其获得的含Lb的部分。在 某些情况下，靶向部分被双功能分子衍生，以提供与Lb’部分缩合的中间体。缩合的结果是， 如此形成的Lb部分具有可归于双功能分子和Lb’的原子。 “配体共价结合前体”是在制备接头单元中使用的接头单元或其亚结构的部分，其 能够在配体药物偶联物的制备过程中与靶向部分共价结合，因此配体结合部分前体(Lb’) 部分被转化为配体共价结合(Lb)部分。在某些方面，Lb’部分通常具有能够与抗体或其抗原 结合片段天然的亲核试剂或亲电子试剂反应的官能团，或者通过化学转化或基因工程引入 抗体或抗原结合片段中。在一些方面，亲核试剂是包含抗体或抗原结合片段的肽的N-末端 氨基或该肽的赖氨酸残基的ε氨基。在其他方面，亲核试剂是通过基因工程或通过化学还原 抗体或其抗原结合片段的链间二硫键而引入的来自半胱氨酸残基的巯基的硫原子。在一些 方面，亲电子试剂是通过选择性氧化抗体的碳水化合物部分而引入的醛，或者是通过使用 基因工程化的tRNA/tRNA合成酶对引入抗体的非天然氨基酸制得的酮。引入反应性官能团 以在抗体中提供偶联位点的那些方法和其他方法，参见Behrens和Liu的综述，“位点特异性 药物与抗体的偶联方法(Methods  for  site-specific  drug  conjugation  to  antibodies)”，mAB(2014)6(1):46-53。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“二级接头”是指接头单元(LU)中的 有机部分，其中二级接头(Lo)是该单元中存在的可选组分并使季铵化微管溶素药物单元与 一级接头(LR)互连，在一些方面，该接头是药物接头化合物或配体药物偶联物的自稳定 (LSS)接头，或者是LSS水解后得到的配体药物偶联物化合物的自稳定化(LS)接头。通常，LR通 过在两个接头单元组件之间共享的杂原子或官能团连接至LO，其中LO进一步包含具有PAB或 PAB型部分的自分解型间隔单元(Y)和肽可裂解单元。在这些方面，W、Y和D 以线性构型排 列，表示为–W-Y-D 表示，其中可裂解单元W是肽可裂解单元，与D 键合的Y是PAB或PAB型自分 解型间隔单元。在其他方面，LO包含葡糖醛酸苷单元，其中具有PAB或PAB型自分解型部分的 自分解型间隔单元通过糖苷可裂解键连接至碳水化合物部分(Su)，其中，碳水化合物部分 和将Su连接到Y的糖苷杂原子(E’)称为W’。在那些方面，可裂解单元W为式Y(W’)-中的葡糖 醛酸苷单元，并且W’、Y和D 以正交构型排列，如–Y(W’)-D 所示，其中与W’和D 键合的Y是PAB 或PAB型自分解型间隔单元。 在那些方面中的任一个中，当LU连接至一个以上的季铵化药物单元时，二级接头 可进一步包含第一任选的延伸单元(A)和/或支化单元(B)。当存在时，第一任选的延伸单元 将LR(在某些方面为LSS或LS)，任选地通过B的居中(取决于其存在或不存在)，与二级接头的 其余部分互连，或者任选地通过AO(即任选的第二延伸单元)的方式通过–W-Y-与D 互连，当W 是肽可裂解单元时，或者当W是葡糖醛酸苷单元时，通过二级接头的Y(W’)-，其中，Y共价连 接至W，或者W’是具有PAB或PAB-型部分的自分解型间隔单元。当LR是LSS/LS时，AO(如果存在 的话)是LR的组分，当LR不是LSS/LS，则AO是A的亚单元或取代基。 由于作为肽可裂解单元的W或葡糖醛酸苷单元的W’连接至自分解型间隔单元，W/ W’上的酶促作用导致自分解型间隔单元的片段化，并行释放D 作为微管溶素化合物。自分 解型间隔单元的片段化通过从间隔单元的PAB或PAB-型部分实现1,4-或1,6-消除发生，如 本文所述。 当只有一个季铵化微管溶素药物单元连接至LU时，接头单元中键合至D 的二级接 44 CN 111601803 A 说　明　书 28/185 页 头(LO)通常表示为结构s1或结构s2： 其中可变基团如本文所定义。在结构s1中，Y是自分解型间隔单元(Y)，如本文所 述，其中PAB或PAB-型部分键合至D ，W是肽可裂解单元。在结构s2中，Y是自分解型间隔单元 (Y)，如本文所述，其中PAB或PAB-型部分被葡糖醛酸苷单元的W’和D 取代，并且在配体药物 偶联物中进一步被-LR-Aa-取代，LR键合至配体单元(L)，或在药物接头化合物中进一步被 LR’-Aa-取代。 通常，键合至下标a是0或1的结构s1中D 的二级接头如下所示： 以及键合至下标a是0或1的结构s2(下标a是0或1)中D 的二级接头如下所示： 其中J/J’,V,Z1,Z2,Z3,R’,R8和R9如PAB或PAB-型自分解型间隔单元的实施方案中 所定义，E’和Su如式-Y(W’)-葡糖醛酸苷单元的实施方案中所定义；其中，在结构s1的二级 接头中Aa-W-J-与中央(杂)亚芳基上的–C(R8)(R9)-D 取代基相互间处于邻位或对位，或者 在结构s2的二级接头中–E’-Su(即W’)与中央(杂)亚芳基上的–C(R8)(R9)-D 取代基相互间 处于邻位或对位。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“马来酰亚胺部分”是指药物接头化 合物的一级接头的组分，其中在一些方面是自稳定接头，并且有时表示为LR’或LSS’，以明确 指出对于药物接头化合物，其是配体药物偶联物化合物的LR/LSS的前体。马来酰亚胺部分 (M1)能够通过靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子参与迈克尔加成(即1,4-共轭加成)，从 而提供硫基取代的琥珀酰亚胺(M2)部分，其中硫取代基来自配体单元，该配体单元掺入或 对应于配体药物偶联物组合物或其化合物中如本文所述的靶向剂的结构。药物接头化合物 45 CN 111601803 A 说　明　书 29/185 页 的M1部分通过其酰亚胺氮原子连接至一级接头的其余部分。除了酰亚胺氮原子，M1部分通常 未取代，但是也可以在其马来酰亚胺环系统的环状双键处被不对称取代。这样的取代可以 导致靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子在区域化学上优选的共轭加成到马来酰亚胺环 系统的受阻较少或缺较多电子的双键碳原子上(取决于更多的决定性贡献)。这种共轭加成 导致琥珀酰亚胺(M2)部分，其通过靶向剂提供的巯基官能团的硫原子被配体单元硫取代。 当LR是LSS时，作为M1的酰亚胺氮的取代基并且将LSS连接至接头单元的其余部分的药物接头 化合物中的LSS组分是AR，这是必需的延伸单元。在一些方面，AR包含任选取代的C1-C4亚烃基 部分，被碱性单元取代或者掺入碱性单元，并且任选地与AO组合，所述AO是任选取代的C1-C12 亚烃基，任选地被[HE]取代，其中[HE]是水解增强部分。在其他方面，当药物接头化合物中 的LR不是LSS，但仍然包含马来酰亚胺部分或某些其他Lb’部分时，Lb’连接至二级接头的任选 的第一延伸单元，在一些方面，其任选地与AO组合，所述AO是任选取代的C1-C12亚烃基，任选 地被[HE]取代。因此，在LR是LSS的情况下，C1-C12亚烃基部分有时包含可能存在的第二任选 的延伸单元(AO)，它们都是LSS的组分，其中AO将LSS连接至二级接头，连接位置通常位于C1- C12亚烃基和酰亚胺氮原子的连接位点的远端。因此，在那些方面，-AR-AO-的C1-C12亚烃基部 分的取代基是非环状碱性单元，因此一级接头(LR)是药物接头化合物的自稳定接头(LSS)， 并且在其他方面，-AR-AO-的C1-C12亚烃基部分的任选取代基掺入环状碱性单元。当LR不是LSS 时，AO是第一延伸单元(A)的亚单元或取代基，所述延伸单元是二级接头的任选组分。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“琥珀酰亚胺部分”是指一种类型的 一级接头的组分，所述一级接头又是配体药物偶联物的接头单元的组分，源自靶向剂的反 应性巯基官能团的硫原子对药物接头化合物中或其含M1的前体中的马来酰亚胺部分(M1)的 马来酰亚胺环系统的迈克尔加成。因此，琥珀酰亚胺(M2)部分包含硫取代的琥珀酰亚胺环 系统，其酰亚胺氮原子通过任选取代的C1-C12亚烃基部分被一级接头的其余部分取代，在一 些方面，其是与AO任选地组合的AR组分，如当一级接头是稳定接头时那样。在那些方面，亚烃 基部分将环状碱性单元掺入AR或者被非环状碱性单元取代，如本文其他地方所述，并且在M1 前体上可能已经存在的琥珀酰亚胺环系统处被取代基任选取代。在一些方面，配体药物偶 联物化合物的Lss中琥珀酰亚胺环系统上的那些任选取代基不存在，并且在其他方面，–AR- AO-的C1-C12亚烃基部分被[HE]任选取代，它们都是LSS一级接头的组分，连接位置通常位于 酰亚胺氮原子的连接位置的远端。反过来，任选地与AO组合的AR(即-AR-AO)-的C1-C12亚烃基 部分直接共价连接至二级接头或者通过AO的[HE]间接连接。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“琥珀酸-酰胺部分”是指配体药物 偶联物内接头单元的自稳定化接头(LS)的组分，并且具有琥珀酰胺半酸残基的结构，该结 构有时被称为琥珀酸-酰胺，其酰胺氮被LS的另一组分取代，该组分是任选地与AO组合的任 选取代的C1-C12亚烃基部分，在一些方面，其掺入环状碱性单元以及任选地被[HE]取代，或 者在其他方面，其被非环状碱性单元取代并且任选地被[HE]取代，其中，琥珀酸-酰胺(M3) 部分进一步被L-S-取代，其中L是掺入或对应于靶向剂的配体单元以及S是来自该靶向剂的 硫原子。M3部分是由自稳定一级接头中的琥珀酰亚胺(M2)部分的硫取代的琥珀酰亚胺环系 统产生的，该自稳定一级接头已通过水解破坏了其羰基-氮键之一，这在碱性单元的辅助下 进行。因此，M3部分具有游离的羧酸官能团和酰胺官能团，其氮杂原子连接至一级接头的其 余部分，并且在与该羧酸或酰胺官能团成α的碳上被L-S-取代，取决于其M2前体的水解位 46 CN 111601803 A 说　明　书 30/185 页 点。不受理论的束缚，据信上述水解产生的M3部分提供了配体药物偶联物中的接头单元 (LU)，该接头单元不太可能通过消除其硫取代基导致其靶向配体单元(L)的偶联物遭受过 早损失。 当配体药物偶联物化合物的自稳定接头(LSS)中存在时，因为硫取代基的不对称取 代，硫取代的琥珀酰亚胺(M2)部分的琥珀酰亚胺环系统的水解可提供自稳定化接头(LS)中 的琥珀酸-酰胺(M3)部分的区域化学异构体，其中，所述水解由于附近存在非环状或环状碱 性单元是pH可控制的。这些异构体的相对量将至少部分归因于M2的两个羰基碳的反应性差 异，这可至少部分归因于M1前体中存在的任何取代基。当具有M2部分的LR不包含碱性单元但 是与碱性单元提供的受控水解相比高度可变时，也预期在一定程度上发生水解。那些情况 下，来自二级接头的A的C1-C12亚烃基部分在水解之前连接至M2的酰亚胺氮原子，并在水解 之后连接至M3的酰胺氮原子。如果配体药物偶联物中的LR不是LSS，并且其Lb组分是不对称的 M2部分，则还可能由于其琥珀酰亚胺环不受控制的水解而形成区域化学异构体。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“自稳定接头”是指配体药物偶联物 中接头单元的一级接头中的含M2的组分，或者药物接头化合物中接头单元的含M1的组分。在 药物接头化合物中，该组分可以设计为LSS’以表明是配体药物偶联物中LSS的含M2组分的前 体，其随后在控制的水解条件下转化为相应的自稳定化接头(LS)。LSS的碱性单元组分促进 这种水解，使得最初包含的LSS的配体药物偶联物由于现在包含LS的接头单元(LU)而变得更 加耐受其配体单元的过早损失。除了其M1或M2部分之外，LSS部分还包含AR(必需的延伸单 元)，在一些方面，任选地与A 组合，包含任选取代的C 2O 1-C12亚烃基部分，M 和LU的其余部分共 价连接至该亚烃基部分，其中，所述亚烃基部分掺入环状碱性单元并且任选地被[HE]取代 或者被非环状碱性单元取代并且任选地被[HE]取代。 在本发明的内容中，药物接头化合物的LSS含有必需的延伸单元AR和马来酰亚胺 (M1)部分，靶向剂通过它们作为配体单元进行连接。在一些方面，AR的C1-C12亚烃基部分任选 地与AO组合(即，-AR-AO-)，连接至药物接头化合物中M1的马来酰亚胺环系统的酰亚胺氮以 及接头单元的其余部分，后者任选地通过LSS的AO。在那些方面的一些中，AO包含任选取代的 吸电子杂原子或官能团或者由其组成，在本文中称为水解增强部分，在一些方面，除了BU之 外，其还可增强配体药物偶联物化合物相应的LSS部分中的M2部分的水解速率。在药物接头 化合物掺入配体药物偶联物化合物之后，现在LSS含有被配体单元硫取代的琥珀酰亚胺(M2) 部分(即，配体单元的连接通过将靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子迈克尔加成到M1的 马来酰亚胺环系统上而发生)。 在一些方面，环状碱性单元(cBU)在结构上对应于非环状碱性单元的碱性氮原子 与AR的碳形成环，使得环状碱性单元掺入AR中。通常，用于成环的AR的碳原子来自–AR-AO-的 C1-C12亚烃基部分的支链碳链，称为Ra2，其中该支链碳原子连接至M1/M2的酰亚胺氮原子，在 一些方面，其也在成环之前的BU连接位点，从而限定任选取代的螺C4-C12杂环。在这种构造 中，杂环的螺碳连接至M1的马来酰亚胺的酰亚胺氮，因此连接至M2中的氮，并且任选地通过 AO进一步连接至接头单元的其余部分，在一些方面，是水解增强[HE]部分或包含水解增强 [HE]部分。在该方面，环状BU有助于M2的琥珀酰亚胺部分的水解，形成其相应的开环形式， 由M3表示，以相似的定性方式形成非环状碱性单元，这也可以有HE增强。 在一些方面，根据本发明，药物接头化合物或配体药物偶联物中的LSS部分(有时显 47 CN 111601803 A 说　明　书 31/185 页 示为LSS’以明确表明它是LSS的前体)分别表示为通式M1-AR(BU)-AO-或-M2-AR(BU)-AO-，其中 AR(BU)是必需的延伸单元(AR)，该延伸单元掺入环状碱性单元或被非环状碱性单元取代，M1 和M2分别是马来酰亚胺或琥珀酰亚胺部分，AO是任选的第二延伸单元，在一些方面，其包含 HE或由HE构成。 一些配体药物偶联物化合物的示例性但非限制性LSS结构表示为： 其中波浪线表示与配体单元共价连接的位点，井号(#)表示与LO共价连接的位点， 弯曲虚线表示任选的环化，当BU为环状碱性单元时存在，或者当BU是非环状碱性单元时不 存在，[C(Rd1)Rd1)]q-[HE]部分是LSS的AO，其中AO是存在的，其中[HE]是任选的水解增强部 分，下标q是0或1至6的整数；每个Rd1独立地选自：氢和任选取代的C d11-C6烃基，或者两个R 与 它们连接的碳原子和任意居间的碳原子一起限定任选地取代的C3-C8碳环，其余的Rd1(如果 有的话)独立地是氢或任选取代的C1-C a26；以及R 是任选取代的C1-C8烃基，其在环状碱性单 元中于BU和Ra2连接的碳原子一起限定任选取代的螺C4-C12杂环，该杂环具有骨架碱性仲或 叔氮原子，使得与其中Ra2是氢并且BU被氢替换的相应的偶联物相比，环状碱性单元能够在 合适的pH时增加所示琥珀酰亚胺(M2)部分的水解速率以提供琥珀酸-酰胺(M3)部分，和/或 基本上保留其中Ra2是氢并且BU是非环状BU的相应的偶联物超过其中Ra2是氢并且BU被氢替 换的前述偶联物的水解速率的增加。 通常在配体药物偶联物组合物的制备中用作中间体的药物接头化合物中存在的 其他示例性LSS’结构表示为： 其中BU和其他可变基团如上文针对配体药物偶联物中的LSS结构以及针对该结构 和其他示例性LSS结构的实施方案中所述。当具有包含马来酰亚胺部分的自稳定接头前体 (LSS’)的药物接头化合物用于制备配体药物偶联物时，该LSS’部分转化为具有琥珀酰亚胺 部分的LSS部分。 48 CN 111601803 A 说　明　书 32/185 页 “自稳定接头”是源自配体药物偶联物中的自稳定接头(LSS)的含M2部分的有机部 分，其在受控条件下经历水解以提供相应的自稳定化接头(L 3S)的M 部分，其中，LU组分不太 可能使靶向部分与提供原始的含M2的LSS部分的含M1的部分的缩合反应逆转。除了M3部分之 外，自稳定化接头(LS)包含AR，AR掺入环状碱性单元或者被非环状碱性单元取代，其中AR任 选地与AO组合，共价连接至M3以及LS是组分的接头单元的其余部分。M3部分源自配体药物偶 联物中LSS的琥珀酰亚胺部分(M2)的转化，其中M2部分具有靶向部分的反应性巯基官能团的 硫原子与药物接头化合物的LSS部分的M1的马来酰亚胺环系统迈克尔加成形成的硫取代的 琥珀酰亚胺环系统，其中，与M2中相应的取代基相比，M2衍生部分在消除其硫取代基上具有 降低的反应性。在那些方面，M2衍生部分具有对应于M2的琥珀酸-酰胺(M3)部分的结构，其 中，M2的琥珀酰亚胺环系统的羰基-氮键之一已经历水解，在BU的碱性官能团的帮助下，因 为所述连接后该基团适当临近。因此，该水解的产物具有羧酸官能团和在其酰胺氮上取代 的酰胺官能团，所述酰胺氮对应于含M2的LSS前体至LS中的酰亚胺氮，其余部分是LU。在一些 方面，碱性官能团是非环状碱性单元的伯胺、仲胺或叔胺，或者环状碱性单元的仲胺或叔 胺。在其他方面，BU的碱性氮是如胍基部分中的任选取代的碱性官能团的杂原子。在任一方 面，BU的碱性官能团对碱催化的水解的反应性通过还原碱性氮的质子化状态而通过pH控 制。 因此，自稳定化结构(L )通常具有M3部分的结构，所述M3S 部分共价键合至掺入环状 碱性单元或者被非环状碱性单元取代AR，其中AR又共价键合至二级接头LO。L 及其M3S 、AR、AO 和BU组分与LO以上文所述的方式排列，表示为式-M3-AR(BU)-AO-LO-或-M3-AR(BU)-AO-LO-，其 中BU表示碱性单元的类型(环状或非环状)。 以下通过示例性而非限制性的方式显示了LSS和LS部分的示例性非限制性结构，其 中M2或M3以及AR(BU)、AO和LO以上文所述的方式排列，其中BU是非环状的： 其中，所示-CH(CH2NH2)C(＝O)-部分是-AR(BU)-AO-，其中BU是非环状碱性单元，其 中AR与AO组合，分别共价键合至M2或M3的酰亚胺或酰胺氮，并且被非环状碱性单元–CH2NH2取 代，其中AO是[HE]，其键合至LO，其中[HE]是–C(＝O)-。那些示例性结构包含琥珀酰亚胺(M2) 部分或琥珀酸-酰胺(M3)部分，所述琥珀酸-酰胺(M3)部分在LSS至LS的转化过程中由琥珀酰 亚胺环水解产生。 以下通过示例性而非限制性的方式显示了LSS和LS部分的示例性非限制性结构，其 中M2或M3以及AR(BU)和AO组分以上文所述的方式键合至LO，其中BU作为非环状碱性单元掺入 AR： 49 CN 111601803 A 说　明　书 33/185 页 其中，在这些-AR(BU)-AO-部分中，BU是杂环环状碱性单元，其结构对应于AR(BU)部 分中非环状碱性单元的氨基烷基，其中非环状碱性单元的碱性氮已至少部分地通过Ra2环化 至碳原子，该碳原子位于与非环状碱性单元连接的琥珀酰亚胺氮的α位。在上面的LSS和LS的 每一个结构中波浪线表示配体单元硫原子的共价连接位点，该配体单元是从靶向剂的反应 性巯基官能团衍生而来的，通过硫原子迈克尔加成到相应的药物接头化合物中M1部分的马 来酰亚胺环系统上。上述每个结构中的星号(*)表示季铵化药物单元与式-M2/M3-AR(BU)- AO-LO-的–LSS-LO-和-L 2S-LO-结构的共价连接位点，其中BU为环状或非环状。由于M 的琥珀酰 亚胺环系统因其硫取代基而被不对称取代，因此本文所定义的琥珀酸-酰胺(M3)部分的区 域化学异构体相对于释放的所述基团的位置可能不同，这是由于M2水解引起的。在以上结 构中，连接至LO的羰基官能团举例说明本文所定义的水解增强基团[HE]，其中[HE]表示为 共价连接至AR(BU)和LO的LSS或LS的AO组分。 -M3-AR(BU)-部分(其中BU是非环状或环状碱性单元)代表自稳定化接头(LS)部分 的示例性结构，如此命名是因为与式M2-AR(BU)相应的LSS部分相比，这些结构不太可能消除 配体单元的硫取代基，进而导致靶向部分的损失。不受理论的束缚，据信与M2相比，M3中更大 的构象柔韧性导致稳定性提高，M3不再将硫取代基约束在有利于E2消除的构象中。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“碱性单元”是指自稳定接头(LSS)部 分中内的有机部分，如本文所述，其通过BU参与构成L 2SS的M 部分内琥珀酰亚胺环系统的碱 催化水解(即，催化水分子向琥珀酰亚胺羰基-氮键之一加成)而被带入相应的LS部分中。在 一些方面，碱催化的水解是在连接至LSS的靶向配体单元可耐受的受控条件下开始。在其他 方面，碱催化的水解在包含LSS的药物接头化合物与靶向剂接触时开始，其中靶向剂的反应 性巯基官能团的硫原子的迈克尔加成与药物接头化合物的L   M1SS 部分的水解有效地竞争。 不受理论的束缚，以下方面描述了合适的碱性单元的设计的各种考虑。在一个这样的方面， 选择非环状碱性单元的碱性官能团及其在LSS中相对于其M2组分的相对位置，以用于BU与M2 的羰基的氢键合的能力，这有效地增加了其亲电子性，进而其对水攻击的敏感性。在另一个 这样的方面，进行那些选择，使得通过氢键键合到BU的碱性官能团而增加了亲核性的水分 子被导向M  2羰基。在第三个这样的方面，进行这些选择，使得质子化时碱性氮不会通过感 应性吸电子而将琥珀酰亚胺羰基的亲电子性提高到将促进过早水解的程度，导致需要从不 期望的过量药物接头化合物中进行补偿。在最后的这样的方面，这些机理作用的某种组合 有助于催化从LSS到LS的受控水解。 通常，通过上述机理方面中的一种或多种起作用的非环状碱性部分包含1个碳原 子或2-6毗邻的碳原子，更通常包含1个碳原子或2或3个毗邻的碳原子，其中碳原子将非环 50 CN 111601803 A 说　明　书 34/185 页 状碱性单元的碱性氨基官能团连接至其连接的LSS部分的其余部分。为了使碱性胺的氮处于 所需的附近以助于琥珀酰亚胺(M2)部分水解成其相应的开环琥珀酸-酰胺(M3)部分，相对于 AR与M2的琥珀酰亚胺氮(进而其相应的M1-AR结构的马来酰亚胺氮)的连接位点，非环状碱性 单元的含胺碳链通常在该部分的α碳处连接至LSS的AR。通常，非环状碱性单元的α碳具有(S) 立体化学构型或对应于L-氨基酸的α碳的构型。 如前所述，非环状形式的BU或环状形式的BU通常通过任选取代的C1-C12亚烃基部 分连接至L 1 2SS的M 或M 或LS的M3，其中，所述部分掺入环状碱性单元或者被非环状碱性单元取 代，并且分别键合至M1或M2的马来酰亚胺或琥珀酰亚胺氮或M3的酰胺氮。在一些方面，掺入 环状碱性单元的C1-C12亚烃基部分共价键合至LO，并且通常通过醚、酯、碳酸酯、脲、二硫化 物、酰胺氨基甲酸酯或其他官能团的居间发生，更通常通过醚、酰胺或氨基甲酸酯官能团。 类似地，非环状形式的BU通常通过–AR-AO-的任选取代的C1-C12亚烃基部分连接至LSS的M1或 M2或L 的M3，在连接至M1S 或M2的马来酰亚胺或琥珀酰亚胺环系统的酰亚胺氮原子或随后M2的 琥珀酰亚胺环系统水解形成的M3的酰胺氮原子的C1-C12亚烃基部分的相同碳处被非环状碱 性单元取代。 在一些方面，通过非环状碱性单元至Ra2的成环将环状碱性单元掺入非环状BU的结 构，其中Ra2是-A -A -的C -C 亚烃基部分的支化烃基部分并键合至M1/M2R O 1 12 的酰亚胺氮原子或 M3的酰胺氮原子的α碳原子，如非环状碱性单元所述，因而形成螺环环系统，使得环状碱性 单元掺入AR的结构中而不是当BU是非环状时作为AR的取代基。在那些方面，成环是针对非环 状碱性单元的碱性胺氮，因而根据两个α碳取代基中的相对碳链长度，提供环状碱性单元作 为任选取代的对称或不对称螺C4-C12杂环，其中的碱性氮现在是碱性骨架杂原子。为了使该 环化基本保持环状碱性单元中非环状碱性单元的碱性性质，非环状碱性单元氮的碱性氮原 子应为伯胺或仲胺而不是叔胺的氮原子，因为那样会导致在环状碱性单元的杂环中的季铵 化骨架氮。在从非环状碱性单元到环状碱性单元的环化方面，为了基本保留碱性氮在将LSS 转化为L 时协助M2水解为M3S 的能力，这些一级接头中环状碱性单元的最终结构通常将其碱 性氮定位为使得在碱性氮原子和AR组分的α螺碳之间不超过三个，通常是一个或两个中间 碳原子。通过本发明的实施方案进一步描述了掺入AR的环状碱性单元以及具有环状碱性单 元作为组分的LSS和LS部分。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“水解增强部分”是指吸电子基团或 部分，其是LSS部分及其水解产物LS的任选取代基。当作为AR-AO-的取代基存在时，水解增强 [HE]部分是任选的第二延伸单元(AO)或其亚单元[HE]并因此是LSS的另一组分，其中AR键合 至M2部分的酰亚胺氮，使得[HE]的吸电子效应能够增加该部分转化为L 3S的M 部分的琥珀酰 亚胺羰基基团的亲电子性。由于A 分别掺入环状碱性单元或被非环状碱性单元取代，M2R 的羰 基基团上[HE]对于增加通过感应和上述任一种类型的BU的效应的M3的水解速率的潜在作 用进行调节，使得由包含M1-AR(BU)-[HE]-结构的药物接头化合物制备配体药物偶联物的过 程中在一定程度上M1不会过早水解。相反，在受控条件下(例如有目的地提高pH，以减少碱 性单元的质子化)BU和[HE]促进水解(即，配体药物偶联物化合物的-M2-AR(BU)-[HE]-部分 转化为其相应的-M3-AR(BU)-[HE]-部分)的组合效应使得不需要过度的摩尔过量的药物接 头化合物来补偿其M1部分的水解。因此，靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子迈克尔加成 至M1的马来酰亚胺环系统，提供连接至M2的琥珀酰亚胺环系统的靶向配体单元，通常在与M1 51 CN 111601803 A 说　明　书 35/185 页 水解有效竞争的速率下发生。不受理论的束缚，据信在低pH下，例如当BU的碱性胺是TFA盐 的形式时，药物接头产物中M1过早水解比采用合适的缓冲剂将pH提高到适合碱催化时要慢 得多，并且可接受的摩尔过量的药物接头化合物可能足够补偿由于过早M1水解导致的任何 损失，在靶向剂的反应性巯基官能团的硫原子至药物接头化合物的M1部分的迈克尔加成的 完成或接近完成的时间过程中会发生这种过早M1水解。 如前所述，任一种类型的碱性单元对羰基水解增强作用取决于其官能团的碱性和 该碱性官能团相对于M1/M2羰基基团的距离。通常，[HE]是羰基部分(即，酮或-C(＝O)-)或其 他含烃基的官能团。当AO包含HE时，HE有时位于键合至M2或M3的-AR-AO-的碳原子的远端，并 且还提供LSS或LS与二级接头(LO)的共价连接。除酮以外的含羰基官能团包括酯、氨基甲酸 酯、碳酸酯和脲。当[HE]是除酮以外的含羰基的官能团时，与LO共享的该官能团的羰基部分 通常键合至-AR-AO-的其余部分。在一些方面，HE部分可以与-AR-AO-的AR共价键合的酰亚胺 氮足够远，从而观察到的对含M2的部分的琥珀酰亚胺羰基-氮键的水解敏感性没有明显的 影响或影响较小，而是主要由BU驱动。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“延伸单元”是指，接头单元的一级 或二级接头中的有机部分，其将靶向配体单元与更临近药物单元的接头单元的其他居间组 分物理上分开。当一级接头(LR)是LSS或LS一级接头时，由于其提供碱性单元，AR延伸单元是 一级接头(LR)中的必需组分。第一任选的延伸单元(A)和/或第二任选的延伸单元(AO)的存 在可能是必需的，如果LR、LSS或LS一级接头提供的配体单元没有足够的空间释放时，那些任 选的延伸单元中的一个或两个的缺失将使得配体药物偶联物的季铵化药物接头部分中的 接头单元不能得到有效处理以释放其季铵化药物单元作为微管溶素化合物。可选地，或除 了空间释放之外，可以包括那些任选的组分，以便在制备药物接头化合物中易于合成。第一 或第二任选的延伸单元(A或AO)可以分别是单个单元，也可以包含多个亚单元。通常，A或AO 是一个独特的单元或者具有2至4个独特的亚单元。 在一些方面，当L 1R是LSS/LS时，除了共价连接至药物接头化合物的M 或配体药物偶 联物化合物的M2/M3，AR还任选地通过AO键合至二级接头，其中AO作为AR的取代基并且因此是 LSS/LS的组分，是一种含羰基的官能团，其可以用作改善LSS至LS转化速率的水解增强(HE)单 元，掺入AR的环状碱性单元或者作为AR的取代基的非环状碱性单元可以对其进行催化。在那 些方面的一些中，通式L-(LR-B b-(A-W-Y-D )n)p(其中LR是LSS或LS)的配体药物偶联物)或者 通式LR-Bb-(Aa-W-Y-D )n的药物接头化合物(其中LR是LSS，有时表示为LR’和LSS’，它们的可变 基团如本文其他地方所述)(当下标n是2或更大时，要求下标b是1)中，AR或AR-AO通过LO的支 化单元键合至二级接头(LO)。在其他方面，如果下标n是1时，要求下标b是0，则LSS/LS或LSS’ 的AR通过LSS/LS或LSS’任选的第二延伸单元(AO)键合至二级接头(LO)，或者LSS/LS或LSS’的AR 或AO通过LO的第一任选的延伸单元(A)(当下标a是1时)或者通过W(当下标a是0时)键合至 LO，组分W、Y和D 线性排列(即排列为-W-Y-D )，其中W是肽可裂解单元。在其他方面，LSS或LS 的AR或AO键合至式-Y(W’)-的葡糖醛酸苷单元中的Y，使得W、Y和D 正交排列(即，排列为-Y (W’)-D )(当下标a是0时)或者键合至LO的A(当下标a是1时)。 在其他方面，LR是其他L 1SS/LS，但仍然包含M /M2部分或一些其他Lb/Lb’部分，使得无 需AR组分；因此药物接头化合物的Lb’或配体药物偶联物的Lb连接至A或AO，分别根据AO的存 在与否，现在是A的亚单元。或者，当A和AO都不存在时，LR包含Lb/Lb’并且连接至W(当W是肽 52 CN 111601803 A 说　明　书 36/185 页 可裂解单元时)或者连接至Y(当W是式–Y(W)-的葡糖醛酸苷单元时)。 在一些方面，二级接头的A或一级接头的AO，或者这些延伸单元的任一种的亚单 元，具有式–LP(PEG)-，其中LP是平行连接单元并且PEG是PEG单元，如本文其他地方所定义。 因此，配体药物偶联物或药物接头化合物中的一些接头单元含有式-LP(PEG)-W-Y-，其中配 体药物偶联物或药物接头化合物的通式中的下标a是1并且A或其亚单元是–LP(PEG)-，其中 W是肽可裂解单元，或者含有式-LP(PEG)-Y(W’)-，其中通式中的下标a是1并且A或其亚单元 是–LP(PEG)-，其中–Y(W’)-是葡糖醛酸苷单元。 通常，当下标a是1时，第一任选的延伸单元(A)存在并且具有一个碳原子或2至6个 毗邻的碳原子，将A连接至一级接头的AR或第二任选的延伸单元(AO)，取决于AO的存在与否， 在下标b是0的情况下，或者当下标b是1时连接至B，通过一个官能团并且将A连接至W，其中， W是肽可裂解单元，或者通过另一个官能团连接至二级接头内的葡糖醛酸苷单元的Y。在一 些方面，下标a是0，因而不存在第一延伸单元，或者下标a是1，其中A作为α-氨基酸、β-氨基 酸或其他含胺酸残基存在，因而A键合至AR、AO或B，并通过酰胺官能团键合至W或–Y(W’)-的 Y。在其他方面，A键合至AO，其中AO存在并且包含水解增强单元[HE]或由水解增强单元[HE] 构成。 除非上下文另有说明或暗示，本文所用的“支化单元”是指接头单元(LU)的任选组 分的三官能性有机部分。当超过一个季铵化微管溶素药物单元(通常2、3或4个)连接至配体 药物偶联物化合物或药物接头化合物中季铵化药物接头部分的接头单元(LU)时，存在支化 单元(B)。在具有上述通式的配体药物偶联物中，当Bb的下标b是1时表明存在支化单元，当 该式中下标n大于1时是这样。支化单元至少三官能性，以便掺入二级接头单元(LO)。当n是 1，支化单元不存在，如下标b是0时所示。由于每个LU具有多个D 单元而具有支化单元的药 物接头或配体药物偶联物化合物，具有含有式-B-Aa-W-Y-的接头单元，其中下标a是0或1，W 是肽可裂解单元，或者具有含有式-B-Aa-Y(W’)-的接头单元，当W是式–Y(W’)-的葡糖醛酸 苷单元时，其中下标a是0或1。A可含有式–LP(PEG)-，在这种情况下接头单元可含有式-LP (PEG)-W-Y-或-LP(PEG)-Y(W’)-，当下标b是0时，或者含有式-B-LP(PEG)-W-Y-或–B-LP (PEG)-Y(W’)-，当下标b是1。 在一些方面，具有官能化侧链的天然或非天然氨基酸或其他含胺的酸化合物用作 支化单元。在一些方面，B是L-或D-构型的赖氨酸、谷氨酸或天冬氨酸部分，其中ε-氨基、γ- 羧酸或β-羧酸官能团以及它们的氨基和羧酸末端，在LU的其余部分内与B互连。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“可裂解单元”是指在接头单元内提 供反应位点的有机部分，其中，与正常细胞相比(通常不存在于异常细胞的位点或远离异常 细胞的位点，从而对接头单元的反应位点起作用)，在异常细胞(例如过度增殖与过度刺激 的免疫细胞)内或周围对所述位点的反应性更高。在某些方面，较高的反应性是由于在异常 细胞的位点或内部存在大量的酶或非酶活性，并且反应性的程度足以在具有接头单元的配 体药物偶联物化合物释放季铵化微管溶素药物单元(D )，优先将异常细胞暴露于细胞毒性 或细胞抑制性微管溶素化合物而提供免疫选择性的细胞毒性。通过释放微管溶素化合物的 D 而引起的暴露是通过对具有该可q裂解单元的接头单元的酶促或非酶促作用而引发的。 本发明的一些方面，可裂解单元含有可被酶裂解的反应位点，与远离异常细胞位点的正常 细胞或正常细胞附近相比，该酶在过度增殖、免疫刺激或其他异常细胞内或周围的活性或 53 CN 111601803 A 说　明　书 37/185 页 丰度更大，以提供免疫选择性细胞毒性。在本发明的那些方面的一些中，可裂解单元是蛋白 酶的底物，因此W是肽可裂解单元，在一些方面，其是调节蛋白酶的底物。在其他方面，可裂 解单元是式–Y(W’)-的葡糖醛酸苷单元，代替配体药物偶联物或药物接头化合物的通式中 的W，其中，葡糖醛酸苷单元是糖苷酶的底物。在那些方面的任一种情况下，蛋白酶或糖苷酶 有时位于被靶向的细胞的细胞内(即，可裂解单元的反应位点是肽键或糖苷键，分别可以被 蛋白酶或糖苷酶裂解)，或者与血清蛋白酶、水解酶或糖苷酶相比，所述可裂解单元的肽或 糖苷键能够被细胞内调节蛋白酶、水解酶或糖苷酶选择性地裂解。在那些方面的一些中，反 应位点更可能在将配体药物偶联物化合物细胞内化到被靶向的异常细胞中之后酶促操作。 提供可裂解键的官能团包括但不限于形成酰胺键的羧基或氨基，如在肽键中，与 正常细胞相比，它们容易被异常细胞优先产生或分泌的蛋白酶酶解裂解，或者被靶细胞内 的调节蛋白酶酶解裂解。提供具有可裂解键的其他官能团存在于具有糖苷键的糖或碳水化 合物中，它们是糖苷的底物，与正常细胞相比，有时它们可能优先由异常细胞产生。或者，加 工接头单元以释放微管溶素化合物形式的季铵化微管溶素药物单元所需的蛋白酶或糖苷 酶不一定要相对于正常细胞而言优先在异常细胞中产生，前提是加工的酶正常细胞不分 泌，因此不会导致微管溶素化合物形式的D 的过早释放的不希望的副作用。在其他情况下， 所需的蛋白酶或糖苷酶可以分泌，但是避免不希望的药物过早释放，本发明的一些方面通 常要求加工的酶在异常细胞附近分泌并保持定位在该环境中，不论是异常细胞产生或是响 应异常细胞导致的异常环境的附近的异常细胞。在该方面，选择作为肽可裂解单元的W或葡 糖醛酸苷单元的W’以与自由循环的酶相反，在异常细胞的环境中或环境内分别通过蛋白酶 或糖苷酶优先起作用。在那些情况下，配体药物偶联物化合物不太可能在不希望的正常细 胞的附近释放微管溶素化合物形式的D ，也不会以任何可察觉的程度内化至正常细胞内， 在细胞内产生但不分泌旨在通过内化的配体药物偶联物化合物以任何可察觉的程度起作 用的酶，因为这些细胞不太可能显示被该化合物进入所需的被靶向部分或者具有足够拷贝 数的被靶向部分。 在一些方面，配体药物偶联物或药物接头化合物的通式中的W是肽可裂解单元，包 含氨基酸残基或者包含一种或多种氨基酸序列或由所述氨基酸序列构成，提供异常细胞内 存在的蛋白酶或定位到这些异常细胞的环境中的蛋白酶的底物。因此，W可以包含二肽、三 肽、四肽、五肽、六肽、七肽、八肽、九肽、十肽、十一肽、十一肽或十二肽部分或由它们组成， 所述部分通过酰胺键掺入自分解型间隔单元(Y)的PAB或PAB-型部分上，其中，所述肽提供 了蛋白酶的识别序列。在那些方面的一些中，蛋白酶是细胞内蛋白酶，如本文进一步所述， 通过已经内化到被靶向的细胞内的配体药物偶联物的肽可裂解单元起作用。 在其他方面，配体药物偶联物或药物接头化合物的通式中的W被-Y(W’)-替代，其 称为葡糖醛酸苷单元，其中W’是碳水化合物部分(Su)，通过任选取代的杂原子(E’)经糖苷 键连接至葡糖醛酸苷单元的自分解型间隔单元(Y)的PAB或PAB-型部分，可以被异常细胞优 先产生或者在这些细胞中发现的糖苷酶裂解，由于异常细胞上存在被靶向的部分，具有间 隔单元和碳水化合物部分的配体药物偶联物化合物选择性地进入异常细胞。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“天然氨基酸”是指天然存在的氨基 酸，即精氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、赖氨酸、甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、丝氨 酸、脯氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、异亮氨酸和缬 54 CN 111601803 A 说　明　书 38/185 页 氨酸或其残基，L或D构型，除非上下文另有说明或暗示。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“非天然氨基酸”是指含α-氨基的酸 或其残基，其具有天然氨基酸的基本结构，但具有连接至天然氨基酸中不存在的α碳的侧链 基团。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“非经典氨基酸”是指不具有其胺取 代基与羧酸的碳α键键合的含胺酸化合物，因此不是α-氨基酸。非经典氨基酸包括其中在天 然氨基酸或非天然氨基酸中的羧酸和氨基官能团之间插入亚甲基的β-氨基酸。 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“肽”是指两个或更多氨基酸的聚合 物，其中，一个氨基酸的羧酸基团与肽序列中下一个氨基酸的α-氨基形成酰胺键。在酰胺的 定义中另外提供了在多肽中制备酰胺键的方法。肽可以包含L-或D-构型的天然氨基酸或非 天然或非经典氨基酸。 [0200] 如本文所定义，“蛋白酶”是指能够酶促裂解肽中通常存在的羰基-氮键(例如酰胺 键)的蛋白质。蛋白酶分为六大类：丝氨酸蛋白酶，苏氨酸蛋白酶，半胱氨酸蛋白酶，谷氨酸 蛋白酶，天冬氨酸蛋白酶和金属蛋白酶，这样命名是因为主要负责裂解其底物的羰基-氮键 的活性位点中的催化残基。蛋白酶的特征在于各种特异性，其取决于羰基-氮键的N-末端 和/或C-末端侧的残基的身份和各种分布。 [0201] 当W是可被蛋白酶裂解的酰胺或其他含羰基-氮官能团的肽可裂解单元时，该裂解 位点通常限于被在过度增殖细胞或过度刺激的免疫细胞中或在其中存在过度增殖的细胞 或过度刺激的免疫细胞的环境中特异的名义上正常的细胞内的蛋白酶识别的位点。在那些 情况下，蛋白酶不一定要在配体药物偶联物靶向的细胞中优先存在或以更高的丰度存在， 因为偶联物对那些不优先具有靶向部分的细胞的访问较差。有时，与周围没有异常细胞的 典型环境中的周围的正常细胞相比，异常细胞或者存在异常细胞的环境中名义上的正常细 胞优先分泌蛋白酶。因此，在分泌蛋白酶的情况下，与远处的正常细胞相比，必须要求蛋白 酶在偶联物靶向的细胞附近优先存在或以更大的丰度存在。 [0202] 当掺入配体药物偶联物中时，包含W作为肽可裂解单元的肽将存在蛋白酶的识别 序列，该蛋白酶可裂解W中的羰基-氮键，导致接头单元断裂，从而释放来自D 的含叔胺的药 物。有时，识别序列被异常细胞中存在的细胞内蛋白酶选择性地识别，与正常细胞相比，偶 联物由于靶向异常细胞而优先进入异常细胞，或者与正常细胞相比，由异常细胞优先产生， 用于选择性地将药物递送至所需的作用位点。通常，该肽对循环的蛋白酶具有抗性，以最小 化微管溶素化合物形式的D 的过早排出，从而使对该化合物的不希望的全身性暴露最小。 通常，该肽在其序列中将具有一个或多个非天然或非经典氨基酸，以具有该抗性。通常，由 异常细胞产生的蛋白酶特异性裂解的酰胺键是苯胺，其中该苯胺的氮是自分解型间隔单元 的自分解型部分的新生的供电子杂原子(即，J)，其结构在其他地方描述。因此，蛋白酶对W 中这样的肽序列的作用导致通过涉及自分解型部分的(杂)亚芳基组分的1,4-或1,6-消除 从接头片段中释放出作为微管溶素化合物的D 。 [0203] 调节蛋白酶通常位于细胞内，并且对于调节有时在异常细胞中变得异常或失调的 细胞活性是必需的。在一些情况下，当W指向在细胞内具有优先分布的蛋白酶时，该蛋白酶 是调节性蛋白酶，其参与细胞维持或增殖。在某些情况下，那些蛋白酶包括溶酶体蛋白酶或 组织蛋白酶。组织蛋白酶包括丝氨酸蛋白酶，组织蛋白酶A，组织蛋白酶G，天冬氨酸蛋白酶 55 CN 111601803 A 说　明　书 39/185 页 组织蛋白酶D，组织蛋白酶E和半胱氨酸蛋白酶，组织蛋白酶B，组织蛋白酶C，组织蛋白酶F， 组织蛋白酶H，组织蛋白酶K，组织蛋白酶L1，组织蛋白酶L2，组织蛋白酶O，组织蛋白酶S，组 织蛋白酶W和组织蛋白酶Z。Turk,V.等人，Biochem.Biophys.Acta(2012)1824:66-88描述了 溶酶体蛋白酶的识别序列，所述溶酶体蛋白酶是用于掺入肽可裂解单元的半胱氨酸蛋白 酶。 [0204] 在其他情况下，当W是指向在过度增殖或过度刺激的免疫细胞的附近优先细胞外 分布的蛋白酶的肽可裂解单元时，由于这些细胞或者附近的细胞优先分泌，其分泌是在过 度增殖或过度刺激的免疫细胞的环境中所特有的，该蛋白酶通常是金属蛋白酶。通常，那些 蛋白酶参与组织重塑，这有助于过度增殖细胞的侵袭性或过度活化的免疫细胞的不希望的 积累，从而导致这种细胞的进一步募集。 [0205] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“间隔单元”是指共价键合至季铵化 微管溶素药物单元(D )的配体药物偶联物或药物接头化合物的接头单元内的二级接头(LO) 的组分，在一些方面，也共价键合至第一任选的延伸单元(A)，如果配体药物偶联物或药物 接头化合物的通式中的下标b是0，或者键合至支化单元(B)，如果所述通式的任一种中下标 b是1，或者键合至第二任选的延伸单元(AO)，如果A和B不存在(即下标a和b都是0)，或者键 合至含LSS/LS的接头单元中的AR，若这些其他接头单元组分都不存在。在一些方面，Y共价键 合至W和D ，其中W是肽可裂解单元，Y能够自分解，因此Y是自分解型间隔单元。在其他方面， Y是式–Y(W’)的葡糖醛酸苷单元的组分，其中键合至W’的Y是自分解型间隔单元，使得在W’ 和Y之间的糖苷键的裂解之后释放D 作为微管溶素化合物。 [0206] 通常，在一种配置中，W、Y和D 线性排列，配体药物偶联物或药物接头化合物的通 式中D 键合至Y，其中W是肽可裂解单元，使得蛋白酶作用于W启动作为微管溶素化合物的D 的释放。通常，在另一种配置中，配体药物偶联物或药物接头化合物含有式–Y(W’)-的葡糖 醛酸苷单元，其中，配体药物偶联物或药物接头化合物的通式中的二级接头(LO)内的W被该 单元替代，其中，葡糖醛酸苷单元的W’和D 共价键合至Y，其中，Y是自分解型间隔单元，Y又 键合至A/AR、B、AO或LR，取决于A、B和/或AO的存在与否，因而W’与LO的其余部分是正交关系。 如前所述，糖苷酶作用之后，Y自分解以释放D ，作为游离的细胞毒性或细胞抑制性药物微 管溶素化合物。在任何一种配置中，Y可以用于将肽可裂解单元或葡糖醛酸苷单元的裂解位 点与D 分开以避免该单元可能干扰W/W’的裂解的空间相互作用。 [0207] 通常，自分解型间隔单元包含键合至本文定义的季铵化微管溶素药物单元(D )的 PAB或PAB型部分或由其组成，以使肽可裂解单元或葡糖醛酸苷的酶促处理激活自分解型 PAB或PAB型部分发生自分解，从而启动季铵化微管溶素药物单元作为微管溶素化合物的释 放。在一些方面，自分解型间隔单元的PAB或PAB型部分通过肽可裂解的酰胺(或苯胺基)官 能团共价键合至D 和作为肽可裂解单元的W，而在其他方面，PAB或PAB型部分通过可被糖苷 酶切割的糖苷键共价键合至D 和葡糖醛酸苷单元的W’。 [0208] 在那些方面的任一个中，季铵化的微管溶素药物单元通过其N末端组分的季铵化 的骨架氮原子直接连接至自分解型间隔单元的PAB或PAB型部分。在一些方面，季铵化微管 溶素药物单元的N末端组分中的季铵化氮是饱和的5元或6元杂环系统的氮原子，例如N-烷 基-哌啶酸(pipecolic  acid)残基。 [0209] 在上述一些方面中，自分解型间隔单元(Y)的PAB或PAB型部分通过酰胺或苯胺官 56 CN 111601803 A 说　明　书 40/185 页 能团连接至季铵化的微管溶素药物单元(D )和W，酶促作用后，由于Y的PAB或PAB型部分自 分解而释放D ，从而提供了微管溶素化合物。在其他方面，自分解型间隔单元(Y)的PAB或 PAB型部分通过糖苷键连接至季铵化的微管溶素药物单元(D )和葡糖醛酸苷单元的W’，从 而使该键的裂解引发由于Y的PAB或PAB型部分自分解而释放D ，从而提供微管溶素化合物。 [0210] 如本文所用，“自分解型部分”是指间隔单元(Y)内的双官能部分，其中，自分解型 部分通过季铵化药物单元的饱和含氮杂环组分的季铵化骨架氮共价连接至D ，其中所述组 分对应于微管溶素N-末端组分，并且还通过任选取代的杂原子(J)共价连接至W的氨基酸残 基(其中W是肽可裂解单元)，或连接至任选取代的杂原子糖苷杂原子(E’)，键合至式–Y (W’)-的葡糖醛酸苷单元的W’的碳水化合物部分(Su)，因此自分解型部分将这些季铵化的 药物接头组分掺入正常稳定的三部分(tripartite)分子中，除非被激活，其中J或E’的这种 取代是允许的，并且与活化时本文所述的自分解所需的供电子性一致。 [0211] 一旦活化，W的共价键(其中W是肽可裂解单元)或代替W的式–Y(W’)-的葡糖醛酸苷 单元中W’的糖苷键裂解，因此通过自分解型间隔单元的PAB或PAB-型部分的自分解，D 从三 部分分子自发分离，导致D 作为微管溶素化合物释放，其不再具有季铵化的氮。在那些方面 的任一种中，在一些情况下Y的自分解发生在配体药物偶联物化合物的细胞内化之后，所述 化合物包含季铵化的微管溶素药物单元(D )和具有自分解型间隔单元的接头单元，其中 PAB或PAB型部分键合至D 。 [0212] 在一些方面，介于D 与Y的任选取代的杂原子J(其中J键合至W，即肽可裂解单元) 之间的自分解形间隔单元的PAB或PAB-型部分的居间组分具有式–C6-C24亚芳基-C(R9) (R9)-，-C5-C 9 924杂亚芳基-C(R )(R )-，-C 96-C24亚芳基-C(R )＝C(R9)-或-C5-C24杂亚芳基-C (R9)＝C(R9)-，任选地被取代，其中R9独立地选择，如本发明的实施方案所述，通常，该居间 组分是C6-C10亚芳基-CH2-或C5-C10杂亚芳基-CH2-，其中所述(杂)亚芳基任选地被取代。 [0213] 在其他方面，介于D 与W’中任选取代的杂原子E’之间代替W的式–Y(W’)-的葡糖醛 酸苷单元中自分解型间隔单元(Y)的PAB或PAB-型部分的居间组分具有式–C6-C24亚芳基-C (R9)(R9)-，-C -C 杂亚芳基-C(R9)(R9)-，-C -C 亚芳基-C(R95 24 6 24 )＝C(R9)-或-C5-C24杂亚芳基- C(R9)＝C(R9)-，任选地被取代，并且通常是C6-C10亚芳基-CH2-或C5-C10杂亚芳基-CH2-，其中 R9独立地选择，如本发明的实施方案所述，其中的(杂)亚芳基也可以被药物接头化合物中 的LR–Aa-，或接头药物偶联物化合物中的-LR-Aa-取代，具有基于葡糖醛酸苷的接头单元，并 且任选地被取代，其中A是第一任选的延伸单元，下标a是0或1，LR是一级接头。在那些方 面，-LR-Aa-通过任选取代的杂原子(J’)或包含J’的官能团(其独立地选自E’)键合至PAB或 PAB-型部分的(杂)亚芳基部分。 [0214] 在任一方面，自分解型间隔单元的PAB或PAB-型部分的居间组分能够通过1,4或1, 6-消除发生片段化以形成亚氨基醌甲基化物或相关结构，J和W之间的蛋白酶可裂解键的裂 解或W’的糖苷酶可裂解键的裂解而伴随释放D 。在一些方面，键合至J、或至W’和-LR-Aa-的 具有上述中间(杂)亚芳基部分的自分解型间隔单元的例子包括：任选取代的对氨基苄醇 (PAB)部分，邻-或对-氨基苄基缩醛，或电子上与PAB基团相似的其他芳香族化合物(即PAB 型)，例如2-氨基咪唑-5-甲醇衍生物(例如参见，Hay等,1999,Bioorg .Med .Chem .Lett.9: 2237)，或其中对氨基苄醇(PAB)部分的苯基被杂亚芳基取代的化合物。 [0215] 在葡糖醛酸苷单元中，结合W’和-C(R9)(R9)-D 或-C(R9)＝C(R9)-D 的居间(杂)亚 57 CN 111601803 A 说　明　书 41/185 页 芳基部分有时被吸电子基团取代，有时能够增加糖苷裂解的速率，但是由于该片段化的强 制性副产物醌-甲基化物中间体产生的不稳定，可能会降低用于释放D 作为微管溶素化合 物的自分解型部分间隔单元的片段化速率。 [0216] 不受理论的束缚，基于肽可裂解的连接基单元中的自消旋间隔基单元的PAB或PAB 型部分的中心亚芳基或杂亚芳基的芳族碳被J取代，其中J的供电子性杂原子连接至肽可裂 解接头单元中W的可裂解位点，因此该杂原子的供电子能力被减弱(即EDG能力由于自分解 型间隔单元的PAB或PAB型部分掺入基于肽可裂解的接头单元中而被掩盖)。杂(亚芳基)的 另一个所需的取代基是连接至季铵化的微管溶素药物单元(D )的季铵化氮原子的任选取 代的苄基碳，其中苄基碳连接至中间(杂)亚芳基的另一芳族碳原子，其中具有被减弱的供 电子杂原子的芳族碳与该另一芳族碳原子相邻(即1,2-关系)，或距离该另一芳族碳原子两 个额外的位置(即1,4-关系)。 [0217] 类似地，在基于葡糖醛酸苷的接头单元中，其自分解型间隔单元的PAB或PAB-型部 分的中间(杂)亚芳基通过糖苷键被W’取代，其中该键的任选取代的杂原子(E’)的供电子能 力被减弱(即，EDG能力由于自分解型间隔单元的PAB或PAB型部分掺入基于葡糖醛酸苷的接 头单元中而被掩盖)。杂(亚芳基)的另一个所需的取代基是(1)药物接头化合物中式LR-Aa- 或配体药物偶联物化合物中的LR-Aa-的接头单元的其余部分，连接至中间(杂)亚芳基的第 二芳族碳原子，和(2)连接至季铵化的微管溶素药物单元(D )的季铵化氮原子的苄基碳，其 中苄基碳也连接至中间(杂)亚芳基的第三芳族碳原子，其中具有该减弱的供电子杂原子的 芳族碳与该第三芳族碳原子相邻(即1,2-关系)，或距离该地三芳族碳原子两个额外的位置 (即1,4-关系)。 [0218] 在接头单元的任一种类型中，选择EDG杂原子，使得作为肽可裂解单元的W或代替W 的葡糖醛酸苷单元的W’的裂解位点的处理过程中，被掩盖的杂原子的供电子能力得以恢 复，从而触发了1,4-或1,6-消除以从苄基取代基排出作为微管溶素化合物的-D 。示例性但 非限制性的自分解型部分和具有那些自分解型部分的自分解型间隔单元通过本发明的实 施方案示例。 [0219] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“糖苷酶”是指能够酶促裂解糖苷键 的蛋白质。通常，待裂解的糖苷键存在于葡糖醛酸苷单元中，作为配体药物偶联物或药物接 头化合物的可裂解单元。有时，作用于配体药物偶联物的糖苷酶在细胞内存在于配体药物 偶联物(与正常细胞相比)优先进入的过度增殖细胞、过度活化的免疫细胞或其他异常细胞 中，这归因于其配体单元的靶向能力。有时，与正常细胞相比，糖苷酶对于异常细胞更具特 异性或者由异常细胞优先分泌，或者与需要给予配体药物偶联物的预期对象的血清中通常 存在的糖苷酶的量相比以更大的量存在于异常细胞的附近。通常，葡糖醛酸苷单元中的糖 苷键具有式–W’(Y)-，其将碳水化合物部分(Su)的异头碳通过任选取代的杂原子(E’)连接 至自分解形延伸单元(Y)，因此W’是Su-E’-并且被糖苷酶起作用。在一些方面，E’与碳水化 合物部分(Su)形成糖苷键，是自分解型延伸单元(Y)中自分解型部分的酚氧原子，因此该键 的糖苷裂解出发作为微管溶素化合物的D 的1,4-或1,6-消除。 [0220] 在一些方面，其中W是葡糖醛酸苷单元，具有可裂解单元的式–Y(W’)-药物接头化 合物表示为式LR-Bb-(Aa-Y(W’)-D )n，包括LSS-Bb-(Aa-Y(W’)-D )n，其中LSS是M1-AR(BU)-AO-， 配体药物偶联物表示为L-(LR-Bb-(A -Y(W’)-D a )n)p，包括L-(LSS-Bb-(Aa-Y(W’)-D )n)p或L- 58 CN 111601803 A 说　明　书 42/185 页 (LS-Bb-(Aa-Y(W’)-D )n)p，其中LSS是M2-AR(BU)-AO，L 是M3S -AR(BU)-AO-，其中AO是第二任选的 延伸单元，其在一些方面至少部分地用作水解增强[HE]单元，A是第一任选的延伸单元，其 中在一些方面A或其亚单元具有式-LP(PEG)-，其中–LP和PEG分别如本文中针对平行连接单 元和PEG单元所述；BU表示非环状或环状碱性单元，下标a和b独立地是0或1，下标n是1,2,3 或4，其中B是支化单元，并且当下标n是2,3或4而下标b是1并且其中A是第一延伸单元，下标 a是1时存在。 [0221] 在那些方面中的一些中，–Y(W’)-是式(Su-O’)-Y-，其中Su是碳水化合物部分，Y是 自分解型间隔单元，具有PAB或PAB-型自分解型部分，糖苷键合至Su，其中O’作为E’，表示被 糖苷酶裂解的糖苷键的氧原子，其中季铵化的微管溶素药物(D )单元的季铵化的氮原子直 接键合至Y的自分解型部分，并且其中Su-O’-连接至Y的自分解型部分的任选取代的(杂)亚 芳基，D 通过任选取代的苄基碳连接至该(杂)亚芳基，从而引发D 的自分解型释放，提供微 管溶素化合物。虽然这些–Y(W’)-部分被称为葡糖醛酸苷单元，W’的Su并不限于葡糖醛酸残 基。 [0222] 通常，具有式(Su-O’-Y)-的葡糖醛酸苷单元(其中-O’-表示糖苷键的氧，Su是碳水 化合物部分)通过本文针对自分解型间隔单元(Y)所述的结构表示，其中与Y的PAB或PAB型 部分的中间(杂)亚芳基部分键合的E’是氧原子，杂原子通过该部分的异头碳原子与碳水化 合物部分(Su)相连。 [0223] 在一些方面，连接至D 的这些部分包括具有以下结构的式-(Su-O’)-Y-D ： [0224] [0225] 其中，R24A、R24B和R24C独立地选自：氢、C1-C6烃基、C1-C6烃氧基、其他EDG、卤素、硝基 和其他EWG，或者左手边结构中的R2A和R’、或右手边结构中的R24C和R’与它们所连接的芳族 碳一起形成苯并C5-C6碳环，进行选择以使通过糖苷酶的酶促作用导致的糖苷键释放的酚– OH的供电子能力，被糖苷酶选择性裂解的敏感性，以及1,4-或1,6-消除导致片段化实现的 亚氨基醌甲基化物中间体的稳定性与D 的离去能力之间实现平衡，以适当地有效释放D 作 为微管溶素化合物。上述结构中的(Su-O’)-Y-部分代表性地是式–Y(W’)-的葡糖醛酸苷单 元。当糖苷键是葡糖醛酸时，能够酶促裂解该糖苷键的糖苷酶是葡糖醛酸糖苷酶。 [0226] 在那些方面的一些中，-(Su-O’)-Y-D 具有以下结构： [0227] [0228] 其中，D 对应于或掺入微管溶素化合物；R45是–OH或–CO2H。本发明的实施方案提供 59 CN 111601803 A 说　明　书 43/185 页 了那些和其他葡糖醛酸苷单元的进一步描述。 [0229] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“碳水化合物部分”是指具有经验式 Cm(H2O)n的单糖的单价基团，其中n等于m，在其半缩醛形式或其衍生物中含有醛部分，其中 该式内的CH2OH部分已经氧化为羧酸(例如，葡萄糖中的CH2OH基团的氧化产生的葡糖醛酸)。 通常，碳水化合物部分(Su)是环状己糖(例如吡喃糖)或环状戊糖(例如呋喃糖)的单价基 团。通常，吡喃糖为β-D构型的葡糖醛酸苷或己糖。在某些情况下，吡喃糖是β-D-葡糖醛酸苷 部分(即，β-D-葡糖醛酸经通过β-葡糖醛酸糖苷酶可裂解的糖苷键与自分解型间隔单元的 自分解型部分连接)。有时，碳水化合物部分未被取代(例如，是天然存在的环状己糖或环状 戊糖)。在其他时候，碳水化合物部分可以是β-D-葡糖醛酸苷衍生物，例如葡糖醛酸，其中一 个或多个，通常是其1或2个羟基部分被选自卤素和C1-C4烃氧基的部分独立地取代。 [0230] 如本文所用，“PEG单元”是指包含聚乙二醇部分(PEG)的基团，该聚乙二醇部分具 有下式的重复乙二醇亚基： [0231] [0232] PEG包括多分散PEG，单分散PEG和离散PEG。多分散PEG是大小和分子量的异质混合 物，而单分散PEG通常是从异质混合物中纯化的，因此提供了单链长度和分子量。离散PEG是 以逐步方式而非通过聚合过程合成的化合物。离散的PEG提供具有定义和指定链长的单个 分子。 [0233] PEG单元包含至少2个亚基，至少3个亚基，至少4个亚基，至少5个亚基，至少6个亚 基，至少7个亚基，至少8个亚基，至少9个亚基，至少10个亚基，至少11个亚基，至少12个亚 基，至少13个亚基，至少14个亚基，至少15个亚基，至少16个亚基，至少17个亚基，至少18个 亚基，至少19个亚基，至少20个亚基，至少21个亚基，至少22个亚基，至少23个亚基或至少24 个亚基。一些PEG单元包含最多达72个亚基。 [0234] 如本文所用，“PEG封端单元”是终止PEG单元的自由端和非束缚端的有机部分或官 能团，并且在某些方面不是氢，以保护或降低非束缚端的化学反应性。在那些方面，PEG封端 单元是甲氧基、乙氧基、或其他C1-C6醚，或者是-CH2-CO2H或其他合适的部分。醚、-CH2-CO2H, CH2CH2CO2H、或其他合适的有机部分因此充当PEG单元的末端PEG亚单元的端帽。 [0235] 本文使用的“细胞内裂解”和类似术语是指配体药物偶联物或类似物在被靶向的 细胞内发生的代谢过程或反应，从而通过其接头单元在季铵化的微管溶素药物单元和接头 之间的共价连接断裂，导致在被靶向的细胞内释放D 作为微管溶素化合物。 [0236] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“血液恶性肿瘤”是指源自淋巴样或 髓样来源的细胞的血细胞肿瘤，并且与术语“液体肿瘤”同义。血液系统恶性肿瘤可分为惰 性、中度侵袭性或高度侵袭性。 [0237] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“淋巴瘤”是指通常从淋巴来源的过 度增殖的细胞发展而来的血液学恶性肿瘤。淋巴瘤有时分为两种主要类型：霍奇金淋巴瘤 (HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)。淋巴瘤还可以根据表型、分子或细胞遗传学标志物，根据最 类似于癌细胞的正常细胞类型进行分类。在该分类下的淋巴瘤亚型包括但不限于：成熟的B 细胞肿瘤，成熟的T细胞和自然杀伤(NK)细胞肿瘤，霍奇金淋巴瘤和免疫缺陷相关性淋巴增 殖性疾病。淋巴瘤亚型包括：前体T细胞淋巴母细胞性淋巴瘤(由于T细胞淋巴母细胞在骨髓 60 CN 111601803 A 说　明　书 44/185 页 中产生，有时也称为淋巴母细胞性白血病)，滤泡性淋巴瘤，弥漫性大B细胞淋巴瘤，套细胞 淋巴瘤，B细胞慢性淋巴细胞性淋巴瘤(有时由于涉及外周血而被称为白血病)，MALT淋巴 瘤，伯基特氏淋巴瘤，蕈样真菌病及其侵袭性变种塞兹里氏病(Sézary’s  disease)，未另作 说明的外周T细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤结节性硬化和混合细胞性亚型霍奇金淋巴瘤。 [0238] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“白血病”是指血液恶性肿瘤，其通 常由髓样来源的过度增殖细胞发展而来，包括但不限于：急性淋巴细胞白血病(ALL)，急性 骨髓性白血病(AML)，慢性淋巴细胞性白血病(CLL)，慢性骨髓性白血病(CML)和急性单核细 胞白血病(AMoL)。其他白血病包括毛细胞白血病(HCL)，T细胞淋巴白血病(T-PLL)，大颗粒 淋巴细胞白血病和成年T细胞白血病。 [0239] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“过度增殖细胞”是指异常细胞，其 特征在于不需要的细胞增殖或异常高速率或持续的细胞分裂状态或与周围正常组织无关 或不协调的其他细胞活动。在某些方面，过度增殖细胞是过度增殖哺乳动物细胞。在其他方 面，过度增殖细胞是本文定义的过度刺激的免疫细胞，其细胞分裂或激活的持久状态发生 在可能最初引起其细胞分裂变化的刺激停止之后。在其他方面，过度增殖的细胞是转化的 正常细胞或癌细胞，并且它们的不受控制的进行性细胞增殖状态可能导致良性、潜在恶性 (恶变)或明显恶性的肿瘤。由转化的正常细胞或癌细胞引起的过度增殖疾病包括但不限于 表现为癌前体(precancer)，增生(hyperplasia)，非典型增生(dysplasia)，腺瘤，肉瘤，母 细胞瘤，癌，淋巴瘤，白血病或乳头状瘤的那些。癌前体通常被定义为表现出组织学变化并 与癌症发展的风险增加相关的病变，有时具有某些但不是全部的表征癌症的分子和表型特 性。激素相关或激素敏感的癌前体包括但不限于：前列腺上皮内瘤变(PIN)，尤其是高级PIN (HGPIN)，非典型小腺泡增生(ASAP)，宫颈发育异常和原位导管癌。增生通常是指器官或组 织内细胞的增殖超过通常所见的增殖，可能导致器官的总体增大或良性肿瘤的形成或生 长。增生包括但不限于：子宫内膜增生(子宫内膜异位)，良性前列腺增生和导管增生。 [0240] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“正常细胞”是指经历协调的细胞分 裂的细胞，这些细胞与维持正常组织的细胞完整性、或调节细胞更新所需的循环淋巴或血 细胞的补充、或受伤导致必需的组织修复有关，或者涉及因病原体暴露或其他细胞侵害引 起的调节的免疫或炎性反应，其中诱发的细胞分裂或免疫反应在完成必要的维护、补充或 清除病原体后终止。正常细胞包括正常增殖细胞、正常静止细胞和正常激活的免疫细胞。正 常细胞包括正常静止细胞，它们是处于静止的Go状态的非癌细胞，没有受到压力或促分裂 素的刺激，或者是通常不活跃或未被促炎性细胞因子暴露激活的免疫细胞。 [0241] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“异常细胞”是指负责促进或维持配 体药物偶联物旨在预防或治疗的疾病状态的不需要的细胞。异常细胞包括过度增殖细胞和 过度刺激的免疫细胞，这些术语在本文其他地方定义。异常细胞还可以指处于其他异常细 胞环境中的名义上正常的细胞，但是它们仍支持这些其他异常细胞(例如肿瘤细胞)的增殖 和/或存活，因此靶向名义上正常的细胞细胞间接抑制了肿瘤细胞的增殖和/或存活。 [0242] 除非上下文另有说明或暗示，否则本文所用的“过度刺激的免疫细胞”是指参与先 天性或适应性免疫的细胞，其特征是在最初可能引起增殖或刺激变化的刺激停止后或在没 有任何外部攻击的情况下发生的异常持续的增殖或不适当的刺激状态。通常，持续的增殖 或不适当的刺激状态会导致疾病状态或病症的慢性炎症状态。在某些情况下，最初可能引 61 CN 111601803 A 说　明　书 45/185 页 起增殖或刺激变化的刺激不是由于外在攻击而是由内部产生的，如自身免疫性疾病。在一 些方面，过度刺激的免疫细胞是已经通过慢性促炎细胞因子暴露而被过度激活的促炎免疫 细胞。 [0243] 在本发明的一些方面，配体药物偶联物组合物的配体药物偶联物化合物结合由异 常增殖或被不适当或持续激活的促炎免疫细胞优先展示的抗原。这些免疫细胞包括经典激 活的巨噬细胞或1型T辅助细胞(Th1)，它们会产生干扰素-γ(INF-γ)，白介素-2(IL-2)，白 介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-β(TNF-β)，是参与巨噬细胞和CD8 T细胞活化的细胞因 子。 [0244] 除非上下文另有说明或由暗示，否则“生物利用度”是指给定量的给予患者的药物 的全身利用度(即血液/血浆水平)。生物利用度是一个绝对术语，表示从给予药物剂型到药 物到达全身循环的时间(速率)和总量(程度)的量度。 [0245] 除非上下文另有说明或暗示，否则“对象”是指人类，非人类灵长类动物或哺乳动 物，具有过度增殖、炎性或免疫性疾病或其他归因于异常细胞的疾病，或通过给予有效量的 配体药物偶联物倾向于从中受益的疾病。对象的非限制性实例包括：人，大鼠，小鼠，豚鼠， 猴子，猪，山羊，牛，马，狗，猫，鸟和禽。通常，对象是人类，非人的灵长类，大鼠，小鼠或狗。 [0246] 除非上下文另有说明或暗示，否则“载体”是指与化合物一起给予的稀释剂、辅助 试剂或赋形剂。这类药物载体可以是液体，如水和油，包括来自石油、动物、植物或合成来源 的油，如花生油、大豆油、矿物油和芝麻油。载体可以是盐水，阿拉伯胶，明胶，淀粉糊，滑石， 角蛋白，胶体二氧化硅，尿素。另外，可以使用辅助剂，稳定剂，增稠剂，润滑剂和着色剂。在 一个实施方案中，给予对象时，所述化合物或组合物和药学上可接受的载体是无菌的。当化 合物静脉内给予时，水是示例性的载体。盐水溶液和右旋糖水溶液和甘油溶液也可用作液 体载体，特别适用于注射液。合适的药用载体也包括赋形剂，例如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、 明胶、麦芽、大米、面粉、白垩(chalk)、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱 脂奶粉、甘油、丙烯、二醇、水、乙醇。如果需要，本发明的组合物也可含有少量润湿剂或乳化 剂或pH缓冲剂。 [0247] 除非上下文另外指出，否则本文所用的“盐形式”是指与抗衡阳离子和/或抗衡阴 离子发生离子缔合从而形成总体中性物质的带电化合物。在某些方面，化合物的盐形式是 通过母体化合物的碱性或酸性官能团分别与外部酸或碱相互作用而形成的。在其他方面， 与抗衡阴离子缔合的化合物的带电原子是永久的，即不会发生自发离解而形成中间物质而 不改变母体化合物的结构完整性，如氮原子被季铵化时。因此，化合物的盐形式可以在该化 合物内包含季铵化的氮原子和/或该化合物的碱性官能团和/或该离子化的羧酸的质子化 形式，它们各自与抗衡阴离子离子缔合。在一些方面，盐形式可以由相同化合物内的碱性官 能团和离子化的酸官能团的相互作用产生，或涉及包含带负电荷的分子，例如乙酸根离子、 琥珀酸根离子或其他抗衡阴离子。因此，盐形式的化合物在其结构中可以具有一个以上的 带电原子。在母体化合物的多个带电原子是盐形式的一部分的情况下，该盐可以具有多个 抗衡离子，从而化合物的盐形式可以具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。 该抗衡离子可以是任何能稳定母体化合物上相反电荷的带电有机或无机部分。 [0248] 当化合物的碱性官能团(例如伯、仲或叔胺或其他碱性胺官能团)与合适的pKa的 有机或无机酸相互作用以使碱性官能团质子化时，通常会获得化合物的质子化盐形式，或 62 CN 111601803 A 说　明　书 46/185 页 具有合适pKa的化合物的酸官能团(例如羧酸)与氢氧化物盐(例如NaOH或KOH)或具有适当 强度的有机碱(例如三乙胺)相互作用时，用于酸官能团的去质子化。在一些方面，盐形式的 化合物包含至少一个碱性胺官能团，因此可以与该胺基形成酸加成盐，该胺基包括环状或 非环状碱性单元的碱性胺官能团。在药物接头化合物的上下文中，合适的盐形式是不会过 度干扰靶向剂与旨在提供配体药物偶联物的药物接头化合物之间的缩合反应的盐形式。 [0249] 除非上下文另外指出，否则本文所用的“药学上可接受的盐”是指化合物的盐形 式，其中其抗衡离子对于将盐形式给予预期对象是可接受的，并且包括无机和有机抗衡阳 离子和抗衡阴离子。碱性胺官能团(例如环状或无环碱性单元中的那些)的示例性药学上可 接受的抗衡离子的盐包括但不限于：硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯离子、溴离子、碘 离子、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸、酒石酸 盐、油酸盐、单宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、苯 磺酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨 酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和扑酸盐(即1,1’-亚甲基-双(2- 羟基-3-萘甲酸盐)。 [0250] 通常，药学上可接受的盐选自P.H.Stahl和C.G.Wermuth编撰《, 药用盐的手册：性 质、选择和使用》(Handbook  of＝Pharmaceutical  Salts:Properties ,Selection  and  Use) ,Weinheim/Zürich:Wiley-VCH/VHCA,2002中描述的那些。盐的选择取决于药物产品必 须具有的性质，包括在各种pH值下的足够的水溶性，取决于预期的给药途径，具有适合于处 理的流动特性和低吸湿性(即吸水性)的结晶度，以及例如对于冻干制剂通过确定加速条件 下的化学和固态稳定性(即，用于确定在40℃和75％相对湿度下储存时的降解或固态变化) 所要求的保质期。 [0251] 除非上下文另有说明或暗示，否则“抑制”和类似术语是指减少可测量的量，或完 全防止不希望的活动或结果。在某些方面，不期望的结果或活性与异常细胞有关，并且包括 过度增殖，或过度刺激或疾病状态下的其他细胞活性失调。通常在合适的测试系统中，如在 细胞培养物中(体外)或在异种移植模型中(体内)，确定相对于未处理的细胞(用载体处理 的伪影)，配体药物偶联物对这种失调的细胞活性的抑制作用。通常，靶向于在感兴趣的异 常细胞上不存在或具有低拷贝数的抗原，或者经基因工程改造以不识别任何已知抗原的配 体药物偶联物用作阴性对照。 [0252] 除非上下文另外指出，否则“治疗”和类似术语是指治疗性处理，包括预防复发的 预防措施，其中目的是抑制或减缓(减轻)不良的生理变化或病症，例如癌症的发展或蔓延 或慢性炎症引起的组织损伤。通常，此类治疗的有益或期望的临床益处包括但不限于可检 测或不可检测的症状减轻，疾病程度减轻，疾病状态稳定(即不恶化)，疾病进展延迟或减 慢，改善或减轻疾病状态和缓解(无论是部分还是全部)。“治疗”也可以指与不接受治疗的 期望存活或生活品质相比延长生存期或生活品质。需要治疗的人包括已经患有该疾病或病 症的那些以及易于患该疾病或病症的那些。 [0253] 在癌症的情况下，术语“治疗”包括抑制肿瘤细胞、癌细胞或肿瘤的生长，抑制肿瘤 细胞或癌细胞的复制，抑制肿瘤细胞或癌细胞的扩散，抑制肿瘤细胞或癌细胞的扩散，减轻 总体肿瘤负担或减少癌细胞数量，或改善与癌症有关的一种或多种症状中的任一种或全 部。 63 CN 111601803 A 说　明　书 47/185 页 [0254] 除非上下文另外指出或暗示，否则“治疗有效量”是指可有效治疗哺乳动物的疾病 或病症的具有季铵化的微管溶素药物单元的微管溶素化合物或配体药物偶联物的量。在癌 症的情况下，治疗有效量的微管溶素化合物或配体药物偶联物可以减少癌细胞的数量，减 小肿瘤的大小，抑制(即在一定程度上减慢并优选停止)癌细胞向周围器官的浸润，抑制(即 在某种程度上减慢并且优选地停止)肿瘤转移，在某种程度上抑制肿瘤的生长，和/或在某 种程度上减轻与癌症有关的一种或多种症状。在一定程度上，微管溶素化合物或配体药物 偶联物可以抑制生长和/或杀死现有的癌细胞，其可以是细胞生长抑制性的和/或细胞毒性 的。对于癌症治疗，可以例如通过评估疾病进展时间(TTP)，确定缓解率(RR)和/或总体生存 率(OS)来衡量疗效。 [0255] 在由过度刺激的免疫细胞引起的免疫失调的情况下，治疗有效量的药物可以减少 过度刺激的免疫细胞的数量，降低被刺激的程度和/或渗透到其他正常组织中，和/或在某 种程度上缓解由于免疫细胞过度刺激而导致免疫系统失调的一种或多种症状。对于由于过 度刺激的免疫细胞导致的免疫失调，可以例如通过评估一种或多种炎性替代物(包括一种 或多种细胞因子水平，例如IL-1β，TNFα，INFγ和MCP-1的水平，或经典激活的巨噬细胞的数 量)来评估功效。 [0256] 在本发明的一些方面，配体药物偶联物与靶细胞(即异常细胞，例如过度增殖细胞 或过度刺激的免疫细胞)表面上的抗原缔合，然后偶联物化合物通过受体介导的内吞作用 被靶细胞摄取。一旦进入细胞内，偶联物的接头单元内的一个或多个可裂解单元被裂解，导 致释放季铵化的微管溶素药物单元(D )作为微管溶素化合物。然后，释放的化合物可以自 由地在细胞溶质中迁移并诱导细胞毒性或细胞抑制活性，或者在免疫细胞过度刺激的情况 下，也可以抑制促炎性信号传导。在本发明的另一方面，季铵化的微管溶素药物单元(D )从 配体药物偶联物中释放到靶细胞外但在靶细胞附近，从而从该释放中得到的微管溶素化合 物随后能够渗透到细胞内，而不是在远端部位过早释放。 [0257] 2.实施方案 [0258] 下面描述本发明的许多实施方案，随后更详细地讨论在本发明的方法中有用的组 分，例如基团、试剂和步骤。用于方法的组成部分的任何选择的实施方案都可以应用于本文 所述的本发明的每个方面，或者它们可以涉及单个方面。所选择的实施方案可以以适合于 制备微管溶素化合物或其中间体并且适于制备掺入或对应于微管溶素化合物的具有季铵 化微管溶素药物单元的配体药物偶联物，药物接头化合物或其中间体的任何组合组合在一 起。 [0259] 2.1微管缬氨酸中间体 [0260] 2.1.1第一组实施方案 [0261] 在第一组实施方案中，提供了用于制备两种对映异构的微管缬氨酸中间体的混合 物或包含该混合物或基本上由该混合物组成的组合物的方法，所述中间体各自任选地为盐 形式，由式AB表示： [0262] [0263] 式中，环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 64 CN 111601803 A 说　明　书 48/185 页 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团，具体地R1-OC(＝O)-是BOC；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不 饱和C3-C8烃基、任选取代的C3-C8碳环基、或任选取代的C3-C 68杂烃基；R 是任选取代的饱和 C1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的 不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯 基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [0264] 所述方法包括以下步骤： [0265] 在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂的存在下，特别是包含选自Cu (II)、Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中，使任 选地盐形式的式A的微管缬氨酸中间体： [0266] [0267] 与具有结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物接触，以形成对映异构的式AB 的混合物或其组合物， [0268] 其中式A和B的可变基团如式AB所定义， [0269] 在该方法的上下文中，合适的极性非质子溶剂允许式A的微管缬氨酸中间体、式B 的氨基甲酸酯化合物和过渡金属催化剂充分溶解，以使式B的氨基甲酸酯化合物通过氨基 甲酸酯氮杂-迈克尔共轭加成到式A的微管缬氨酸中间体，提供式AB微管缬氨酸中间体的对 映异构体混合物。不受理论的束缚，包含过渡金属的催化剂的优选抗衡阴离子有助于其溶 解，同时与过渡金属(II)或过渡金属(III)的结合足够弱，从而可以与式A的微管缬氨酸中 间体和/或式B的氨基甲酸酯化合物络合用于活化，以促进共轭加成以形成式AB微管缬氨酸 中间体的对映异构体混合物或其组合物。为此，构成包含过渡金属(II)或过渡金属(III)的 催化剂的优选抗衡阴离子为-OTf、-SbF5或–Cl，更优选–OTf。因此，优选的过渡金属催化剂 包含Cu(OTf)2或Yb(OTf)3，更优选Cu(OTf)2。优选的极性非质子溶剂由于其自身与过渡金属 的相互作用，不会通过使过渡金属与反应物竞争而不适当地干扰该络合。为此，优选的极性 非质子溶剂是二氯甲烷(CH2Cl2)。在优选的实施方案中，R3是甲基，乙基或丙基，R6是未取代 的饱和C1-C6烃基，具体是甲基、乙基或异丙基。在优选的实施方案中，–OR7的羧酸保护基团 可以在不导致任何可察觉的R1-OC(＝O)-氮保护基团的去除的条件下被水解试剂去除。在 其他实施方案中，选择R1以便在需要时在酸性条件下除去R1-OC(＝O)-氮保护基团，通过弱 亲核碱性胺或在Pd或Pt催化剂存在下，而没有可察觉或不希望的其他官能团和/或保护基 的损失，这些基团可能存在于、或随后引入通过本发明的其他方法制备或涉及的化合物或 其中间体。 [0270] 在一些实施方案中，所述方法进一步包括分离式AB的两种对映异构体的步骤，所 述两种对映异构体各自任选地呈盐形式，以获得在被R6取代的碳原子上具有(R)-构型的对 映异构体，有时表示为(R)-式AB，基本上没有其他对映异构体，这些其他对映异构体有时表 示为(S)-式AB。在其他实施方案中，式AB的微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物或其组 合物在本文所述的制备微管缬氨酸化合物的方法的后续步骤中继续进行。 65 CN 111601803 A 说　明　书 49/185 页 [0271] 在前述实施方案的任一个中，式A和式AB微管缬氨酸中间体(任选地是盐形式)的 环状Ar部分是C5  1 ,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代，包括但不限于，噻唑、异噁唑、吡 唑或咪唑相关的C5  1,3-杂亚芳基作为母体杂环，优选噻唑和噁唑，更优选噻唑。因此，本文 提供的其他实施方案是制备由以下结构表示的式AB微管缬氨酸中间体的混合物，或者包含 这些中间体或基本上由这些中间体组成的组合物的方法： [0272] [0273] 所述中间体各自任选地是盐形式， [0274] 所述方法包括：具有以下结构的式A微管缬氨酸中间体： [0275] [0276] 任选地是盐形式，其中在这些结构的每一个中，X1是＝N-且X2是S、O或N(RX2)-，或 者X1是＝C(RX1)-且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的C1-C4烃基，优选 选自：–H、-CH3和–CH2CH3， [0277] 氨基甲酸酯氮杂-迈克尔共轭加成至具有R3NHC(O)OR1结构的式B氨基甲酸酯化合 物；其中的可变基团保留了它们在先前式A和式B中的含义。在优选的实施方案中，环状芳基 是噻唑-1,3-二基。 [0278] 在更优选的实施方案中，式A微管缬氨酸中间体和式B氨基甲酸酯化合物分别具有 以下结构： [0279] [0280] 因此由过渡金属催化的氨基甲酸酯氮杂迈克尔反应获得的式AB组合物包含以下 结构的对映异构体混合物或基本上由其组成： [0281] [0282] 所述对映异构体各自任选地是盐形式，其中R3、R6和R7如先前式A和式B中所定义， 并且优选独立地是C1-C4饱和烃基。 [0283] 在尤其优选的实施方案中，如此制备的式AB组合物包含以下结构表示的对映异构 体的混合物或基本上由其组成： [0284] [0285] 2.2微管缬氨酸化合物 66 CN 111601803 A 说　明　书 50/185 页 [0286] 2.2.1第2组实施方案 [0287] 在第二组实施方案中，提供了用于制备具有以下结构的微管缬氨酸化合物，或包 含该化合物或基本上由该化合物组成的组合物的方法： [0288] [0289] 所述化合物任选地是盐形式，其具有(1R,3R)-构型，有时称为(R,R)-式1a，其中R6 和羟基官能团均为R-构型，其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其 余位置任选地被取代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或者其他部分， 使得R1-OC(＝O)-是合适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和 C 63-C8烃基、任选取代的C3-C8碳环基或任选取代的C3-C8杂烃基；R 是任选取代的饱和C1-C8烃 基或任选取代的不饱和C3-C8烃基；R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3- C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取 代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳 基、任选取代的C3-C20杂环基、或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [0290] 所述方法包括以下步骤： [0291] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂的存在下，特别是包含选自Cu (II)、Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中，使式A 的微管缬氨酸中间体： [0292] [0293] 与具有结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物接触，以形成对映异构的微管 缬氨酸中间体的混合物，所述中间体各自任选地是盐形式，或包含该混合物或基本上由该 混合物组成的组合物，由式AB表示： [0294] 和 [0295] (b)使对映异构的式AB微管缬氨酸中间体，或包含这些中间体或其盐或者基本上 由这些中间体或其盐组成的组合物，与合适的还原剂，尤其是手性还原剂接触，以形成两种 微管缬氨酸非对映异构体的混合物，所述非对映异构体各自任选地是盐形式，或者包含该 混合物或基本上由该混合物组成的组合物，由式R-1a的结构表示： [0296] [0297] 所述结构表明羟基官能团是R-构型，并且式A、B、AB和R-1a中的其他可变基团如 (R,R)-式1a所定义。 [0298] 合适的还原剂将包含通常用于酮还原的氢供体，优选与期望保持的酯、酰胺和氨 67 CN 111601803 A 说　明　书 51/185 页 基甲酸酯官能团相容的氢供体。为此目的，合适的还原剂将优选为硼氢供体，包括但不限于 氢硼烷和硼氢化物碱金属盐，更优选硼氢供体为BH3，优选与配体络合。由于酮还原而引入 新的手性中心，通常期望包含两种非对映异构体及其对映异构体杂质的混合物的组合物， 并且相对于组合物中光学异构体的总量，该组合物将包含可变量的(R,R)-式1a非对映异构 体。因此，在更优选的实施方案中，选择手性配体与BH3络合，以便主要提供非对映异构体混 合物，或者其组合物，由(1R,3R)-和(1R,3S)-式1a表示，有时分别表示为(R,R)-和(R,S)-式 1a。出于该目的，用于与BH3络合的特别优选的手性配体通常称为(S)-(-)-CBS配体，具有以 下结构： [0299] [0300] 其中，R是–H、C1-C6饱和烃基或任选取代的苯基，优选甲基、丁基、苯基、4-甲基苯 基、4-氟苯基、4-三氟甲基-苯基、3,5-二氟苯基、3,4,5-三氟苯基或2,4,6-三氟苯基，尤其 优选甲基。用于选择合适的(S)-(-)-CBS配体，以在连接的巯基官能团的碳原子上实现具有 所需的立体化学结果的还原的方法一般地参见Korenaga ,T .等人，J .C .S .Chem .Comm . (2010)46:8624-8626。 [0301] 步骤(b)优选在甲苯或弱配位的极性非质子溶剂中进行，例如CH2Cl2、THF或二噁 烷，或CH2Cl2/THF或CH2Cl2/二噁烷的混合物，包括在约-10℃至约4℃，优选约-4℃至约0℃ 的温度下，将BH3-SMe2的溶液与(S)-(-)-CBS配体的溶液混合，保持约5分钟至约30分钟，优 选约15分钟至约10分钟，以形成所需的手性还原剂，然后将手性还原剂冷却至约-20℃至 约-50℃，优选约–40℃，随后加入式AB微管缬氨酸中间体混合物的溶液，通式基本上保持手 性还原剂的原始温度，然后搅拌所得反应混合物直至对映异构体式AB微管缬氨酸中间体的 消耗基本完全。优选地，手性还原剂的摩尔过量在约5％至约10％之间用于实现该消耗。 [0302] 式A和式B中以及因此式AB和式R-1a中的可变基团的优选取代基，以及该方法的其 他优选试剂如对于上述第一组实施方案所述。 [0303] 在一些实施方案中，该方法进一步包括以下步骤：分离式AB的对映异构体以获得 在R6取代的碳原子处具有(R)-构型的对映异构体，任选地是盐形式，表示为(R)-式AB，基本 上没有其他对映异构体，这些其他对映异构体表示为(S)-式AB。在其他实施方案中，式AB微 管缬氨酸中间体的对映异构体混合物或其组合物被带入步骤(b)中，式R-1a微管缬氨酸中 间体混合物或其组合物含有(1R,3R)-构型的非对映异构体(其有时称为(R,R)-式1a，其中 被R6取代的碳原子处于(R)-构型并且被–OH取代的碳原子处于(R)-构型)，与具有(1R,3S)- 构型的非对映异构体(有时称为(R,S)-式1a，其中被R6取代的碳原子处于(S)-构型并且被– OH取代的碳原子处于(R)-构型)分离，以提供(R,R)-式1a非对映异构体是主要的光学异构 体的组合物。在那些实施方案中，如果组合物中存在光学杂质，则主要的光学异构体杂质优 选是该非对映异构体的对映异构体，有时称为(S,S)-式1a，其可变基团与(R,R)-式1a所述 相同，具有以下结构： 68 CN 111601803 A 说　明　书 52/185 页 [0304] [0305] 在优选的实施方案中，进行步骤(b)所述包含式AB表示的微管缬氨酸中间体的对 映异构体混合物或基本上由其组成的组合物的手性还原，以提供包含(R,R)-和(R,S)-式1a 微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物或基本上由其组成的组合物，尤其是与(S,S)-, (S,R)-,(R,R)-和(R,S)-式1a光学异构体的总量相比，两种非对映异构体各自的(S,S)-和 (S,R)-式1a对映异构体合并的重量等于或小于10重量％，等于或小于5重量％，等于或小于 3重量％。在其他优选的实施方案中，在式AB表示的对映异构体混合物、或包含该化合物或 基本上由该化合物组成的组合物进行步骤(b)(有时也表示为步骤(b’))的手性还原后分离 两种非对映异构体，提供了包含所需的(R,R)-式1a微管缬氨酸非对映异构体或基本上由其 组成的组合物，相对于(R,S)-式1a非对映异构体光学杂质，非对映异构体过量(d.e.)至少 80％、90％、95％或97％，或者基本上不含非对映异构体并且包含不超过约5重量％、约3重 量％的其他式1a光学杂质，或者所需的(R,R)-式1a微管缬氨酸非对映异构体的组合物包含 约1.5重量％的(S,S)-式1a对映异构体光学杂质并且相对于组合物中光学异构体的总量， 具有(S,R)-和(R,S)-式1a结构的其他光学杂质的合并的量小于约3重量％、约1％重量％或 约0.5％重量％。 [0306] 在尤其优选的实施方案中，步骤(b)的手性还原之后，在步骤(b’)中通过色谱分离 非对映异构体，提供了包含所需的(R,R)-式1a微管缬氨酸非对映异构体或基本上由其组成 的组合物，相对于组合物中存在的光学异构体的总量，结构(S,S)-式1a的对映异构体光学 杂质不超过约3％重量％或约1.5％重量％，其中R6是S-构型并且羟基的立体化学反转为S- 构型的式R-1a的结构，并且基本上不含结构(S,R)-和(R,S)-式1a的其他光学杂质。 [0307] 在前述第二组实施方案中的任一个中，式A和式AB微管缬氨酸中间体和式R-1a微 管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)的环状Ar部分是C5杂亚芳基，包括但不限于，噻唑、异噁 唑、吡唑或咪唑相关的C5杂亚芳基作为母体杂环，优选噻唑和异噁唑，更优选噻唑。因此，本 文提供的优选实施方案是制备具有以下结构的(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物，任选地是盐 形式，或包含该化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [0308] [0309] 通过具有以下结构的式AB微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物或包含这些对 映异构体或基本上由这些对映异构体组成的组合物制备得到，所对映异构体各自任选地是 盐形式： [0310] [0311] 上述结构又是通过具有以下结构的式A的微管缬氨酸中间体： 69 CN 111601803 A 说　明　书 53/185 页 [0312] [0313] 其中在这些结构的每一个中，X1是＝N-且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-且X2 是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的C1-C4烃基，优选选自：–H、-CH3和– CH2CH3， [0314] 与结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物进行过渡金属催化的氮杂迈克尔共 轭加成制备得到；其中的可变基团保留了它们在先前式A、B和AB以及R-1a光学异构体中的 含义。在优选的实施方案中，环状芳基是噻唑-1,3-二基。 [0315] 在更优选的实施方案中，式A微管缬氨酸中间体和式B氨基甲酸酯化合物分别具有 以下结构： [0316] [0317] 因此步骤(a)的由过渡金属催化的氨基甲酸酯氮杂迈克尔反应获得的式AB组合物 是以下结构的对映异构体的混合物： [0318] [0319] 并且步骤(b)的手性还原组合物包含式R-1a的两种非对映异构体的混合物或基本 上由其组成： [0320] [0321] 其中，(R,R)-和(R,S)-式1a微管缬氨酸非对映异构体一起是主要的光学异构体， 并且其中R3、R6和R7如前所述，优选独立地选自C1-C4饱和烃基。 [0322] 在分离步骤(b)获得的非对映异构体之后，所得组合物中(R,R)-式1a非对映异构 体是主要的光学异构体，如果存在光学杂质，则主要的光学异构体杂质优选是其对映异构 体，即具有以下结构的(S,S)-式1a光学异构体： [0323] [0324] 在尤其优选的实施方案中，步骤(a)的式AB组合物包含以下结构表示的对映异构 体的混合物或基本上由其组成，或者包含该混合物或基本上由其组成的组合物： [0325] 70 CN 111601803 A 说　明　书 54/185 页 [0326] 并且来自步骤(b)的式R-1a非对映异构体组合物在没有事先分离式AB对映异构体 前体之前，包含以下结构表示的两种微管缬氨酸非对映异构体化合物的混合物或基本上由 其组成： [0327] [0328] 并且其相应的(R,S)-非对映异构体具有以下结构： [0329] [0330] 在其他特别优选的实施方案中，从步骤(b)获得的组合物分离非对映异构体，其中 (R,R)-非对映异构体(即2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)-氨基)-1-羟基-4-甲基戊 基)噻唑-4-羧酸乙酯或2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)-(丙基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊 基)噻唑-4-羧酸乙酯)，提供了(R,R)-非对映异构体或其组合物，基本上不含其相应的(R, S)-非对映异构体，其中，如果存在光学杂质，则相应的(R,R)-非对映异构体的(S,S)-对映 异构体是优选的主要的光学异构体杂质，具有以下结构： [0331] [0332] 在尤其优选的实施方案中，来自步骤(b)的手性还原组合物在分离(R,R)-和(R, S)-非对映异构体之前，相对于组合物中光学异构体的总量，包含不超过约5％、约3％、约 1.5％或约1％w/w的(S,S)-式1a光学杂质以及小于约5％、约3％、约1.5％或约1％w/w的其 他光学杂质(其具有结构(S,R)-式1a)，其中，所述主要的光学异构体是2-((1R ,3R)-和2 ((1R,3S)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻唑-4-羧酸乙酯以及2- ((1R,3R)-和2-((1R,3S)-3-((叔丁氧基羰基)(丙基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻唑-4- 羧酸乙酯。 [0333] 在其他特别优选的实施方案中，手性还原后色谱分离(R,R)-和(R,S)-式1a非对映 异构体提供了基本上由所需的(R,R)-式1a非对映异构体组成的组合物，其中，相对于组合 物中光学异构体的总量，(R,S)-式1a非对映异构体杂质和其他光学杂质(即具有结构(S, S)-式1a和(S,R)-式1a的合并的量不超过约3重量％或约1.5重量％，其中主要的光学异构 体是2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)-(甲基)-氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)-噻唑-4-羧酸 乙酯或2-((1R ,3R)-或2-((1R ,3R)-3-((叔丁氧基羰基)-(丙基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊 基)-噻唑-4-羧酸乙酯，或者基本上不含(R,S)-和(S,R)-式1a光学杂质。 [0334] 2.2.2第3组实施方案 [0335] 在第三组实施方案中，提供了用于制备具有以下结构的(1R,2R)-构型的式2微管 71 CN 111601803 A 说　明　书 55/185 页 缬氨酸化合物，任选地是盐形式，有时表示为(R,R)-式2，或包含该中间体或基本上由该中 间体组成的组合物的方法： [0336] [0337] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或者其他部分，使得R1-OC(＝O)-是 合适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代 的C3-C8碳环基或任选取代的C3-C8杂烃基；R6是任选取代的饱和C1-C8烃基或任选取代的不 饱和C3-C8烃基，所述方法包括以下步骤： [0338] (a)使式A的微管缬氨酸中间体： [0339] [0340] 或包含该中间体或基本上由该中间体组成的组合物，所述中间体任选地是盐形 式，其中R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20 杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代 的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20杂环 基、或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [0341] 与具有结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物在合适的过渡金属(II)或过渡 金属(III)催化剂的存在下，特别是包含选自Cu(II)、Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化 剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中，进行接触，以形成对映异构的微管缬氨酸中间体 的混合物，所述中间体各自任选地是盐形式，或包含该混合物或基本上由该混合物组成的 组合物，由式AB表示： [0342] 和 [0343] (b)使对映异构的式AB微管缬氨酸中间体，或包含这些中间体或基本上由这些中 间体组成的组合物，所述中间体各自任选地是盐形式，与合适的还原剂，尤其是手性还原剂 接触，使得步骤(b)的手性还原得到的式R-1a组合物包含两种微管缬氨酸非对映异构体化 合物的混合物或基本上由其组成，所述化合物各自任选地是盐形式，由以下结构表示： [0344] [0345] 其中，(1R,3R)-和(1R,3S)-式1a微管缬氨酸非对映异构体，有时称为(R,R)-和(R, S)-式1a，一起是主要的光学异构体；以及 [0346] (c)使式1a微管缬氨酸非对映异构体，或包含这些非对映异构体或基本上由这些 非对映异构体组成的组合物，所述非对映异构体各自任选地是盐形式，与合适的水解试剂 72 CN 111601803 A 说　明　书 56/185 页 接触，以形成具有以下结构的式R-2微管缬氨酸非对映异构体的混合物： [0347] [0348] 或包含这些非对映异构体或基本上由这些非对映异构体组成的组合物，所述非对 映异构体各自任选地是盐形式，其中，(1R,3R)-和(1R,3S)式2微管缬氨酸非对映异构体(有 时称为(R,R)-和(R,S)-式2)一起是主要的光学异构体，其中，式A、B和AB以及式R-1a及其关 系异构体的其余可变基团如(R,R)-式2所定义。 [0349] 在更优选的实施方案中，合适的水解试剂能够在不会导致任何可察觉的R1-OC(＝ O)-氮原子保护基团去除的条件下去除-OR7提供的羧酸保护基团，例如碱金属氢氧化物盐 的溶液，包括但不限于LiOH一水合物水溶液，在约-10℃至约10℃，优选约-4℃至约5℃，更 优选约0℃。在那些优选的实施方案中，R7优选是甲基或乙基。 [0350] 式A和式B以及式AB，式R-1a，(R,R)-式2及其相应的光学异构体中的可变基团的其 他优选取代基以及该方法的其他优选试剂和条件如针对第一和第二组实施方案描述的那 样。 [0351] 在一些实施方案中，该方法进一步包括分离式AB的对映异构体的步骤以获得在R6 取代的碳原子上具有(R)-构型的对映异构体，有时称为(R)-式AB，基本上不含其它对映异 构体，这些其他对映异构体表示为(S)-式AB。 [0352] 在优选的实施方案中，式AB微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物或其组合物被 带入步骤(b)，制备得到的含有(1R,3R)-构型的非对映异构体的式R-1a微管缬氨酸化合物 (其有时称为(R,R)-式1a，其中被R6取代的碳原子处于(R)-构型并且被–OH取代的碳原子处 于(R)-构型)，与具有(1R,3S)-构型的非对映异构体(其有时称为(R,S)-式1a，其中被R6取 代的碳原子处于(S)-构型并且被–OH取代的碳原子处于(R)-构型)分离。在优选的实施方案 中，该分离过程(有时被称为步骤(b’))提供了具有(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物的组合 物，相对于其具有(R ,S)-式1a结构的非对映异构体，该非对映异构体过量(d .e .)至少约 85％、约90％、约95％或约97％，或者基本上不含(R,S)-式1a非对映异构体。在其他优选的 实施方案中，非对映异构体分离得到的组合物是(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物，相对于(R, S)-式1a非对映异构体，该非对映异构体过量(d.e.)至少约95％或约97％，或者基本上不含 (R,S)-式1a非对映异构体，并且如果存在光学杂质，优选(S,S)-式1a光学异构体(其是主要 的光学异构体(R,R)-式1a的对映异构体)作为主要的光学杂质。 [0353] 在其他实施方案中，延迟非对映异构体的分离直至步骤(c)之后，以提供(R,R)-式 2微管缬氨酸化合物，相对于(R,S)-式2结构的非对映异构体，该d.e.至少约85％、约90％、 约95％或约97％，或者基本上不含(R,S)-式2结构的非对映异构体，其中，延迟分离有时称 为步骤(c’)。在优选的实施方案中，非对映异构体分离得到的组合物是(R,R)-式2微管缬氨 酸中间体，相对于(R,S)-式2非对映异构体，该非对映异构体过量(d.e .)至少约95％或约 97％，或者基本上不含(R,S)-式2非对映异构体，具有(S,S)-式2光学异构体作为主要的光 学杂质，如果存在光学杂质的话，其是(R,R)-式2结构的主要的光学异构体的对映异构体。 [0354] 在更优选的实施方案中，在步骤(b)中进行式AB对映异构体的手性还原，以提供包 含(R,R)-式1a和(R,S)-式1a微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物或基本上由其组成 73 CN 111601803 A 说　明　书 57/185 页 的组合物，相对于组合物中式1a光学异构体的总量，其各自的(1S,3S)-式1a和(1S,3R)-式 1a对映异构体(有时分别称为(S,S)-和(S,R)-式1a)的总量不超过约10％或更小、约5％或 更小或约3％或更小。在其他优选的实施方案中，不存在步骤(b)之后的非对映异构体分离， 或者不存在步骤(b)和步骤(c)之后的分离并且结合步骤(b)的手性还原，提供了包含(R, R)-和(R,S)-式1a或(R,R)-和(R,S)-式2非对映异构体或基本上由其组成的组合物，并且对 映异构的(S,S)-式1a或(S ,S)-式2光学杂质不超过约5重量％、约3％重量％或约1.5重 量％，相对于组合物中光学异构体的总重量，其他(R,S)-式1a或(R,S)-式2光学杂质不超过 约5重量％、约3％重量％或约1.5重量％，其中，(R,R)-和(R,S)-式1a非对映异构体一起或 (R,R)-和(R,S)-式2非对映异构体一起是主要的光学异构体。 [0355] 在其他优选的实施方案中，步骤(b)手性还原后或步骤(b)手性还原和步骤(c)水 解后分离非对映异构体，以提供(R,R)-式1a或(R,R)-式2光学异构体的组合物，其中，相对 于组合物中光学异构体的总重量，其他(S,R)-和(R,S)-式1a或(S,R)-和(R,S)-式2光学杂 质的合并的量小于约3重量％、约1％重量％或约0.5重量％，其中(R,R)-式1a或(R,R)-式2 是主要的光学异构体。 [0356] 在尤其优选的实施方案中，步骤(b)的手性还原并且不存在非对映异构体分离之 后获得的式R-1a组合物中的非对映异构体混合物基本上保留式R-2组合物，其是步骤(c)的 水解步骤得到的，由此分离(R,R)-和(S,R)-式2非对映异构体以提供包含基本上由(R,R)- 式2微管缬氨酸化合物组成的组合物，基本上不含相应的(R,S)-式2非对映异构体。 [0357] 在其他特别优选的实施方案中，步骤(b)的手性还原获得的式R-1a组合物进行对 映异构体分离(有时称为(b’))，以提供包含(R,R)-式1a非对映异构体或基本上由其组成的 组合物，基本上不含相应的(R,S)-式1a非对映异构体，并且步骤(c)的水解获得的后续(R, R)-式2非对映异构体基本上保留该非对映异构体纯度。 [0358] 在尤其优选的实施方案中，步骤(b)的手性还原之后在步骤(b’)中进行非对映异 构体的色谱分离，以提供所需的(R,R)-式1a微管缬氨酸非对映异构体的组合物，相对于存 在的式1a光学异构体的总重量，结构(S,S)-式1a的对映异构的光学杂质不超过约5重量％、 约3重量％、或约1.5重量％，并且基本上不含其它(S,R)-和(R,S)-式1a光学杂质，其中，组 合物中(S,S)-,(S,R)-和(R,S)-式1a光学杂质的相对量在步骤(c)的水解获得的式R-2组合 物中基本上保留。 [0359] 在前述第三组实施方案的任一种情况下，式A和式AB微管缬氨酸中间体以及(R , R)-式1a和(R,R)-式2微管缬氨酸化合物及其光学异构体(各自任选地是盐形式)的环状Ar 部分是C5杂亚芳基，包括但不限于噻唑、异噁唑、吡唑或咪唑相关的C5杂亚芳基作为母体杂 环。因此，本文提供的其它实施方案是制备具有以下结构的(R,R)-式2微管缬氨酸化合物， 任选地是盐形式，或包含该化合物或基本上由该化合物组成的组合物的方法： [0360] [0361] 通过具有以下结构的微管缬氨酸非对映异构体的混合物、或包含这些非对映异构 体或基本上由这些非对映异构体组成的组合物制备得到，所述非对映异构体各自任选地是 盐形式： 74 CN 111601803 A 说　明　书 58/185 页 [0362] [0363] 其中，非对映异构的(R,R)-式1a和(R,S)-式1a微管缬氨酸化合物是主要的光学异 构体， [0364] 上述结构又是通过具有以下结构的式AB的微管缬氨酸中间体的对映异构体混合 物、或包含这些中间体或基本上由这些中间体组成的组合物制备得到，所述中间体各自任 选地是盐形式： [0365] [0366] 上述结构又是通过具有以下结构的式A的微管缬氨酸中间体： [0367] [0368] 其任选地是盐形式，其中在这些结构的每一个中，X1是＝N-且X2是S、O或N(RX2)-， 或X1是＝C(RX1)-且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的C1-C4烃基，优选 选自–H、-CH3和–CH2CH3， [0369] 与结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物通过过渡金属催化的氮杂-迈克尔 共轭加成制备得到；其中，其余的可变基团保留式A,B,AB以及式R-1a ,和(R,R)-式2及其光 学异构体中各自前述的含义。在优选的实施方案中，环状芳基是噻唑-1,3-二基。 [0370] 在更优选的实施方案中，式A微管缬氨酸中间体和式B氨基甲酸酯化合物分别具有 以下结构： [0371] [0372] 使得步骤(a)中过渡金属催化的氨基甲酸酯氮杂迈克尔反应得到的式AB组合物包 含以下结构表示的对映异构的微管缬氨酸中间体的混合物或基本上由其组成： [0373] [0374] 所述中间体各自任选地是盐形式，并且步骤(b)的手性还原得到的式R-1a组合物 包含以下结构表示的两种非对映异构体的混合物或基本上其组成： [0375] [0376] 所述非对映异构体各自任选地是盐形式，其中，(R,R)-式1a和(R,S)-式1a非对映 异构体一起是主要的光学异构体，并且 75 CN 111601803 A 说　明　书 59/185 页 [0377] 水解步骤(c)得到的式R-2组合物包含以下结构表示的两种非对映异构体的混合 物或基本上由其组成： [0378] [0379] 所述非对映异构体各自任选地是盐形式，其中，(R,R)-式2和(R,S)-式2非对映异 构体一起是主要的光学异构体，其中R3、R6和R7如前所述，优选独立地选自C1-C4饱和烃基。 [0380] 在尤其优选的实施方案中，步骤(a)得到的式AB微管缬氨酸中间体组合物包含以 下结构表示的对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0381] [0382] 并且不存在步骤(b’)的非对映异构体分离情况下步骤(b)得到的式R-1a组合物包 含以下结构作为主要的光学异构体的(R,R)-式1a和(R,S)-式1a非对映异构体的混合物或 基本上由其组成： [0383] [0384] 并且步骤(b)后不存在步骤(b’)的非对映异构体分离以及步骤(c)之后不存在步 骤(c’)的非对映异构体分离的情况下步骤(c)之后的式R-2组合物包含以下结构的(R,R)- 式2和(R,S)-式2非对映异构体的混合物或基本上由其组成，它们各自任选地是盐形式，作 为主要的光学异构体： [0385] [0386] [0387] 在其他特别优选的实施方案中，在步骤(b’)中进行(R,R)-和(R,S)-式1a非对映异 构体分离以提供包含以下结构作为主要的光学异构体的(R,R)-式1a非对映异构体或基本 上由其组成的组合物： 76 CN 111601803 A 说　明　书 60/185 页 [0388] [0389] 并且如果存在光学杂质，优选具有该主要的非对映异构体的对映异构体作为主要 的光学异构体杂质，其中所述对映异构体具有以下结构： [0390] [0391] 并且步骤(b)得到的非对映异构体产物经过步骤(b’)分离得到的(R,R)-式1a非对 映异构体或其组合物在步骤(c)中水解之后的式2的组合物提供的组合物包含以下结构作 为主要的光学异构体的(R,R)-式2非对映异构体或基本上由其组成： [0392] [0393] 其任选地是盐形式。 [0394] 2.2.3第4组实施方案 [0395] 在第四组实施方案中，提供了制备具有以下结构的(1R,3R)-构型的式2a的微管缬 氨酸化合物、或包含该化合物或基本上由该化合物组成的组合物的方法： [0396] [0397] 所述化合物任选地是盐形式，有时称为(R,R)-式2a，其中：环状Ar是1,3-亚苯基、 或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代； [0398] R2B是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯 基或任选取代的C2-C8炔基；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部 分，使得R1-OC(＝O)-是合适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不 饱和C3-C8烃基、任选取代的C3-C8碳环基或任选取代的C3-C8杂烃基；R6是任选取代的饱和C1- C8烃基或任选取代的不饱和C13-C8烃基， [0399] 所述方法包括以下步骤： [0400] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂的存在下，特别是包含选自Cu (II)、Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中，使式A 的微管缬氨酸中间体： 77 CN 111601803 A 说　明　书 61/185 页 [0401] [0402] 任选地是盐形式，其中R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20 烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代 的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、 任选取代的C3-C20杂环基、或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [0403] 与结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物接触， [0404] 以形成式AB表示的两种微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物： [0405] [0406] 或包含这些中间体或基本上由这些中间体组成的组合物，所述中间体各自任选地 是盐形式； [0407] (b)使对映异构的式AB微管缬氨酸中间体，或包含该这些中间体或其盐或基本上 由这些中间体或其盐构成获得组合物，与合适的还原剂接触，以形成以下结构式R-1a表示 的微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物： [0408] [0409] 或包含这些非对映异构体或基本上由这些对映异构体组成的组合物，所述非对映 异构体各自任选地是盐形式；以及 [0410] 具体地，所述还原剂是手性还原剂，得到包含这些非对映异构体的组合物，其中 (1R,3R)-和(1R,3S)-式1a微管缬氨酸非对映异构体(有时称为(R,R)-和(R,S)-式1a)一起 是主要的光学异构体， [0411] 其中，(R,R)-式1a具有以下结构： [0412] [0413] 其中，(R,S)-式1a具有以下结构： [0414] [0415] (b’)任选地分离步骤(b)得到的非对映异构体，以提供(R,R)-式1a的非对映异构 体(任选地是盐形式)，或包含该非对映异构体(任选地是盐形式)或基本上由其组成的组合 物，基本上不含其它非对映异构体(即(R,S)-式1a)； [0416] (c)使步骤(b)得到的式R-1a微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)或其组合物与 78 CN 111601803 A 说　明　书 62/185 页 合适的水解试剂接触，以形成以下结构式R-2表示的微管缬氨酸化合物的非对映异构体混 合物： [0417] 以及 [0418] (c’)任选地分离步骤(c)的非对映异构体，或使步骤(b’)得到的(R,R)-式1a微管 缬氨酸化合物(任选地是盐形式)或其组合物与合适的水解试剂接触， [0419] 由此步骤(b’)和(c)、或步骤(b)和(c’)提供了具有以下结构的相应的非对映异构 体： [0420] [0421] 任选地是盐形式，其具有(1R,3R)-构型，有时称为(R,R)-式2，或者包含该非对映 异构体或其盐或由该对映异构体或其盐组成的组合物，其中(R,R)-式2是主要的光学异构 体，其中来自步骤(b’)的(R,R)-式1a的相应的组合物的光学纯度在(R,R)-式2组合物中基 本上保留；以及 [0422] (d)使来自步骤(c)的式R-2组合物与合适的酰化剂接触以形成式R-2a组合物，或 者使来自步骤(b’)和(c)或步骤(b)和(c’)的包含(R,R)-式2a表示的非对映异构体或基本 上由其组成(任选地是盐形式)的微管缬氨酸化合物与合适的酰化剂接触，其中，来自步骤 (b’)的相应的(R,R)-式1a的光学纯度或来自步骤(b’)和(c)或步骤(b)和(c’)的(R,R)-式2 光学异构体的光学纯度在(R,R)-式2a组合物中基本上保留，其中，式A、B、AB以及式R-1a和 (R,R)-式2及其光学异构体的其他可变基团如(R,R)-式2a的定义，以及不存在步骤(c’)和 (d’)的非对映异构体分离；以及 [0423] (d’)任选地不存在步骤(b’)的非对映异构体分离和(c’)分离式R-2a非对映异构 体以提供(R,R)-式2a(任选地是盐形式)，或包含该化合物作为主要的光学异构体或基本上 由该化合物组成的组合物。 [0424] 在优选的实施方案中，步骤(d)的酰化剂具有结构R2BC(O)Cl或[R2BC(O)]2O，其中 R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C8烃基、C2-C8烯基或C2-C4炔基。在那些优选的实施方案中， R2B更优选是支链、任选取代的C3-C8饱和或不饱和烃基，优选未取代，包括但不限于–CH (CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH＝C(CH3)2和-CH2-C(CH3)＝CH2。 [0425] 在其他优选的实施方案中，式2a中的R2B是-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH2CH＝ CH2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH3)＝CH2、-CH＝CH2或-CHC≡CH，尤其是–CH3。 [0426] 式A和式B中、以及式AB和式R-1a、(R,R)-式2和(R,R)-式2a及其相应的光学异构体 的其他可变基团的优选取代基，以及该方法的其他优选反应试剂和条件参见第一组、第二 组和第三组实施方案中所述。 [0427] 在更优选的实施方案中，步骤(b)中进行式AB对映异构体的手性还原，以提供包含 (R,R)-式1a和(R,S)-式1a微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)的非对映异构体混合物或 基本上由其组成的组合物，具体地，相对于组合物中式1a光学异构体的总量，它们相应的 79 CN 111601803 A 说　明　书 63/185 页 (S ,S)-和(S,R)-式1a对映异构体为约10重量％、约5重量％、约3重量％或更小、或1.5重 量％。在其他优选的实施方案中，步骤(b’)的非对映异构体分离提供了结构(R,R)-式1a的 非对映异构体的组合物，相对于结构(R ,S)-式1a的非对映异构体，该非对映异构体过量 (d.e.)至少约90％、至少约95％、或至少约97％，或者基本上不含(R,S)-式1a非对映异构 体。在其他更优选的实施方案中，步骤(b’)之后获得的(R,R)-式1a组合物中的非对映异构 体过量分别在步骤(c)的水解和步骤(d)的酰化步骤获得的(R,R)-式2a组合物中基本上保 留。 [0428] 在尤其优选的实施方案中，步骤(b’)的非对映异构体分离提供了具有(R,R)-式1a 非对映异构体的组合物，相对于(R,S)-式1a非对映异构体，非对映异构体过量至少约90％ 至约95％、或至少约97％，并且(S,S)-式1a(其是结构(R,R)-式1a的主要的非对映异构体的 对映异构体)是主要的光学杂质。 [0429] 在其他实施方案中，步骤(b’)的非对映异构体分离被步骤(c)或步骤(d)之后的非 对映异构体分离代替，有时分别称为步骤(c’)和步骤(d’)，以提供(R,R)-式2或(R,R)-式2a 光学异构体(任选地是盐形式)或其组合物，基本上不含其相应的(R,S)-式2a或(R,S)-式2a 非对映异构体。 [0430] 在上述第四组实施方案的任一种情况下，式A和式AB微管缬氨酸中间体以及(R , R)-式1a、(R,R)-式2和(R,R)-式2a微管缬氨酸化合物及其光学异构体(它们各自任选地是 盐形式)的环状Ar部分是C5杂亚芳基，包括但不限于,噻唑、异噁唑、吡唑或咪唑相关的C5杂 亚芳基作为母体杂环。因此，本文提供的其他实施方案是制备(R,R)-式2a微管缬氨酸化合 物，或包含该化合物或由该化合物组成的组合物的方法，所述化合物任选地是盐形式，具有 以下结构： [0431] [0432] 通过酰化具有以下结构的(R,R)-式2微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)： [0433] [0434] 或其组合物，基本上不含其相应的(R,S)-非对映异构体，任选地是盐形式， [0435] 上述结构又是通过分离以下结构表示的两种式R-1a微管缬氨酸非对映异构体的 混合物： [0436] [0437] 或包含这些非对映异构体或其盐或基本上由这些非对映异构体或其盐组成的组 合物，然后水解非对映异构体(R,R)-式1a或其组合物，基本上不含其它非对映异构体，即 (R,S)-式1a，任选地盐形式， [0438] 上述结构又是通过以下结构表示的两种式AB微管缬氨酸中间体的对映异构体混 80 CN 111601803 A 说　明　书 64/185 页 合物，或包含这些中间体或基本上由这些中间体组成的组合物制备得到的： [0439] [0440] 各自任选地是盐形式， [0441] 上述结构又是通过结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物与以下结构的式A 微管缬氨酸中间体(任选地是盐形式)发生氨基甲酸酯氮杂-迈克尔共轭加成制备得到： [0442] [0443] 其中在这些结构的每一个中，X1是＝N-且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-且X2 是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的C1-C4烃基，优选选自：–H、-CH3和– CH2CH3，式A、B和AB、以及(R,R)-式1a、(R,R)-式2和(R,R)-式2a及其相应的光学异构体的其 他可变基团保留(R,R)-式2a给出的含义。在优选的实施方案中，环状芳基是噻唑-1 ,3-二 基。 [0444] 在更优选的实施方案中，式A微管缬氨酸中间体和式B氨基甲酸酯化合物分别具有 以下结构： [0445] [0446] 因此步骤(a)的由过渡金属催化的氨基甲酸酯氮杂迈克尔反应获得的式AB组合物 包含以下结构表示的两种式AB对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0447] [0448] 以及步骤(b)的手性还原得到的式R-1a组合物包含以下结构表示的两种式R-1a非 对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0449] [0450] 以及步骤(c)的水解得到的式R-2组合物包含以下结构表示的两种非对映异构体 的混合物或基本上由其组成： [0451] [0452] 各自任选地是盐形式， [0453] 或者步骤(b)的手性还原得到的式R-1a组合物之后是步骤(b’)的分离非对映异构 体，以提供包含以下结构表示的(R,R)-式1a非对映异构体作为主要的光学异构体或基本上 81 CN 111601803 A 说　明　书 65/185 页 由其组成的组合物： [0454] [0455] 任选地是盐形式， [0456] 或者包含该非对映异构体或基本上由其组成的组合物，基本上不含其相应的(R, S)-式1a非对映异构体，任选地是盐形式，具有以下结构： [0457] [0458] 以及步骤(b’)之后步骤(c)的水解组合物提供了包含以下结构表示的非对映异构 体(R,R)-式2(任选地是盐形式)作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物： [0459] [0460] 或者包含该非对映异构体或由该对映异构体组成的组合物，基本上不含其相应的 (R,S)-式2非对映异构体，任选地是盐形式，具有以下结构： [0461] [0462] 以及不存在步骤(b’)的非对映异构体分离的情况下，步骤(b)手性还原和步骤(c) 水解之后步骤(d)的酰化组合物以提供包含以下结构表示的两种非对映异构体(各自任选 地是盐形式)的混合物或基本上由其组成的组合物： [0463] [0464] 或者步骤(b)手性还原、步骤(b’)非对映异构体分离和步骤(c)水解之后步骤(d) 的酰化组合物以提供具有以下结构的作为主要的光学异构体的(R,R)-式2a非对映异构体： [0465] [0466] 任选地是盐形式， [0467] 或者包含该非对映异构体或基本上由该非对映异构体组成的组合物，基本上不含 其相应的(R,S)-式2a非对映异构体，任选地是盐形式，具有以下结构： 82 CN 111601803 A 说　明　书 66/185 页 [0468] [0469] 其中，式A、B、AB、式R-1a、式R-2、以及(R,R)-式2及其相应的光学异构体的可变基 团保留它们在(R,R)-式2a中的含义，其中R3、R6和R7优选独立地选自C1-C4饱和烃基。 [0470] 在尤其优选的实施方案中，步骤(a)的式AB微管缬氨酸中间体组合物包含以下结 构表示的对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0471] [0472] 以及步骤(b)手性还原和步骤(b’)非对映异构体分离得到的R-1a微管缬氨酸化合 物组合物包含以下结构表示的(R,R)-式1a非对映异构体作为主要的光学异构体或基本上 由其组成的组合物： [0473] [0474] 或者包含(R,R)-式1a非对映异构体或基本上由其组成的组合物，基本上不含其相 应的(R,S)-式1a非对映异构体以及所述相应的非对映异构体的对映异构体(S,R)-式1a，它 们分别具有以下结构： [0475] [0476] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式1a光学异构体作为主要的光学杂质，具有以下 结构： [0477] 83 CN 111601803 A 说　明　书 67/185 页 [0478] 以及步骤(b)手性还原和步骤(b’)非对映异构体分离后步骤(c)水解得到的微管 缬氨酸组合物包含以下结构的(R,R)-式2微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)作为主要的 光学异构体或基本上由其组成： [0479] [0480] (BOC-脱乙酰-微管缬氨酸) [0481] 或者包含(R,R)-式2非对映异构体或基本上由其组成，基本上不含其相应的(R, S)-式2非对映异构体，任选地是盐形式，具有以下结构： [0482] [0483] 以及基本上不含该相应的非对映异构体的对映异构体，即(S,R)-式2，任选地是盐 形式，具有以下结构： [0484] [0485] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式2光学异构体(任选地是盐形式)作为主要的光 学杂质，具有以下结构： [0486] [0487] 以及步骤(b)手性还原、步骤(b’)非对映异构体分离和步骤(c)水解之后步骤(d) 得到的式R-2a微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式2a非对映异构体或基本上由其组成，任选地 是盐形式，作为主要的光学异构体，具有以下结构： [0488] [0489] 或者包含(R,R)-式2a非对映异构体或基本上由其组成，基本上不含其相应的(R, S)-式2a非对映异构体，任选地是盐形式，具有以下结构： 84 CN 111601803 A 说　明　书 68/185 页 [0490] [0491] 并且基本上不含其相应的非对映异构体的对映异构体，即(S,R)-式2a，任选地是 盐形式，具有以下结构： [0492] [0493] 并且如果存在光学杂质，优选地是(S,S)-式2a光学异构体(任选地是盐形式)作为 主要的光学杂质，其具有以下结构： [0494] [0495] 2.2.4第5组实施方案 [0496] 在第五组实施方案中，提供了制备具有以下结构的(1R,3R)-构型的式2b微管缬氨 酸化合物，或者包含该组合物或基本上由该组合物组成的组合物的方法： [0497] [0498] 所述化合物任选地是盐形式，有时称为(R,R)-式2b，其中：环状Ar是亚苯基、或5- 或6-元含氮杂亚芳基，其余位置任选地被取代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地 被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合适的保护基团；R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、 任选取代的不饱和C3-C6烃基或R2是R2A，其中R2A是–CH 2C 2C2R ，其中R 是任选取代的C1-C8醚或任 选取代的C2-C8醚；以及R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选 取代的C3-C8碳环基或任选取代的C3-C8杂烃基；以及R6是任选取代的饱和C1-C8烃基或任选 取代的不饱和C2-C8烃基， [0499] 所述方法包括以下步骤： [0500] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂的存在下，特别是包含选自Cu (II)、Zn(II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中，使式A 的微管缬氨酸中间体： [0501] [0502] 任选地是盐形式，其中R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20 85 CN 111601803 A 说　明　书 69/185 页 烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代 的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、 任选取代的C3-C20杂环基，或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [0503] 与结构R3NHC(O)OR1的式B的氨基甲酸酯化合物接触， [0504] 以形成式AB的结构表示的对映异构的微管缬氨酸中间体(各自任选地是盐形式) 的混合物，或者包含这些中间体或由这些中间体组成的组合物： [0505] [0506] (b)使步骤(a)得到的式AB微管缬氨酸中间体的光学异构体混合物或者包含这些 中间体或基本上由其组成的组合物与合适的还原剂接触，提供包含式R-1a结构表示的(R, R)-式1a和(R,S)-式1a微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物的组合物： [0507] [0508] 具体地，所述还原剂是手性还原剂，提供包含这些非对映异构体的组合物，其中 (1R,3R)-和(1R,3S)-式1a微管缬氨酸非对映异构体(有时称为(R,R)-和(R,S)-式1a)是主 要的光学异构体， [0509] 其中，(R,R)-式1a具有以下结构： [0510] [0511] 其中，(R,S)-式1a具有以下结构： [0512] [0513] (b’)任选地分离来自步骤(c)的非对映异构体以获得(R,R)-式1a非对映异构体 (任选地是盐形式)，或者包含该非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由该 非对映异构体或其盐组成的组合物，基本上不含其它非对映异构体，如(R,S)-式1a； [0514] (e)使非对映异构的式R-1a微管缬氨酸化合物，或包含这些化合物或基本上由这 些化合物组成的组合物，所述化合物各自任选地是盐形式，与合适的烃化剂接触，以形成式 R-1b表示的非对映异构的微管缬氨酸化合物(各自任选地是盐形式)的混合物，或包含该混 合物或基本上由该混合物组成的组合物： [0515] [0516] 或者使来自步骤(c’)色谱分离的(R,R)-式1a化合物或其组合物(其中(R,R)-式1a 86 CN 111601803 A 说　明　书 70/185 页 微管缬氨酸化合物是主要的光学异构体与合适的烃化剂接触，以形成具有以下结构的相应 的非对映异构体： [0517] [0518] 任选地是盐形式，具有(1R,3R)-构型，有时称为(R,R)-式1b(如所示的那样)，或者 包含该非对映异构体或其盐或基本上由其组成的组合物，其中(R,R)-式1b是主要的光学异 构体，其中来自步骤(c’)的相应的(R,R)-式1a的组合物的光学纯度在(R,R)-式1b组合物中 基本上保留；以及 [0519] (e’)任选地不存在分离式R-1b非对映异构体的步骤(c’)的非对映异构体分离，以 提供(R,R)-式1b(任选地是盐形式)，或包含该化合物作为主要的光学异构体或基本上由该 化合物组成的组合物， [0520] (f)使来自步骤(c)的非对映异构的式R-1b微管缬氨酸化合物或其组合与合适的 水解试剂接触，以形成非对映异构的微管缬氨酸化合物的混合物，或者包含这些非对映异 构体或基本上由其组成的组合物，所述非对映异构体各自任选地是盐形式，具有式R-2b表 示的以下结构： [0521] [0522] 或者接触步骤(c’)或(e’)(优选步骤(c’))色谱分离得到的(R,R)-式1b化合物或 其组合物(其中(R,R)-式1b化合物是主要的光学异构体)，以提供相应的非对映异构体(R, R)-式2b或包含该非对映异构体作为主要的光学异构体的组合物，所述非对映异构体具有 以下结构： [0523] [0524] 以及(f’)任选地不存在分离式R-2b非对映异构体的步骤(c’)和(e’)的非对映异 构体分离以提供(R,R)-式1b(任选地是盐形式)，或者包含该化合物作为主要的光学异构体 或基本上由该化合物组成的组合物， [0525] 其中，式A、B和AB以及式R-1a和(R,R)-式1b及其相应的光学异构体的可变基团如 (R,R)-式2b中定义。 [0526] 在优选的实施方案中，步骤(c)的烃化剂具有结构R2X，其中R2是饱和C1-C8烃基或 不饱和C3-C8烃基，或R2X是R2AX，具有式R2CCH2X，其中R2C是饱和C1-C8醚或不饱和C2-C8醚；且X 是Br，I，-OTs，-OMs或其他合适的离去基团。 [0527] 在其他优选的实施方案中，式2b的光学异构体中-OR 2是-OCH3，-OCH2CH3，- OCH2CH2CH3，-OCH2CH＝CH2或-OCH2-O-CH3，具体地–OCH2CH3。 [0528] 在优选的实施方案中，对映异构的式AB混合物在步骤(b)中进行手性还原提供的 87 CN 111601803 A 说　明　书 71/185 页 组合物中，相对于所述组合物中光学异构体的总重量，(R,R)-式1a和(R,S)-式1a非对映异 构体合并的量为至少约80重量％或至少约90重量％，更具体地，相对于组合物中式1a光学 异构体的总重量，组合物包含至少约90重量％合并的(R,R)-式1a和(R,S)-式1a非对映异构 体以及额外地具有约10重量％或更小、约5重量％或更小、约3重量％或更小、或约1.5重 量％或更小这些非对映异构体相应的对映异构体(S,S)-和(S,R)-式1a，或相对于组合物中 光学异构体的总重量，额外地具有约5重量％或更小、约3重量％或更小、或约1.5重量％或 更小的(S,S)-式1a光学杂质，以及基本上不含(S,R)-式1a光学异构体。 [0529] 在其他优选的实施方案中，步骤(b)手性还原、步骤(e)烃化或步骤(f)水解之后分 离非对映异构体提供的组合物中，相对于相应的(R,S)-非对映异构体，(R,R)-式1a、(R,R)- 式1b或(R,R)-式2b化合物至少约90％d.e.、至少约95％d.e.、或至少约97％d.e，或者组合 物基本上不含该(R,S)-非对映异构体。在更加优选的实施方案中，相对于相应的(R,S)-非 对映异构体，制备得到的组合物中(R,R)-式1a、(R,R)-式1b或(R,R)-式2b微管缬氨酸化合 物至少约95％d.e.或至少约97％d.e.，并且(S,S)-式1a、(S,S)-式1b、或(S,S)-式2b光学异 构体(它们是主要的非对映异构体各自的对映异构体)作为主要的光学杂质，或者组合物基 本上不含(R,S)-非对映异构体。在尤其优选的实施方案中，步骤(b)和之后任选的非对映异 构体分离之后，式R-1a组合物中的非对映异构体过量分别在步骤(e)和步骤(f)的烃化和水 解步骤获得的R-2b组合物中基本上保留。 [0530] 在上述第五组实施方案的任一种情况下，式A和式AB微管缬氨酸中间体、以及式R- 1a、式R-1b和式R-2b组合物、以及(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物、及其光学异构体(各自任 选地是盐形式)的环状Ar部分是C5杂亚芳基，包括但不限于，噻唑、异噁唑、吡唑或咪唑相关 的C5杂亚芳基作为母体杂环。因此，本文提供的其他实施方案是制备具有以下结构的(R, R)-式2b微管缬氨酸化合物，或者包含该化合物或基本上由该化合物组成的组合物的方法： [0531] [0532] 所述化合物任选地是盐形式， [0533] 通过以下结构表示的式R-1b微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物，或者包含 这些非对映异构体或基本上由这些非对映异构体组成的组合物制备得到： [0534] [0535] 各自任选地是盐形式， [0536] 上述结构又是通过以下结构表示的式R-1a微管缬氨酸化合物的非对映异构体混 合物，或者包含这些非对映异构体或基本上由这些非对映异构体组成的组合物制备得到： [0537] [0538] 各自任选地是盐形式， 88 CN 111601803 A 说　明　书 72/185 页 [0539] 上述结构又是通过以下结构表示的两种微管缬氨酸中间体的式AB对映异构体混 合物，或者包含这些中间体或基本上由这些中间体组成的组合物制备得到： [0540] [0541] 各自任选地是盐形式， [0542] 上述结构又是通过以下结构的式A微管缬氨酸中间体制备得到： [0543] [0544] 任选地是盐形式，在这些微管缬氨酸中间体结构的每一个中，X1是＝N-且X2是S、O 或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的C1-C4 烃基，优选选自：–H、-CH3和–CH2CH3；式A、B和AB、以及式R-1a、(R,R)-式2和(R,R)-式2b、以及 相应的光学异构体的其他可变基团保留其前述含义。在优选的实施方案中，环状芳基是噻 唑-1,3-二基。 [0545] 在更优选的实施方案中，式A微管缬氨酸中间体和式B氨基甲酸酯化合物分别具有 以下结构： [0546] [0547] 使得步骤(a)的过渡金属催化的氨基甲酸酯氮杂迈克尔反应得到的式AB中间体组 合物包含或者基本上由以下结构表示的两种对映异构体的混合物组成： [0548] [0549] 以及步骤(b)得到的式R-1a微管缬氨酸组合物包含以下结构表示的两种非对映异 构体的混合物或基本上由其组成： [0550] [0551] 或者步骤(b)的手性还原得到的式R-1a微管缬氨酸组合物之后是步骤(b’)的分离 主要的非对映异构体以提供(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或其组合物作为主要的光学异 构体，其中(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物具有以下结构： [0552] [0553] 或者(R,R)-式1a非对映异构体或其组合物基本上不含具有以下结构的相应的(R, S)-非对映异构体： 89 CN 111601803 A 说　明　书 73/185 页 [0554] [0555] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式1a光学异构体作为主要的光学杂质，其 具有以下结构： [0556] [0557] 以及步骤(e)的烃化得到的式R-1b微管缬氨酸组合物包含以下结构表示的两种非 对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0558] [0559] 或者步骤(b’)或(e’)的非对映异构体分离之后包含(R,R)-式1b微管缬氨酸化合 物或其组合物或基本上由其组成，相对于其他光学异构体，(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物 是主要的非对映异构体，其中(R,R)-式1b非对映异构体具有以下结构： [0560] [0561] 或者(R,R)-式1b非对映异构体或其组合物基本上不含具有以下结构的相应的(R, S)-非对映异构体： [0562] [0563] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式1b光学异构体作为主要的光学杂质，具 有以下结构： [0564] [0565] 以及步骤(f)的水解得到的式R-2b微管缬氨酸组合物包含以下结构表示的两种非 对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0566] [0567] 各自任选地是盐形式，其中(R,R)-式2b非对映异构体是主要的光学异构体，其中 (R,R)-式2b非对映异构体(任选地是盐形式)具有以下结构： 90 CN 111601803 A 说　明　书 74/185 页 [0568] [0569] 或者步骤(b’)，步骤(e’)或步骤(f’)的非对映异构体分离之后的步骤(f)的水解 得到的组合物包含R,R)-式2b非对映异构体或基本上由其组成，任选地是盐形式，基本上不 含(R,S)-式2b非对映异构体，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0570] [0571] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式2b光学异构体作为主要的光学杂质，任 选地是盐形式，其具有以下结构： [0572] [0573] 其中，R3、R6和R7如前所述，优选独立地选自C1-C4饱和烃基。 [0574] 在尤其优选的实施方案中，来自步骤(a)的式AB中间体组合物中间体组合物包含 以下结构表示的两种对映异构体的混合物或基本上由其组成： [0575] [0576] 以及该步骤得到的式R-1a化合物组合物之后是色谱分离(R,R)-和(R,S)-式1a非 对映异构体以提供包含(R,R)-式1a非对映异构体作为主要的光学异构体或基本上由其组 成的组合物，所述非对映异构体具有以下结构： [0577] [0578] (BOC-脱乙酰-微管缬氨酸-OEt) [0579] 或者包含该对非映异构体或基本上由该非对映异构体组成的组合物，基本上不含 相应的(R,S)-式1a非对映异构体，其具有以下结构： [0580] [0581] 以及基本上不含该相应的非对映异构体的对映异构体，即(S,R)-式1a，具有以下 结构： 91 CN 111601803 A 说　明　书 75/185 页 [0582] [0583] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式1a光学异构体作为主要的光学杂质，其 具有以下结构： [0584] [0585] 以及所述步骤(b)产物进行步骤(b’)色谱分离后的步骤(e)的烃化得到的式R-1b 微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式1b化合物作为主要的光学异构体或基本上由其组成，其具 有以下结构： [0586] [0587] 或者包含该非对映异构体或基本上由该非对映异构体组成的组合物，基本上不含 相应的非对映异构体(R,S)-式1b，其具有以下结构： [0588] [0589] 并且基本上不含该相应的非对映异构体的对映异构体，即(S,R)-式1b，具有以下 结构： [0590] [0591] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式1a光学异构体作为主要的光学杂质，其 具有以下结构： [0592] [0593] 以及步骤(f)的水解得到的式R-2b微管缬氨酸组合物含有(R,R)-式2b化合物，任 92 CN 111601803 A 说　明　书 76/185 页 选地是盐形式，作为主要的光学异构体，其具有以下结构： [0594] [0595] (BOC-微管缬氨酸(OEt)-OH) [0596] 或者包含该非对映异构体或基本上由该非对映异构体组成的组合物，基本上不含 相应的(R,S)-式2b非对映异构体，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0597] [0598] 并且基本上不该相应的非对映异构体的对映异构体，即(S,R)-式2b，具有以下结 构： [0599] [0600] 并且如果存在光学杂质，优选是(S,S)-式2b光学异构体作为主要的光学杂质，任 选地是盐形式，其具有以下结构： [0601] [0602] 2.3微管溶素化合物 [0603] 2.3.1第6组实施方案： [0604] 在另一组实施方案中，本文提供了制备(R,R)-式T1微管溶素化合物，或者包含该 化合物作为主要的光学异构体或基本上由该化合物组成的组合物的方法： [0605] [0606] 任选地是盐形式，其中R6和–OR2处于(R)-构型，如图所示， [0607] 并且任选地具有(S,S)-式T1作为光学杂质，任选地是盐形式，其具有以下结构： 93 CN 111601803 A 说　明　书 77/185 页 [0608] [0609] 或者包含(R,R)-式T1或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学异构体(R,S)- 式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0610] [0611] 并且基本上不含光学异构体(S,R)-式T1，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0612] [0613] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式T1作为主要的光学杂质，其中： [0614] 弯曲的虚线表示任选的环化； [0615] R2是氢、任选取代的饱和C1-C6烃基、或任选取代的不饱和C3-C8烃基，或 [0616] R2是R2A，其中R2A是–CH OR2C2 或–C(O)R2B，其中 [0617] R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C8烃基、C2-C8烯基或C2-C4炔基，任选地被取代；以 及 [0618] R2C是饱和C1-C8烃基或不饱和C3-C8烃基，任选地被取代； [0619] 以及 [0620] 环状Ar部分表示5-元含氮杂亚芳基，其中连接的所示取代基彼此成1,3-关系，其 余位置任选地取代； [0621] R3是任选取代的C1-C6烃基； [0622] R4、R5和R6是任选取代的C1-C6烃基； [0623] R4A是氢或任选取代的C1-C6烃基； [0624] R4B是任选取代的C1-C6烃基，或它们两个与连接的氮一起(如弯曲的虚线所示)形 成任选取代的5-、6-、7-或8-元含氮杂环基，具体地6-元含氮杂环基；以及 [0625] 一个RT是氢或任选取代的C1-C6烃基；另一个是任选取代的C1-C6烃基、或任选取代 的C3-C6杂烃基， [0626] 其中每个任选取代的C1-C6烃基独立地选自， [0627] 其中微管溶素化合物掺入了根据上述任一种方法制备得到的微管缬氨酸化合物， 具体地： [0628] 所述方法包括以下步骤： [0629] (a)在合适的过渡金属(II)催化剂的存在下，优选选自Cu(II)催化剂和Pd(II)催 94 CN 111601803 A 说　明　书 78/185 页 化剂，在合适的溶剂中，使式A的微管缬氨酸中间体： [0630] [0631] 其中R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的 C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任 选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20 杂环基、或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团并且其他可变基团如式T1的定 义， [0632] 与式B的氨基甲酸酯化合物接触： [0633] R3NHC(O)OR1(B) , [0634] 其中R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC (＝O)-是合适的胺保护基团，R3如式T1的定义， [0635] 以提供式AB表示的微管缬氨酸中间体(任选地是盐形式)的对映异构体混合物，或 者包含该混合物或者由该混合物组成的组合物： [0636] [0637] 其中，可变基团保留其式A和式B的含义， [0638] (b)使式AB对映异构体混合物或其组合物与合适的还原剂接触，其中所述还原剂 接触提供了式R-1a表示的微管缬氨酸化合物(各自任选地是盐形式)的非对映异构体混合 物，或者包含该混合物或基本上由其组成的组合物： [0639] [0640] 以及 [0641] (b’)分离非对映异构体以提供非对映异构体(R,R)-式1a，任选地是盐形式，或者 包含该非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，所述非对 映异构体具有以下结构： [0642] [0643] 并且任选地具有相应的对映异构体，即(S,S)-式1a(任选地是盐形式)作为光学杂 质，其具有以下结构： [0644] 95 CN 111601803 A 说　明　书 79/185 页 [0645] 或者， [0646] 包含(R,R)-式1a或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应的非对映异 构体，即(R,S)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0647] [0648] 并且基本上不含其对映异构体，即(S,R)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结 构： [0649] [0650] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式1a或其盐作为主要的光学杂质； [0651] (c)使光学异构体(R,R)-式1a(任选地是盐形式)或其组合物与合适的水解试剂接 触，其中所述水解试剂接触提供了具有以下结构的非对映异构体(R,R)-式2，任选地是盐形 式，作为主要的光学异构体： [0652] [0653] 并且任选地光学杂质是相应的对映异构体，即(S,S)-式2，任选地是盐形式，其具 有以下结构： [0654] [0655] 或者 [0656] 包含(R,R)-式2或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应的非对映异 构体(R,S)-式2，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0657] [0658] 并且基本上不含其对映异构体，即(S,R)-式2，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0659] [0660] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式2或其盐作为主要的光学杂质；其中式1a 和式2的光学异构体的可变基团保留其在式AB中的含义，以及任选地； [0661] 以及对于微管溶素化合物，其中R2是R2A，其中R2A是–C(O)R2B，所述方法进一步包括 96 CN 111601803 A 说　明　书 80/185 页 以下步骤： [0662] (d)使非对映异构体(R,R)-式2(任选地是盐形式)或其组合物与合适的酰化剂接 触，其中所述酰化剂接触提供了具有以下结构的非对映异构体(R,R)-式2a，任选地是盐形 式，作为主要的光学异构体： [0663] [0664] 并且任选地光学杂质是相应的对映异构体，即(S,S)-式2a，任选地是盐形式，其具 有以下结构： [0665] [0666] 或者 [0667] 包含(R,R)-式2a(任选地是盐形式)或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应 的非对映异构体(R,S)-式2a或其盐，其具有以下结构： [0668] [0669] 并且基本上不含其对映异构体，即(S,R)-式2a，任选地是盐形式，其具有以下结 构： [0670] [0671] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式2a或其盐作为主要的光学杂质， [0672] 其中，(R,R)-式2a及其光学异构体中的R2B如(R,R)-式T1的定义，其他可变基团保 留它们相应的式1a光学异构体的含义； [0673] 其中，将(R,R)-式2或(R,R)-式2a掺入(R,R)-式T1微管溶素化合物提供了化合物， 任选地是盐形式，其中R2是–H或R2是R2A，其中R2A是–C(O)R2B，其中R2B如为前文(R,R)-式T1的 定义；以及 [0674] 对于微管溶素化合物，其中R2是任选取代的饱和C1-C6烃基、或任选取代的不饱和 C -C 烃基，或R2是R2A，其中R2A是–CH OR2C3 8 2 步骤(c’)，其提了纯化形式的光学异构体(R,R)-式 1a或其盐之后是以下步骤： [0675] (e)使光学异构体(R,R)-式1a(任选地是盐形式)或其组合物与合适的烃化剂接 97 CN 111601803 A 说　明　书 81/185 页 触，其中所述烃化剂接触提供了结构(R,R)-式1b表示的微管缬氨酸化合物非对映异构体， 任选地是盐形式： [0676] [0677] 或者包含该非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组 合物， [0678] 并且任选地存在光学杂质，即相应的对映异构体(S,S)-式1b，任选地是盐形式，其 具有以下结构： [0679] [0680] 或者包含(R,R)-式1b或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应的非对 映异构体，即(R,S)-式1b，任选地是盐形式，其以下结构： [0681] [0682] 并且基本上不含其相应的对映异构体，即(S,R)-式1b，任选地是盐形式，其具有以 下结构： [0683] [0684] 并且任选地(S,S)-式1b或其盐作为主要的光学异构体杂质， [0685] 或者(R,R)-式1b组合物基本上保留步骤(b’)获得的(R,R)-式1a组合物的光学杂 质， [0686] 其中R2是任选取代的饱和C1-C6烃基、或任选取代的不饱和C3-C8烃基，或R2是R2A，其 中R2A是–CH 2C2OR 其中R2C如前文中它们各自的式T1光学异构体的定义；以及 [0687] 其中(R,R)-式1b及其光学异构体的其他可变基团保留它们各自的式1a光学异构 体中的含义；以及 [0688] (f)使(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)或其组合物与合适的水解 试剂接触，其中所述水解试剂接触提供了具有以下(R,R)-式2b结构的微管缬氨酸化合物， 任选地是盐形式： 98 CN 111601803 A 说　明　书 82/185 页 [0689] [0690] 或者包含该光学异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合 物， [0691] 并且任选地具有光学杂质，任选地是盐形式，相应的对映异构体，即(S,S)-式2b， 其具有以下结构： [0692] [0693] 或者包含(R,R)-式2b或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应的非对 映异构体，即(R,S)-式2b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0694] [0695] 并且基本上不含其相应的对映异构体，即(S,R)-式2b，任选地是盐形式，其具有以 下结构： [0696] [0697] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式2b或其盐作为主要的光学异构体杂质， 或者 [0698] 提供了(R,R)-式2b组合物，基本上保留步骤(b’)获得的(R,R)-式1a组合物或步骤 (e)获得的(R,R)-式1b组合物的光学纯度，其中，(R,R)-式2b掺入(R,R)-式T1微管溶素化合 物提供的化合物或其组合物中，R2是任选取代的饱和C1-C6烃基、或任选取代的不饱和C3-C8 烃基，或R2是R2A，其中R2A是–CH2OR2C，其中R2C如(R,R)-式1b中的定义， [0699] 其中，其他可变基团保留它们各自的式1a光学异构体中的含义。 [0700] 在制备(R,R)-式2a和(R ,R)-式2b微管缬氨酸化合物及其组合物的方法中，步骤 (d)或步骤(e)中合适的酰化剂和烃化剂包括前文在制备包含第4组实施方案的式R-2a或第 5组实施方案的式R-2b表示的非对映异构体混合物或基本上由其组成的组合物中描述的反 应试剂。 [0701] 在一些实施方案中，制备(R,R)-式T1的微管溶素化合物进一步包括以下步骤： [0702] (g)在第一偶联剂的存在下，并且任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使(R,R)- 式2、(R,R)-式2a、(R,R)-式2b、或其组合物的微管缬氨酸化合物或其盐，与具有HN(RT)2结构 的式C的化合物或其盐接触，其中RT如前文(R,R)-式T1中的定义，或者任选地是第一受阻碱 的存在下，使式C化合物与微管缬氨酸化合物的活化酯接触，以形成具有以下结构的(R,R)- 99 CN 111601803 A 说　明　书 83/185 页 式3v的微管溶素中间体(任选是其盐形式)： [0703] [0704] 或者包含该中间体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， [0705] 并且任选地具有光学杂质，任选地是盐形式，(S,S)-式3v，其具有以下结构： [0706] [0707] 或者包含(R,R)-式3v或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式3v，任选 地是盐形式，其具有以下结构： [0708] [0709] 并且基本上不含(S,R)-式3，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0710] [0711] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式3v或其盐作为主要的光学异构体杂质， 或者基本上保留所述第一偶联剂或活化酯接触之前微管缬氨酸化合物的光学纯度；以及 [0712] (h)使(R,R)-式3v的微管溶素中间体(任选地是盐形式)或其组合物与合适的脱保 护试剂接触以形成微管溶素中间体(R,R)-式4v： [0713] [0714] 任选地是盐形式， [0715] 或包含该中间体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， [0716] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式4v，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0717] [0718] 或者包含(R,R)-式4v或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式4v，任选 地是盐形式，其具有以下结构： [0719] 100 CN 111601803 A 说　明　书 84/185 页 [0720] 并且基本上不含(S,R)-式4v，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0721] [0722] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式4v或其盐作为主要的光学杂质，或者 [0723] (R,R)-式4v组合物基本上保留步骤(g)之前(R,R)-式2、(R,R)-式2a或(R,R)-式2b 的微管缬氨酸组合物的光学纯度；并且其中式3和式4v的光学异构体的可变基团保留式C以 及它们各自的式1a、式2a或式2b及其光学异构体中的含义；其中，(R,R)-式4v掺入(R,R)-式 T1微管溶素化合物的化合物中，R2是氢、任选取代的饱和C1-C6烃基、或任选取代的不饱和 C3-C8烃基，或R2是R2A，其中R2A是–CH OR2C2 或–C(O)R2B，其中R2B和R2C如(R,R)-式T1中的定义。 [0724] 在一些实施方案中，延迟步骤(d)的酰化直至步骤(g)完成，其中(R,R)-式3v中的 R2是氢，限定(R,R)-式3，以提供(R,R)-式3a。 [0725] 2.3.2第7组实施方案 [0726] 在进一步的实施方案中，本文提供了制备分别具有以下结构的脱酰基(R ,R)-式 T1A或(R,R)-式T1A的微管溶素化合物(各自任选地是盐形式)，或者包含该化合物作为主要 的光学异构体或基本上由该组合物组成的组合物的方法： [0727] [0728] 其中R6和–OH或–C(＝O)R2B是(R)-构型，如图所示，并且 [0729] 任选地具有脱酰基(S,S)-式T1A或(S,S)-式T1A作为光学杂质，任选地是盐形式， 它们分别具有以下结构： 101 CN 111601803 A 说　明　书 85/185 页 [0730] [0731] 或者包含脱酰基(R,R)-式T1A或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学异构 体脱酰基(R,S)-式T1A，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0732] [0733] 并且基本上不含光学异构体脱酰基(S,R)-式T1A，任选地是盐形式，其具有以下结 构： [0734] [0735] 并且如果存在光学杂质，脱酰基(S,S)-式T1A或其盐作为主要的光学杂质， [0736] 或者包含(R,R)-式T1A或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学异构体(R, S)-式T1A，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0737] [0738] 并且基本上不含光学异构体(S,R)-式T1A，任选地是盐形式，其具有以下结构： 102 CN 111601803 A 说　明　书 86/185 页 [0739] [0740] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式T1A或其盐作为主要的光学杂质，其中： [0741] 弯曲的虚线表示任选的环化； [0742] R2B是饱和C1-C6烃基，不饱和C3-C8烃基，C2-C8烯基或C2-C4炔基，任选地被取代；并 且 [0743] 环状Ar部分表示5-元含氮杂亚芳基，其中连接的所示取代基彼此成1,3-关系，其 余位置任选地取代； [0744] R3是任选取代的C1-C6烃基； [0745] R4、R5和R6是任选取代的C1-C6烃基； [0746] R4A是氢或任选取代的C1-C6烃基； [0747] R4B是任选取代的C1-C6烃基，或 [0748] R4A和R4B与它们连接的原子一起限定(如弯曲的虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或 8-元含氮杂环基，优选6-元含氮杂环基； [0749] 一个RT是氢或任选取代的C1-C6烃基；另一个是任选取代的C1-C6烃基或任选取代的 C3-C6杂烃基， [0750] 其中任选取代的C1-C6烃基各自独立地选择， [0751] 其中，脱酰基(R,R)-式T1A和(R,R)-式T1A的微管溶素化合物掺入了分别通过前文 “第3组实施方案”或“第4组实施方案”中任一种方法制备的微管缬氨酸化合物，具体地， [0752] 所述方法包括以下步骤： [0753] (a)在合适的溶剂中，在合适的过渡金属(II)催化剂存在下，优选选自Cu(II)催化 剂和Pd(II)催化剂的催化剂存在下，使式A的微管缬氨酸中间体: [0754] [0755] 与式B的氨基甲酸酯化合物接触： [0756] R3NHC(O)OR1(B) , [0757] 以形成以下式AB表示的微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物，或者包含该混合 物或基本上由该混合物组成的组合物： [0758] [0759] 各自任选地是盐形式，其中可变基团保留它们在式A和式B中的含义； [0760] (b)使式AB的对映异构体混合物或其组合物与合适的还原剂接触，其中所述还原 103 CN 111601803 A 说　明　书 87/185 页 剂接触导致形成式R-1a表示的非对映异构体混合物或者包含该混合物或基本上由该混合 物组成的组合物： [0761] [0762] (b’)分离非对映异构体以提供(R,R)-式1a非对映异构体，任选地是盐形式，或者 包含该非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由该非对映异构体或其盐组 成的组合物，其具有以下结构： [0763] [0764] 并且具有相应的对映异构体，即(S,S)-式1a(任选地是盐形式)作为光学杂质，其 具有以下结构： [0765] [0766] 或者包含(R,R)-式1a或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含相应的非对 映异构体，即(R,S)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0767] [0768] 并且基本上不含相应的的对映异构体(S,R)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下 结构： [0769] [0770] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式1a作为主要的光学杂质；以及 [0771] 其中式1a光学异构体的可变基团保留它们在式AB中的含义； [0772] (c)使(R,R)-式1a或其组合物与合适的水解试剂接触，其中所述水解试剂接触导 致形成(R,R)-式2，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0773] [0774] 或者包含(R,R)-式2或其盐作为主要的光学异构体或基本上由(R,R)-式2或其盐 组成的组合物， [0775] 并且具有相应的对映异构体，即(S,S)-式2，作为，任选地是盐形式，其具有以下结 104 CN 111601803 A 说　明　书 88/185 页 构： [0776] [0777] 或者包含(R,R)-式2或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式2，任选地 是盐形式，其具有以下结构： [0778] [0779] 并且基本上不含相应的对映异构体，即(S,R)-式2，任选地是盐形式，其具有以下 结构： [0780] [0781] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式2或其盐作为主要的光学杂质，或者 [0782] 基本上保留步骤(b’)获得的(R,R)-式1a的组合物的光学纯度；以及其中，可变基 团保留它们分别在式1a光学异构体中的含义； [0783] (d)使(R,R)-式2(任选地是盐形式)或其盐与合适的酰化剂接触，其中所述酰化剂 接触提供(R,R)-式2a作为主要的光学异构体，其具有以下结构： [0784] [0785] 任选地具有相应的对映异构体的光学杂质，即(S,S)-式2a，任选地是盐形式，其具 有以下结构： [0786] [0787] 或者包含(R,R)-式2a或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式，基本上不含 相应的非对映异构体，即(R,S)-式2a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0788] [0789] 并且基本上不含相应的的对映异构体，即(S,R)-式2a，任选地是盐形式，其具有以 下结构： 105 CN 111601803 A 说　明　书 89/185 页 [0790] [0791] 并且如果存在其他光学杂质，(S,S)-式2a作为主要的光学杂质，或者 [0792] (R ,R)-式2a的组合物基本上保留步骤(b’)获得的(R,R)-式1a或步骤(c)获得的 (R,R)-式2的光学纯度；以及 [0793] 其中R2B如(R,R)-式T1A中的定义，以及其中其他可变基团保留它们各自在式1a光 学异构体中的含义， [0794] (g)在第一偶联剂的存在下，并且任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使(R,R)- 式2a(任选地是盐形式)或其组合物与具有HN(RT)2结构的式C的化合物或其盐接触，其中每 个RT如(R,R)-式T1A中的定义，或者任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使式C化合物与 (R,R)-式2a的活化酯接触， [0795] 其中所述第一偶联剂或活化酯接触提供了(R,R)-式3a，任选地是盐形式，具有以 下结构： [0796] [0797] 或者包含(R,R)-式3a(任选地是盐形式)作为主要的光学异构体或基本上由其组 成的组合物，任选地具有(S,S)-式3a(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [0798] [0799] 或者包含(R,R)-式3a或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式 3a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0800] [0801] 并且基本上不含(S,R)-式3a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0802] 106 CN 111601803 A 说　明　书 90/185 页 [0803] 并且如果存在其他光学杂质，(S,S)-式3a，任选地是盐形式，作为主要的光学异构 体杂质，或者 [0804] (R,R)-式3a的组合物基本上保留步骤(b’)得到的(R,R)-式1a，步骤(c)得到的(R, R)-式2或步骤(d)得到的式(R,R)-式2a的光学纯度；以及其中，(R,R)-式3a及其光学异构体 中的可变基团保留它们各自在式1a光学异构体中的含义， [0805] 或者步骤(d)之后是以下步骤： [0806] (g’)在第一偶联剂的存在下并且任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使(R,R)- 式2(任选地是盐形式)或其组合物与HN(RT)2结构的式C化合物或其盐接触，其中每个RT如 (R,R)-式T1A中的定义，或者任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使得式C化合物与(R, R)-式2的活化酯接触， [0807] 其中所述第一偶联剂或活化酯接触提供了(R,R)-式3，任选地是盐形式，具有以下 结构： [0808] [0809] 或者包含(R,R)-式3(任选地是盐形式)作为主要的光学异构体或基本上由其组成 的组合物，任选地具有(S,S)-式3(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [0810] [0811] 或者包含(R,R)-式3或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式3， 任选地是盐形式，其具有以下结构： [0812] [0813] 并且基本上不含(S,R)-式3，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0814] [0815] 并且如果存在其他光学杂质，(S,S)-式3，任选地是盐形式，作为主要的光学异构 体杂质，或 [0816] (R ,R)-式3的组合物基本上保留步骤(b’)获得的(R,R)-式1a、或步骤(c)获得的 (R,R)-式2的组合物的光学纯度；以及其中，(R,R)-式3及其光学异构体的可变基团保留它 们各自在式1a光学异构体中的含义；以及 [0817] 其中步骤(g)之后是以下步骤： [0818] (h)使(R,R)-式3a(任选地是盐形式)或其组合物与合适的脱保护剂接触，其中，所 述脱保护剂接触提供了(R,R)-式4a，任选地是盐形式，具有以下结构： 107 CN 111601803 A 说　明　书 91/185 页 [0819] [0820] 或者包含(R,R)-式4a或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， 任选地具有作为光学杂质(S,S)-式4a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0821] [0822] 或者包含(R,R)-式4a或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式4a，任选 地是盐形式，其具有以下结构： [0823] [0824] 并且基本上不含(S,R)-式4a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0825] [0826] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式4a，任选地是盐形式，作为主要的光学异构体杂 质，或 [0827] (R,R)-式4a的组合物基本上保留步骤(b’)得到的(R,R)-式1a、步骤(c)得到的(R, R)-式2a、或步骤(g)得到的(R,R)-式3a的组合物的光学纯度；以及其中，(R,R)-式4a及其光 学异构体的可变基团保留它们各自在式1a光学异构体中的含义，式3a和式4a光学异构体中 的可变基团保留它们各自在式C和式2a光学异构体中的含义，或者 [0828] 步骤(g’)之后是以下步骤(h’)： [0829] (h’)使(R,R)-式3(任选地是盐形式)或其组合物与合适的脱保护剂接触，其中所 述脱保护剂接触提供了(R,R)-式4，任选地是盐形式，具有以下结构： [0830] [0831] 或者包含(R,R)-式4或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， 任选地具有光学杂质(S,S)-式4，任选地是盐形式，其具有以下结构： 108 CN 111601803 A 说　明　书 92/185 页 [0832] [0833] 或者包含(R,R)-式4或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式4，任选地 是盐形式，其具有以下结构： [0834] [0835] 并且基本上不含(S,R)-式4，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0836] [0837] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式4a＝，任选地是盐形式，作为主要的光学 异构体杂质，或 [0838] (R ,R)-式4的组合物基本上保留步骤(b’)得到的(R,R)-式1a、步骤(c)得到的(R, R)-式2、步骤(g’)得到的(R,R)-式3的组合物的光学纯度；以及其中，(R,R)-式4及其光学异 构体的可变基团保留它们各自在式1a光学异构体中的含义，式3和式4光学异构体的可变基 团保留它们各自在式C和式2光学异构体中的含义；以及 [0839] 其中步骤(h)或(h’)之后是以下步骤(i)： [0840] (i)在第二偶联剂的存在下，并且任选地在第二合适的受阻碱的存在下，使(R,R)- 式4或(R,R)-式4a(任选地是盐形式)或其组合物，与式S-D2的受保护的氨基酸(任选地是盐 形式)接触，或者任选地在第二合适的受阻碱的存在下，接触其活化酯，其中，式S-D2受保护 的氨基酸具有以下结构： [0841] [0842] 其中RPR是氨基保护基团， [0843] 其中，步骤(i)的所述第二偶联剂或所述受保护的氨基酸活化酯接触提供了受保 护的微管溶素中间体，(R,R)-式5或(R,R)-式5a，各自任选地是盐形式，或其组合物，脱保护 后提供了脱保护的微管溶素中间体，任选地是盐形式，(R,R)-式6或(R,R)-式6a，具有以下 结构： 109 CN 111601803 A 说　明　书 93/185 页 [0844] [0845] 其中，(R,R)-式5和(R,R)-式6或(R,R)-式5a和(R,R)-式6a及其相应的光学异构体 中的可变基团的含义保留它们各自在式4或式4a光学异构体中的含义，并且如相应的式T1A 光学异构体的定义， [0846] 或者提供包含(R,R)-式6或(R,R)-式6a或基本上由其组成的组合物，(R,R)-式6或 (R,R)-式6a各自任选地是盐形式，作为主要的光学异构体，任选地具有主要的光学杂质， (S,S)-式6或(S,S)-式6a，各自任选地是盐形式，其具有以下结构： [0847] [0848] [0849] 或者包含(R,R)-式6或其盐或(R,R)-式6a或其盐或基本上由其组成的组合物，基 本上不含(R,S)-式6a或(R,S)-式6a，各自任选地是盐形式，其具有以下结构： [0850] [0851] 并且基本上不含(S,R)-式6或(S,R)-式6a，任选地是盐形式，其具有以下结构： 110 CN 111601803 A 说　明　书 94/185 页 [0852] [0853] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式6a或(S,S)-式6a，各自任选地是盐形式， 作为主要的光学杂质，或者 [0854] 步骤(h)或步骤(h’)之后是以下步骤(i')： [0855] (i’)在第二偶联剂的存在下，并且任选地在第二合适的受阻碱的存在下，使(R, R)-式4或(R,R)-式4a(任选地是盐形式)或其组合物，与(R,S)-D1-D2二肽(任选地是盐形 式)接触，或者在第二合适的受阻碱的存在下接触其活化酯，其中二肽具有以下结构： [0856] [0857] 其中，受保护的氨基酸或二肽的可变基团如(R,R)-式T1A中的定义；以及 [0858] 其中，步骤(i)中与(R,R)-式4a(任选地是盐形式)或其组合物的所述第二偶联剂 接触或所述二肽活化酯接触提供了微管溶素化合物(R,R)-式T1A，任选地是盐形式，或其组 合物，或者与(R,R)-式4接触提供了脱酰基(R,R)-式T1A，酰化后提供(R,R)-式T1A微管溶素 化合物或组合物。 [0859] 在一些优选的实施方案中，步骤(i')提供了包含(R,R)-式T1A的组合物，或步骤 (i)提供了包含(R,R)-式6或(R,R)-式6a的组合物，其中所述组合物基本上保留步骤(b’)得 到的(R,R)-式1a、步骤(c)得到的(R,R)-式2、步骤(d)得到的(R,R)-式2a、步骤(g)得到的 (R,R)-式3a或步骤(g’)得到(R,R)-式3a、步骤(h)得到的(R,R)-式4a或步骤(h’)得到的(R, R)-式4a、或步骤(i)得到的(R,R)-式5a的组合物的光学纯度。 [0860] 在提供(R,R)-(R,R)-式6或(R,R)-式6a(各种任选地是盐形式)或其组合物的那些 实施方案的一些中，脱酰基(R,R)-式T1A或(R,R)-式T1A的微管溶素化合物(各种任选地是 盐形式)或其组合物是通过以下过程获得的：在第三偶联剂的存在下，并且任选地在第三合 适的受阻碱的存在下，使微管溶素中间体或其组合物与具有以下结构的式R-D1的含胺酸或 其盐接触： [0861] 111 CN 111601803 A 说　明　书 95/185 页 [0862] 或者任选地在第三合适的受阻碱的存在下，使微管溶素中间体与含胺酸的活化酯 接触，其中，可变基团如(R,R)-式T1A中的定义， [0863] 其中，在一些实施方案中，提供脱酰基(R,R)-式T1A的所述第三偶联剂之后是酰化 以提供(R,R)-式T1A微管溶素化合物(任选地是盐形式)或其组合物， [0864] 其中，在优选的实施方案中，(R,R)-式6或(R,R)-式6a组合物的光学纯度在获得的 (R,R)-式T1A组合物中基本上保留。 [0865] 式A、式AB的微管缬氨酸中间体、以及(R,R)-式1a、2和2a的微管缬氨酸化合物、及 其光学异构体的优选实施方案如前文“第4组实施方案”所述。 [0866] 因此，在步骤(g)、(h)和(i)得到的(R,R)-式3a、4a、5a和6a的微管溶素中间体、及 其光学异构体，步骤(g’)、(h’)和(i)得到的(R,R)-式3、4、5和6微管溶素中间体、及其光学 异构体，步骤(g)、(h)和(i')或(g’)、(h’)和(i')得到的脱酰基(R,R)-式T1A和(R,R)-式T1A 微管溶素化合物、及其光学异构体的优选实施方案中，环状Ar部分是C5杂亚芳基，任选地是 盐形式，包括但不限于：噻唑、异噁唑、吡唑或咪唑相关的C5杂亚芳基作为母体杂环。 [0867] 因此，一种优选的实施方案提供了制备(R,R)-(R ,R)-式6或式6a微管溶素中间体 的方法，各自任选地是盐形式，分别具有以下结构： [0868] [0869] 或者包含(R,R)-式6作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，或者包 含(R,R)-式6或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学杂质(R,S)-式6和(S,R)-式6，各 自任选地是盐形式，它们分别具有以下结构： [0870] [0871] 如果存在其他光学异构体杂质，(S,S)-式6作为主要的光学杂质，任选地是盐形 式，其具有以下结构： [0872] [0873] 或者包含(R,R)-式6a作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，或者包 含(R,R)-式6a或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学杂质(R,S)-式6a和(S,R)-式 112 CN 111601803 A 说　明　书 96/185 页 6a，各自任选地是盐形式，它们分别具有以下结构： [0874] [0875] 并且如果存在其他光学异构体杂质，(S,S)-式6a作为主要的光学杂质，任选地是 盐形式，其具有以下结构： [0876] [0877] 其中，所述方法还包括脱保护(R,R)-式5或式5a的步骤，各自任选地是盐形式，它 们分别具有以下结构： [0878] [0879] 或者包含(R,R)-式5或其盐作为光学异构体或基本上由其组成的组合物，或者包 含(R,R)-式5或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学杂质(R,S)-式5和(S,R)-式5，它 们分别具有以下结构： [0880] [0881] 各自任选地是盐形式，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式5作为主要的光学杂质， 任选地是盐形式，其具有以下结构： [0882] 113 CN 111601803 A 说　明　书 97/185 页 [0883] 或者包含(R,R)-式5a或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， 或者包含(R,R)-式5a或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学杂质(R,S)-式5a和(S, R)-式5a，它们分别具有以下结构： [0884] [0885] 各自任选地是盐形式，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式5a作为主要的光学杂质， 任选地是盐形式，其具有以下结构： [0886] [0887] 以及其中，RPR是合适的氨基保护基团，(R,R)-式5、(R,R)-式6、(R,R)-式5a、(R,R)- 式6a、及其光学异构体的其他可变基团的含义保留本文所述的相应的(R,R)-式4和(R,R)- 式4a光学异构体中的含义并且如前文该组实施方案所限定。 [0888] 在另一个优选的实施方案中，提供了制备(R,R)-式T1A微管溶素化合物或脱酰基 (R,R)-式T1A微管溶素化合物的方法，酰化后提供(R,R)-式T1A，任选地是盐形式，其中脱酰 基(R,R)-式T1A微管溶素和(R,R)-式T1A具有以下结构： [0889] [0890] [0891] 或者提供了制备包含脱酰基(R,R)-式T1A(任选地是盐形式)作为主要的光学异构 体或基本上由其组成的组合物，或包含脱酰基(R,R)-式T1A或其盐或基本上由其组成的组 合物的方法，基本上不含光学杂质脱酰基(R,S)-式T1A和脱酰基(S,R)-式T1A，它们分别具 有以下结构： 114 CN 111601803 A 说　明　书 98/185 页 [0892] [0893] 各自任选地是盐形式，并且如果存在光学异构体杂质，脱酰基(S,S)-式T1A(任选 地是盐形式)作为主要的光学杂质，其具有以下结构： [0894] [0895] 或者包含(R,R)-式T1A(任选地是盐形式)作为光学异构体或基本上由其组成的组 合物，或包含(R,R)-式T1A或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含光学杂质(R,S)- 式T1A和(S,R)-式T1A，它们分别具有以下结构： [0896] [0897] 各自任选地是盐形式，并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式T1A(任选地是盐 形式)作为主要的光学杂质，其具有以下结构： [0898] [0899] 其中，脱酰基(R,R)-式T1A或(R,R)-式T1A微管溶素化合物，各自任选地是盐形式， 或其组合物是通过以下过程制备的：在第三偶联剂的存在下，以及任选地在第三合适的受 阻碱的存在下，使(R,R)-式6或(R,R)-式6a微管溶素中间体(任选地是盐形式)或其组合物， 与含胺酸接触，任选地是盐形式，具有式R-D1的结构： 115 CN 111601803 A 说　明　书 99/185 页 [0900] [0901] 或者任选地在第三合适的受阻碱的存在下，使(R,R)-式6或(R,R)-式6a微管溶素 中间体或其组合物与含胺酸的活化酯接触，其中，式R-D1优选是D-N-甲基-哌啶酸 (pipecolic  acid)，任选地是盐形式，或其活化酯， [0902] 或者脱酰基(R,R)-式T1A是通过以下过程制备的：在第二偶联剂的存在下，并且任 选地在第二合适的受阻碱的存在下，使(R,R)-式4微管溶素中间体，任选地是盐形式，具有 以下结构： [0903] [0904] 或包含(R,R)-式4或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，或 者(R,R)-式4的组合物，基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式4和(S,R)-式4，它们分别具有 以下结构： [0905] [0906] 各自任选地是盐形式，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式4作为主要的光学杂质， 任选地是盐形式，其具有以下结构： [0907] [0908] 与具有以下结构的(R,S)-D1-D2二肽接触： [0909] [0910] 任选地是盐形式，或者使(R,R)-式4(任选地是盐形式)或其组合物与所述二肽的 活化酯接触，任选地在第二合适的受阻碱的存在下， [0911] 以及其中，(R,R)-式T1A通过以下过程制备：在第二偶联剂的存在下并且任选地在 第二合适的受阻碱的存在下，使(R,R)-式4a微管溶素中间体，任选地是盐形式，具有以下结 构： [0912] 116 CN 111601803 A 说　明　书 100/185 页 [0913] 或者包含(R,R)-式4a或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， 或者(R,R)-式4a的组合物，基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式4a和(S,R)-式4a，它们分 别具有以下结构： [0914] [0915] 各自任选地是盐形式，并且如果存在其他光学杂质，(S,S)-式4a作为主要的光学 杂质，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0916] [0917] 与(R,S)-D1-D2二肽或其盐接触， [0918] 或者任选地在第二合适的受阻碱的存在下，使(R,R)-式4a(任选地是盐形式)或其 组合物与所述二肽的活化酯接触， [0919] 其中，(R,R)-式4或其组合物是通过以下过程制备的：脱保护(R,R)-式3微管溶素 中间体，任选地是盐形式，具有以下结构： [0920] [0921] 或者脱保护包含(R,R)-式3或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式3和 (S,R)-式3，各自任选地是盐形式，它们分别具有以下结构： [0922] [0923] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式3作为主要的光学杂质，任选地是盐形 式，其具有以下结构： [0924] [0925] 以及其中，(R,R)-式4a或其组合物是通过以下过程制备的：脱保护(R,R)-式3a，或 者包含(R,R)-式3a或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式3a和(S,R)-式3a，各 自任选地是盐形式，它们分别具有以下结构： 117 CN 111601803 A 说　明　书 101/185 页 [0926] [0927] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式3a作为主要的光学杂质，任选地是盐形 式，其具有以下结构： [0928] [0929] 以及其中，(R,R)-式3或(R,R)-式3a或其组合物又是通过以下过程制备的：在第一 偶联剂的存在下，以及任选地在第一合适的受阻碱的存在下，使得HN(RT)2结构的式C化合物 或其盐与(R,R)-式2或(R,R)-式2a微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)接触，或者任选地 在第一合适的受阻碱的存在下，使式C化合物与各个微管缬氨酸化合物的活化酯接触，其中 (R,R)-式2和(R,R)-式2a，各自任选地是盐形式，具有以下结构： [0930] [0931] 或者(R,R)-式3又是通过以下过程制备的：所述式C与包含(R,R)-式2或其盐作为 主要的光学异构体或者基本上由其组成的组合物接触，其中所述组合物基本上不含光学杂 质(R,S)-式2和(S,R)-式2(任选地是盐形式)，它们分别具有以下结构： [0932] [0933] 并且如果存在光学异构体杂质，(S,S)-式2a(任选地是盐形式)作为主要的光学异 构体杂质，其具有以下结构： [0934] [0935] 以及(R,R)-式3a或其组合物又是通过以下过程制备的：所述式C与包含(R,R)-式 2a或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物接触，其中所述组合物基本上 不含光学杂质(R,S)-式2a和(S,R)-式2a，各自任选地是盐形式，它们分别具有以下结构： [0936] 118 CN 111601803 A 说　明　书 102/185 页 [0937] 并且如果存在光学杂质，(S,S)-式2a(任选地是盐形式)，作为主要的光学异构体 杂质，其具有以下结构： [0938] [0939] 其中，(R,R)-式2和(R ,R)-式2a微管缬氨酸化合物分别根据“第3组实施方案”和 “第4组实施方案”的方法制备；以及 [0940] 其中，在这些微管溶素和微管缬氨酸结构及其中间体的任一种中，X1是＝N-且X2是 S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的 C1-C4烃基，优选选自：–H、-CH3和–CH2CH3。在优选的实施方案中，环状芳基是噻唑-1,3-二基。 [0941] 在更优选的实施方案中，式2a微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式2a或基本上由其组 成，任选地是盐形式，作为主要的光学异构体，具有以下结构： [0942] [0943] 并且(S,S)-式2a(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质，其具有以下结构： [0944] [0945] 并且基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式2a和(S,R)-式2a，各自任选地是盐形 式，它们分别具有以下结构： [0946] [0947] 使得所述第一偶联剂接触提供了包含(R,R)-式3a(任选地是盐形式)作为主要的 光学异构体或基本上由其组成的式3a组合物，具有以下结构： [0948] [0949] 并且具有(S,S)-式3a(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质，如果存在这种杂质 的话，其具有以下结构： 119 CN 111601803 A 说　明　书 103/185 页 [0950] [0951] 并且基本上不含光学杂质(R,S)-式3a和(S,R)-式3a，各自任选地是盐形式，它们 分别具有以下结构： [0952] [0953] 式3a组合物脱保护得到的式4a组合物包含(R,R)-式4a(任选地是盐形式)作为主 要的光学异构体或基本上由其组成，具有以下结构： [0954] [0955] 并且具有(S,S)-式4a(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质，如果存在这种杂质 的话，其具有以下结构： [0956] [0957] 并且基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式4a和(S,R)-式4a，各自任选地是盐形 式，它们分别具有以下结构： [0958] [0959] 2.3.3第8组实施方案 [0960] 在另一组实施方案中，本文提供了制备微管溶素化合物(R,R)-式T1A的方法，任选 地是盐形式，具有以下结构： [0961] [0962] 或者包含该微管溶素化合物或其盐或基本上由其组成的组合物，其中(R ,R)-式 T1A是主要的光学异构体并且任选地具有(S,S)-式T1A作为光学杂质，任选地是盐形式，其 120 CN 111601803 A 说　明　书 104/185 页 具有以下结构： [0963] [0964] 并且基本上不含(R,S)-式T1A光学杂质，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0965] [0966] 并且基本上不含(S,R)-式T1A光学杂质，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0967] [0968] 其中： [0969] 弯曲的虚线表示任选的环化； [0970] R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C8烃基、C2-C8烯基或C2-C4炔基、任选地被取代；和 [0971] R3是任选取代的C1-C6烃基，具体地甲基、乙基或丙基； [0972] R4和R5独立地是任选取代的C1-C6烃基； [0973] R4A是氢或任选取代的C1-C6烃基； [0974] R4B是任选取代的C1-C6烃基，或 [0975] R4A和R4B与它们连接的原子一起形成(如弯曲的虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或 8-元含氮杂环基、优选6-元含氮杂环基； [0976] 一个RT是氢或任选取代的C1-C6烃基；另一个是任选取代的C1-C6烃基或任选取代的 C3-C6杂烃基， [0977] 其中任选取代的C1-C6烃基各自独立地选择， [0978] 其中，微管溶素化合物(R,R)-式T1A掺入了微管缬氨酸化合物，该微管缬氨酸化合 物通过前文“第4组实施方案”所述方法中的任一种进行制备，具体地， [0979] 所述方法包括以下步骤： [0980] (a)在合适的溶剂中，在合适的过渡金属(II)催化剂，优选选自Cu(II)催一回家和 Pd(II)催化剂的存在下，使式A的微管缬氨酸中间体具有以下结构： [0981] [0982] 与具有以下结构的式B的氨基甲酸酯化合物接触： 121 CN 111601803 A 说　明　书 105/185 页 [0983] R3NHC(O)O-t-Bu, [0984] 以形成以下结构式AB表示的微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物： [0985] [0986] 其中，可变基团保留它们在式A和式B中的含义，或者包含或基本上由该混合物组 成的组合物； [0987] (b)使式AB的对映异构体混合物或其组合物与合适的还原剂接触，其中所述还原 剂接触导致形成以下结构式R-1a表示的微管缬氨酸化合物的非对映异构体混合物(各自任 选地是盐形式)，或者包含该混合物或基本上由其组成的组合物： [0988] [0989] (b’)分离混合物的非对映异构体以提供非对映异构体(R,R)-式1a，任选地是盐形 式，或包含该非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，其 具有以下结构： [0990] [0991] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0992] [0993] 或者(R,R)-式1a或其盐的组合物，基本上不含相应的非对映异构体，即(R,S)-式 1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [0994] [0995] 并且基本上不含其对映异构体，即(S,R)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结 构： [0996] [0997] 并且如果存在光学杂质，优选具有(S,S)-式1a，任选地是盐形式，作为主要的光学 异构体杂质，其中，(R,R)-式1a及其光学异构体的可变基团保留它们在式AB中的含义； [0998] (c)使(R,R)-式1a(任选地是盐形式)或其组合物与合适的水解试剂接触，其中所 122 CN 111601803 A 说　明　书 106/185 页 述水解试剂接触提供了相应的非对映异构体，即(R,R)-式2，任选地是盐形式，其具有以下 结构： [0999] [1000] 或者包含非对映异构体或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合 物，并且任选地具有光学杂质，即其相应的对映异构体(S,S)-式2，任选地是盐形式，其具有 以下结构： [1001] [1002] 或者包含(R,R)-式2或其盐的组合物，基本上不含非对映异构体，(R,S)-式2，任选 地是盐形式，其具有以下结构： [1003] [1004] 并且基本上不含其对映异构体，即(S,R)-式2，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1005] [1006] 并且如果存在光学杂质，优选具有(S,S)-式2，任选地是盐形式，作为主要的光学 异构体杂质，其中，(R,R)-式2及其光学异构体的可变基团保留它们在(R,R)-式1a中的含 义； [1007] (d)使(R,R)-式2非对映异构体(任选地是盐形式)或其组合物与合适的乙酰化试 剂接触，其中所述乙酰化试剂接触提供了非对映异构体，(R,R)-式2a，任选地是盐形式，作 为主要的光学异构体，其具有以下结构： [1008] [1009] 或者包含(R,R)-式2a或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物， 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式2a作为主要的光学杂质，任选地是盐形式，其具有以 下结构： [1010] [1011] 或者包含(R,R)-式2a或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式 123 CN 111601803 A 说　明　书 107/185 页 2a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1012] [1013] 并且基本上不含其相应的对映异构体，即(S,R)-式2a，任选地是盐形式，其具有以 下结构： [1014] [1015] 并且如果存在光学杂质，优选具有(S,S)-式2a(任选地是盐形式)作为主要的光学 杂质， [1016] 其中，(R,R)-式2a及其光学异构体的可变基团保留它们在(R,R)-式1a中的含义； 以及 [1017] 其中，所述(R,R)-式2a的掺入提供了(R,R)-式T1A微管溶素化合物(任选地是盐形 式)或其组合物。 [1018] 在实现该掺入的优选实施方案中，步骤(d)之后是以下步骤： [1019] (g)在第一偶联剂的存在下，以及任选地在第一受阻碱的存在下，使(R,R)-式2a非 对映异构体或其组合物(任选地是盐形式)与HN(RT)2结构的式C化合物(任选地是盐形式)接 触，其中，各个RT如(R,R)-式T1A的定义，或者任选地在第一受阻碱的存在下，使式C化合物 与(R,R)-式2a非对映异构体或其盐的活化酯接触，以提供(R,R)-式3a作为主要的光学异构 体，任选地是盐形式，具有以下结构： [1020] [1021] 或者包含(R,R)-式3a作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，任选地 具有(S,S)-式3a(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [1022] [1023] 或者包含(R,R)-式3a或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式 3a，任选地是盐形式，其具有以下结构： 124 CN 111601803 A 说　明　书 108/185 页 [1024] [1025] 并且基本上不含(S,R)-式3a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1026] [1027] 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式2(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质； [1028] (h)使(R ,R)-式3(任选地是盐形式)或其组合物，与合适的脱保护剂接触以形成 (R,R)-式4，任选地是盐形式，具有以下结构： [1029] [1030] 或者包含(R,R)-式4a作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物，任选地 具有(S,S)-式4a(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [1031] [1032] 或者包含(R,R)-式4a或基本上由其组成的组合物，基本上不含(R,S)-式4a，任选 地是盐形式，其具有以下结构： [1033] [1034] 并且基本上不含(S,R)-式4a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1035] [1036] 并且如果存在光学杂质，优选(S,S)-式2(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质； 以及 [1037] 其中，(R,R)-式3a和(R,R)-式4a及其光学异构体的可变基团保留它们在式C和(R, 125 CN 111601803 A 说　明　书 109/185 页 R)-式2a及其相应的光学异构体中的含义；以及 [1038] (i)在第二偶联剂的存在下，以及任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4a (任选地是盐形式)或其组合物，与(R,S)-D1-D2二肽接触，任选地是盐形式，具有以下结构： [1039] [1040] 或者任选地在第二受阻碱的存在下，使该非对映异构体或组合物与所述二肽的活 化酯接触，其中所述二肽的可变基团如(R,R)-式T1A中的定义；以及其中所述第二偶联剂或 所述二肽活化酯接触提供了(R,R)-式T1A微管溶素化合物(任选地是盐形式)或其组合物。 [1041] 在这些较优选的实施方案中，尤其优选的实施方案制备了具有以下结构的(R,R)- 式T1A微管溶素化合物，任选地是盐形式： [1042] [1043] 其中R3是甲基、乙基或丙基；一个RT是氢且另一个是任选取代的C1-C6烃基， [1044] 或者尤其优选的实施方案制备了包含(R,R)-式T1A(任选地是盐形式)作为主要的 光学异构体或由其组成的组合物，并且具有(S,S)-式T1A作为光学杂质，任选地是盐形式， 具有以下结构： [1045] [1046] 或其盐，和/或基本上不含光学杂质(R,S)-式TIA和(S,R)-式TIA，各自任选地是盐 形式，它们分别具有以下结构： 126 CN 111601803 A 说　明　书 110/185 页 [1047] [1048] 其中，(R,R)-式T1A微管溶素化合物(任选地是盐形式)或其组合物是通过以下过 程制备的：在第二偶联剂的存在下，以及任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4a微管 溶素中间体(任选地是盐形式)或其组合物,其中，(R,R)-式4a(任选地是盐形式)是主要的 光学异构体，具有以下结构： [1049] [1050] 并且具有(S,S)-式4a作为主要的光学杂质，如果存在这种杂质的话，任选地是盐 形式，其具有以下结构： [1051] [1052] 和/或基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式4a和(R,S)-式4a，各自任选地是盐形 式，分别具有以下结构： [1053] [1054] 与二肽D-N-甲基-哌啶酰基(pipecolyl)-异亮氨酸-OH接触，任选地是盐形式，其 具有以下结构： [1055] [1056] 或任选地在第二受阻碱的存在下，与所述二肽的活化酯接触，其中，(R,R)-式4a组 127 CN 111601803 A 说　明　书 111/185 页 合物根据前文所述进行制备。 [1057] 对于更加优选的实施方式，(R,R)-式2a-4a和(R,R)-式T1A、及其光学异构体的任 一个中，R3是–CH3。 [1058] 2.3.4第9组实施方案 [1059] 在另一组实施方案中，本文提供了用于制备具有以下结构的微管溶素化合物(R, R)-式T1B(任选地是盐形式)、或者包含该微管溶素化合物或其盐或基本上由其组成的组合 物的方法： [1060] [1061] 或其组合物，其中(R,R)-式T1B或其盐是主要的光学异构体，并且具有光学异构体 杂质(任选地是盐形式)(S,S)-式T1B，其具有以下结构： [1062] [1063] 并且基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式TIB和(S,R)-式TIB，各自任选地是盐形 式，它们分别具有以下结构： [1064] [1065] 其中： [1066] 弯曲的虚线表示任选的环化； [1067] R2是任选取代的饱和C1-C6烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基，或R2是R2A，其中R2A 是–CH2OR2C，其中： [1068] R2C是饱和C1-C8烃基或不饱和C3-C8烃基，任选地被取代； [1069] 环状Ar表示5-元杂亚芳基，其中该杂亚芳基所示的需要的取代基是彼此1,3-关 系，并且在其他位置具有任选的取代基； [1070] R3是任选取代的C1-C6烃基，具体地，甲基、乙基或丙基； [1071] R4、R5和R6独立地是任选取代的C1-C6烃基； [1072] R4A是氢或任选取代的C1-C6烃基； 128 CN 111601803 A 说　明　书 112/185 页 [1073] R4B是任选取代的C1-C6烃基，或 [1074] R4A和R4B与它们连接的原子一起形成(如弯曲的虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或 8-元含氮杂环基，优选6-元含氮杂环基；以及 [1075] 一个RT是氢或任选取代的烃基；另一个是任选取代的C1-C6烃基或任选取代的C3-C6 杂烃基， [1076] 其中，每个任选取代的C1-C6烃基独立地选择， [1077] 其中，微管溶素化合物掺入了根据前述“第5组实施方案”的方法中的任一种制备 的微管缬氨酸化合物，具体地： [1078] 所述方法包括以下步骤： [1079] (a)在合适的溶剂中，在合适的过渡金属(II)催化剂，优选选自Cu(II)催化剂和Pd (II)催化剂的存在下，使式A的微管缬氨酸中间体： [1080] [1081] 与式B的氨基甲酸酯化合物接触： [1082] R3NHC(O)OR1(B) , [1083] 以形成式AB表示的微管缬氨酸化合物的对映异构体混合物，各自任选地是盐形 式： [1084] [1085] 其中，可变基团保留它们在式A和式B中的含义，或者包含该混合物或基本上由其 组成的组合物； [1086] (b)使式AB的对映异构体混合物或其组合物与合适的还原剂接触，其中所述还原 剂接触导致形成式R-1a表示的非对映异构体混合物或包含该混合物或基本上由其组成的 组合物： [1087] [1088] (b’)分离非对映异构体(各自任选地是盐形式)，以提供具有以下结构的(R,R)-式 1a微管缬氨酸化合物，或者包含该化合物或其盐作为主要的光学异构体或基本上由其组成 的组合物： [1089] [1090] 并且任选地具有光学杂质，(S,S)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： 129 CN 111601803 A 说　明　书 113/185 页 [1091] [1092] 或者(R,R)-式1a的组合物，基本上不含(R,S)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下 结构： [1093] [1094] 并且基本上不含(S,R)-式1a，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1095] [1096] 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式1a作为主要的光学杂质， [1097] 其中，(R,R)-式1a及其光学异构体的可变基团保留它们在式AB中的含义； [1098] (e)使(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)，或者包含该化合物或其 盐或基本上由其组成的组合物，与合适的烃化剂接触，以形成具有以下结构的(R,R)-式1b 微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)，或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物： [1099] [1100] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式1b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1101] [1102] 或者(R,R)-式1b的组合物，基本上不含(R,S)-式1b，任选地是盐形式，具有以下结 构： [1103] [1104] 并且基本上不含(S,R)-式1b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1105] [1106] 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式1b作为主要的光学杂质， [1107] 其中，(R,R)-式1b及其光学异构体中的R2如(R,R)-式T1B及其相应的光学异构体 130 CN 111601803 A 说　明　书 114/185 页 中的定义，并且其他可变基团如(R,R)-式1a及其相应的光学异构体中的定义， [1108] (f)使(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)或其组合物，与合适的水 解试剂接触，以形成具有以下结构的(R,R)-式2b(任选地是盐形式)，或者包含该光学异构 体或基本上由其组成的组合物： [1109] [1110] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式2b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1111] [1112] 或者(R,R)-式2b的组合物，基本上不含(R,S)-式2b，任选地是盐形式，其具有以下 结构： [1113] [1114] 并且基本上不含(S,R)-式2b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1115] [1116] 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式2b作为主要的光学杂质， [1117] (g)在第一偶联剂的存在下，以及任选地在第一受阻碱的存在下，使(R,R)-式2b非 对映异构体或其组合物与具有HN(RT)2结构的式C的化合物接触，或者任选地在第一受阻碱 的存在下，使式C化合物与(R,R)-式2b非对映异构体的活化酯接触，以形成具有以下结构的 微管溶素中间体(R,R)-式3b(任选地是盐形式)，或者包含该微管溶素中间体或基本上由其 组成的组合物： [1118] [1119] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式3b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1120] [1121] 或者(R,R)-式3b的组合物，基本上不含(R,S)-式3b，任选地是盐形式，具有以下结 131 CN 111601803 A 说　明　书 115/185 页 构： [1122] [1123] 并且基本上不含(S,R)-式3b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1124] [1125] 并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式3b作为主要的光学杂质； [1126] (h)使(R,R)-式3a(任选地是盐形式)或其组合物与合适的脱保护剂接触，以形成 具有以下结构的(R,R)-式4b(任选地是盐形式)，或者包含该微管溶素中间体或基本上由其 组成的组合物： [1127] [1128] 并且任选地具有光学杂质(S,S)-式4b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1129] [1130] 或者(R,R)-式4b的组合物，基本上不含(R,S)-式4b，任选地是盐形式，具有以下结 构： [1131] [1132] 并且基本上不含(S,R)-式4b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1133] [1134] 其中，(R,R)-式3b和(R ,R)-式4b、及其光学异构体的可变基团保留它们在式C和 (R,R)-式2b及其相应的光学异构体中的含义； [1135] (i)在第二偶联剂的存在下，并且任选地在第二合适的受阻碱的存在下，使(R,R)- 式4b(任选地是盐形式)或其组合物，与式S-D2的受保护的氨基酸(任选地是盐形式)接触， 或者任选地在第二合适的受阻碱的存在下，与其活化酯接触，其中，式S-D2受保护的氨基酸 132 CN 111601803 A 说　明　书 116/185 页 具有以下结构： [1136] [1137] 其中RPR是氨基保护基团， [1138] 其中，所述第二偶联剂或所述受保护的氨基酸活化酯接触提供了受保护的微管溶 素中间体(R,R)-式5b(任选地是盐形式)或其组合物，脱保护后提供具有以下结构的脱保护 的微管溶素中间体(R,R)-式6b(任选地是盐形式)： [1139] [1140] 其中，(R,R)-式5b和(R,R)-式6b及其相应的光学异构体的可变基团保留它们各自 在式4b中的含义，并且如相应的式T1B光学异构体所定义， [1141] 或者提供包含(R,R)-式6a(任选地是盐形式)作为主要的光学异构体或基本上由 其组成的组合物，任选地具有作为主要的光学杂质的(S,S)-式6b(任选地是盐形式)，其具 有以下结构： [1142] [1143] 或者包含(R,R)-式6b或其盐或基本上由其组成的组合物，基本上不含非对映异构 体(R,S)-式6b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1144] [1145] 和(S,R)-式6b，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1146] [1147] 并且如果存在光学异构体杂质，具有(S,S)-式6b(任选地是盐形式)作为主要的光 学杂质，或者 [1148] 步骤(h)之后是步骤(i')： [1149] (i')在第二偶联剂的存在下，以及任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4b (任选地是盐形式)或其组合物，与具有以下结构的(R,S)-D1-D2二肽(任选地是盐形式)接 触： 133 CN 111601803 A 说　明　书 117/185 页 [1150] [1151] 或者任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4b或其组合物与所述二肽的活化 酯接触，其中，所述二肽的可变基团如(R,R)-式T1B中的定义；以及 [1152] 其中，所述第二偶联剂与二肽或所述二肽活化酯接触提供了(R,R)-式T1B微管溶 素化合物(任选地是盐形式)或其组合物。 [1153] 在一些优选的实施方案中，步骤(i')提供了包含(R,R)-式T1B或基本上由其组成 的组合物，或步骤(i)提供了包含(R,R)-式6b或基本上由其组成的组合物，其中，所述组合 物基本上保留步骤(b’)得到的(R,R)-式1a的组合物、步骤(c)得到的(R,R)-式1b的组合物、 步骤(d)得到的(R,R)-式2b、步骤(g)得到的(R,R)-式3b、步骤(h)得到的(R,R)-式4b、或步 骤(i)得到的(R,R)-式5b的光学纯度。 [1154] 在提供微管溶素中间体(R,R)-(R ,R)-式6b(任选地是盐形式)或其组合物的那些 实施方案的一些中，微管溶素化合物(R,R)-式T1B(任选地是盐形式)或其组合物是通过以 下过程制备的：在第三偶联剂的存在下，以及任选地在第三合适的受阻碱的存在下，使微管 溶素中间体或其组合物与具有以下结构的式R-D1或其盐的含胺酸接触： [1155] [1156] 或者任选地在第三合适的受阻碱的存在下，使微管溶素中间体与所述含胺酸的活 化酯接触，其中，可变基团如(R,R)-式T1B中的定义， [1157] 其中，在优选的实施方案中，(R,R)-式6b组合物的光学纯度在如此获得的(R,R)- 式T1A组合物中基本上保留。 [1158] 对于式A和式AB的微管缬氨酸中间体、式R-1a、式R-1b和(R,R)-式2b的微管缬氨酸 化合物、及其光学异构体的优选实施方案如前文“第5组实施方案”所述。 [1159] 因此，在步骤(g)-(i)中的(R,R)-式3b、(R,R)-式4b、(R,R)-式5b和(R,R)-式6b的 微管溶素中间体、及其光学异构体、以及步骤(i')的T1B的微管溶素化合物的优选实施方案 中，环状Ar部分是C5杂亚芳基，任选地是盐形式，包括但不限于、噻唑、异噁唑、吡唑或咪唑 相关的C5杂亚芳基作为母体杂环。 [1160] 因此，一个优选的实施方案提供了制备具有以下结构的(R,R)-式6b微管溶素中间 体(任选地是盐形式)或其组合物的方法： [1161] [1162] 其中，(R,R)-式6b是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式6b(任 134 CN 111601803 A 说　明　书 118/185 页 选地是盐形式)作为主要的光学杂质，其具有以下结构： [1163] [1164] 和/或基本上不含(R,S)-式6b和(S,R)-式6b光学杂质，各自任选地是盐形式，分别 具有以下结构： [1165] [1166] [1167] 其中，所述方法还包括脱保护具有以下结构的(R,R)-式5b(任选地是盐形式)或其 组合物的步骤： [1168] [1169] 其中，(R,R)-式5b是主要的光学异构体，和/或基本上不含(R,S)-式5b和(S,R)-式 5b光学杂质，任选地是盐形式，分别具有以下结构： [1170] [1171] 其中，RPR是合适的氨基保护基团，(R,R)-式5b和(R,R)-式6b及其光学异构体中其 他可变基团的含义保留本文所述式4b的相应的光学异构体的含义，并且如前文该组实施方 案所述。 [1172] 在另一个优选的实施方案中，提供了一种制备具有以下结构的微管溶素化合物 (R,R)-式T1B(任选地是盐形式)或其组合物的方法： [1173] [1174] 其中，(R,R)-式T1B是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式T1A作 135 CN 111601803 A 说　明　书 119/185 页 为主要的光学杂质，具有以下结构： [1175] [1176] 或其盐，并且基本上不含(R,S)-式TIB和(S,R)-式TIB光学异构体杂质，各自任选 地是盐形式，分别具有以下结构： [1177] [1178] 其中，(R,R)-式T1B微管溶素化合物或其组合物通过以下过程制备：在第三偶联剂 的存在下，使(R,R)-式6b微管溶素中间体(任选地是盐形式)或其组合物与具有以下结构的 式R-D1的含胺酸(任选地是盐形式)接触： [1179] [1180] 或者使(R,R)-式6b微管溶素中间体或其组合物与所述含胺酸的活化酯接触，其 中，式R-D1优选是D-N-甲基-哌啶酸(pipecolic  acid)，任选地是盐形式，或其活化酯， [1181] 或者(R,R)-式T1B通过以下过程制备：在第二偶联剂的存在下，使具有以下结构的 (R,R)-式4b的微管溶素中间体(任选地是盐形式)： [1182] [1183] 或其组合物，其中(R,R)-式4b是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有 (S,S)-式4b(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [1184] [1185] 和/或基本上不含(R,S)-式4b(S,R)-式4b光学异构体杂质，任选地是盐形式，它们 136 CN 111601803 A 说　明　书 120/185 页 分别具有以下结构： [1186] [1187] 与具有以下结构的(R,S)-D1-D2的二肽接触： [1188] [1189] 任选地是盐形式，或者使(R,R)-式4b与所述二肽的活化酯接触， [1190] 其中，(R,R)-式5b或其组合物由前述(R,R)-式4b或其组合物进行制备， [1191] 其中，(R,R)-式4b或其组合物通过以下过程制备：脱保护具有以下结构的(R,R)- 式3b(任选地是盐形式)或其组合物： [1192] [1193] 其中，(R,R)-式3b是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S,S)-式3b作为 主要的光学杂质，其具有以下结构： [1194] [1195] 和/或基本上不含(R,S)-式3a和(R,S)-式3a光学杂质，任选地是盐形式，具有以下 结构： [1196] [1197] 上述结构又是通过以下过程制备的：在第一偶联剂的存在下，使HN(RT)2结构的式C 的化合物(其中，每个RT如式T1B或其盐的定义)，与微管缬氨酸化合物(R,R)-式2b(任选地 是盐形式)接触，或者使式C化合物与微管缬氨酸化合物的活化酯接触，其中(R,R)-式2b具 有以下结构： [1198] [1199] 或与其组合物，其中(R,R)-式2b是主要的光学异构体，具有其对映异构体(S,S)- 式2b作为主要的光学异构体杂质，任选地是盐形式，具有以下结构： 137 CN 111601803 A 说　明　书 121/185 页 [1200] [1201] 和/或基本上不含(R,S)-式2b和(S,R)-式2b光学异构体杂质，各自任选地是盐形 式，分别具有以下结构： [1202] [1203] 其中，(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物是通过“第5组实施方案”的方法制备的；以及 [1204] 其中，在微管溶素和微管缬氨酸结构及其中间体的任一种情况下，X1是＝N-且X2是 S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：–H和任选取代的 C1-C4烃基，优选选自：–H、-CH3和–CH2CH3。在优选的实施方案中，环状芳基是噻唑-1,3-二基。 [1205] 在更优选的实施方案中，式2b组合物包含具有以下结构的(R,R)-式2b(任选地是 盐形式)作为主要的光学异构体或基本上由其组成的组合物： [1206] [1207] 并且具有(S,S)-式2b作为主要的光学异构体杂质，任选地是盐形式，具有以下结 构： [1208] [1209] 并且基本上不含光学异构体杂质(R,S)-式2b和(S,R)-式2b，任选地是盐形式，具 有以下结构： [1210] [1211] 使得所述第一偶联剂或活化酯接触提供了式3b组合物，具有(R,R)-式3b作为主要 的光学异构体，其具有以下结构： [1212] [1213] 并且具有(S,S)-式3b作为主要的光学异构体杂质，并且基本上不含(R,S)-式3b和 (S,R)-式3b，它们分别具有以下结构： [1214] 138 CN 111601803 A 说　明　书 122/185 页 [1215] 脱保护式3b得到的式4b或者包含具有以下结构的(R,R)-式4b作为主要的光学异 构体或基本上由其组成的组合物： [1216] [1217] 并且具有(S,S)-式4b作为主要的光学异构体杂质，任选地是盐形式，具有以下结 构： [1218] [1219] 和/或基本上不含(R,S)-式4b和(S,R)-式4b光学异构体杂质，任选地是盐形式，它 们分别具有以下结构： [1220] [1221] 在这些优选的实施方案中，尤其优选的实施方案制备了具有以下结构的(R,R)-式 T1B微管溶素化合物(任选地是盐形式)： [1222] [1223] 其中，R3是甲基、乙基或丙基；一个RT是氢并且另一个是任选取代的C1-C6烃基， [1224] 或其组合物，其中(R,R)-式T1B是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S, S)-式T1B作为光学杂质，其具有以下结构： [1225] [1226] 或其盐，和/或基本上不含光学杂质(R,S)-式TIB和(R ,S)-式TIB，任选地是盐形 式，它们分别具有以下结构： 139 CN 111601803 A 说　明　书 123/185 页 [1227] [1228] 其中，(R,R)-式T1B微管溶素化合物或其组合物通过以下过程制备：在第三偶联剂 的存在下，使具有以下结构的(R,R)-式6b(任选地盐形式) [1229] [1230] 或其组合物，其中(R,R)-式6b是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S, S)-式6b(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [1231] [1232] 和/或基本上不含光学杂质(R,S)-式6b和(R,S)-式6b，任选地是盐形式，它们分别 具有以下结构： [1233] [1234] [1235] 与D-N-甲基-哌啶酸接触，或者使(R,R)-式6b微管溶素中间体或其组合物与D-N- 甲基-哌啶酸的活化酯接触，其中，(R,R)-式6b微管溶素中间体或其组合物通过以下过程制 备：脱保护具有以下结构的(R,R)-式5b(任选地是盐形式)： 140 CN 111601803 A 说　明　书 124/185 页 [1236] [1237] 或其组合物，其中(R,R)-式5b是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，(S, S)-式5b(任选地是盐形式)作为光学杂质，其具有以下结构： [1238] [1239] 和/或基本上不含光学杂质(R,S)-式5b和(R,S)-式5b，任选地是盐形式，它们分别 具有以下结构： [1240] [1241] 其中，(R,R)-式5b微管溶素中间体或其组合物通过以下过程制备：如前所述，在第 一偶联剂的存在下，使(R,R)-式4b微管缬氨酸化合物或其组合物与合适的N-保护的-Ile- OH接触，或者与该N-保护的氨基酸的活化酯接触，或者 [1242] (R ,R)-式T1B或其组合物通过以下过程制备：如前所述，在第二偶联剂的存在下， 使(R,R)-式4b微管缬氨酸或其组合物，与具有以下结构的二肽D-N-甲基-哌啶酰基-异亮氨 酸-OH(任选地是盐形式)接触： [1243] [1244] 或者使(R,R)-式4b微管缬氨酸或其组合物与所述二肽的活化酯接触。 [1245] 对于尤其优选的实施方案，(R,R)-式2b微管缬氨酸或其组合物根据“第5组实施方 案”所述方法制备，并且对于式2b-6b和式T1B中的任一种，在“第9组实施方案”的其他尤其 优选的实施方案中，R3是–CH3或–CH2CH2CH3。 [1246] 在上述方法的任一种情况下，合适的第一、第二和第三偶联剂是独立地选自以下 的偶联剂：N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)，2-乙氧基-1-乙氧 基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)，(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗 141 CN 111601803 A 说　明　书 125/185 页 啉基-碳正离子六氟磷酸盐(COMU)，N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟 基琥珀酰亚胺，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，二 苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)，氯-N,N,N’,N’-双(四亚甲基)甲脒鎓四氟硼酸盐，氟-N,N,N’, N’-双(四亚甲基)甲脒鎓六氟磷酸盐，N,N’-二环己基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基丙基)- N’-乙基碳二亚胺盐酸盐 ，1 ,1’-羰基二咪唑 ，2 -氯 - 1 ,3 -二甲基咪唑啉鎓 (imidazolidinium)四氟硼酸盐，(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐，O-(7- 氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐，2-氯-1-甲基吡啶鎓氢碘酸盐和 丙基磷酸酐。优选地，所述偶联剂独立地选自：HATU和COMU。 [1247] 优选地，在该组实施方案和本文所述方法的任一种中，R1是t-Bu，并且脱保护剂是 选自以下的酸：盐酸和三氟乙酸，更优选地，脱保护剂是三氟乙酸。 [1248] 对于“第6组实施方案”、“第7组实施方案”、“第8组实施方案”、“第9组实施方案”的 任一种实施方案，尤其优选的–N(RT)2部分中，一个RT是氢且另一个是饱和C1-C6烃基或不饱 和C3-C6烃基，被羧酸官能团和任选取代的苯基或任选取代的C5-C6-杂芳基取代。 [1249] 因此，在“第6组实施方案”、“第7组实施方案”、“第8组实施方案”或“第9组实施方 案”的尤其优选的实施方案中，使用本文所述的方法制备具有以下结构的(R,R)-式T1微管 溶素化合物(任选地是盐形式)： [1250] [1251] 或包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，(R,R)-式T1微管溶素化合物 是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式T的主要的光学杂质或其盐， 其具有以下结构： [1252] [1253] 可变基团的含义与主要的光学异构体(R,R)-式T1中的含义相同，其中： [1254] 下标m是0或1；R2是饱和C1-C6烃基或R2是R2A，其中R2A是–C(O)R2B，其中R2B是饱和C1- C 烃基或C 3 4 56 3-C8不饱和烃基；R 、R 和R 独立地是任选取代的C1-C6烃基；Z是任选取代的C1-C4 亚烃基或任选取代的C 7A2-C6亚烯基；以及R 是任选取代的苯基或任选取代的C5-C6-杂芳基。 [1255] 在那些尤其优选的实施方案的一些中，本发明的方法用于制备具有以下结构的 (R,R)-式T1微管溶素化合物(任选地是盐形式)： [1256] [1257] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，(R,R)-式T1微管溶素化合 142 CN 111601803 A 说　明　书 126/185 页 物是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式T1的主要的光学杂质或其 盐，其具有以下结构： [1258] [1259] 其中，R7A是任选取代的苯基；R8是氢或C1-C4烃基，其他可变基团如前文所述。 [1260] 在尤其优选的实施方案的另一些中，本发明的方法用于制备具有以下结构的(R, R)-式T1微管溶素化合物(任选地是盐形式)： [1261] [1262] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，(R,R)-式T1微管溶素化合 物是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式T1的主要的光学杂质或其 盐，其具有以下结构： [1263] [1264] 其中，下标u表示R7B取代基的数量，为0、1、2或3；每个R7B如果存在，是独立选择的 O-连接的取代基。 [1265] 在更加优选的实施方案中，本发明的方法用于制备具有以下结构的(R,R)-式T1微 管溶素化合物(任选地是盐形式)： [1266] [1267] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，(R,R)-式T1微管溶素化合 物是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式T1的主要的光学杂质或其 盐，其具有以下结构： 143 CN 111601803 A 说　明　书 127/185 页 [1268] [1269] 其中，下标u为0、1或2；R3是甲基、乙基、丙基、-CH2-OC(O)R3A、-CH CH(R3B)C(O)R3A2 或–CH(R3B)C(O)NHR3A，其中R3A是C 3B1-C6烃基，R 是H或C1-C6烃基，独立地选自R3A；并且每个R7B 如果存在，独立地是–OH或–OCH3。 [1270] 在其他特别优选的实施方案中，本发明的方法用于制备具有以下结构的(R,R)-式 T1微管溶素化合物(任选地是盐形式)： [1271] [1272] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，(R,R)-式T1微管溶素化合 物是主要的光学异构体，并且如果存在光学杂质，具有(S,S)-式T1的主要的光学杂质或其 盐，其具有以下结构： [1273] [1274] 其中，R2是不饱和C1-C6烃基或R2是R2A，其中R2A是–C(O)R2B，其中R2B是饱和C1-C6烃基 或C3-C8不饱和烃基；R3是C1-C6烃基；R4是甲基；R5和R6是天然或非天然疏水氨基酸(优选天然 氨基酸)的烃基侧链残基；以及 [1275] –N(RT)2部分是–NH(C1-C6烃基)，被–CO2H或其酯、或者被任选取代的苯基任选地取 代，或者是-N(C1-C6烃基)2，其中一个且仅一个C1-C6烃基是被–CO2H或其酯或者被任选取代 的苯基任选地取代，具体地，–NH(CH3)，-NHCH2CH2Ph和–NHCH2-CO2H，-NHCH2CH2CO2H和– NHCH2CH2CH2CO2H或 [1276] 所述–N(RT)2部分具有以下结构： [1277] [1278] 或其盐。 [1279] 在(R,R)-式T1和(S,S)-式T1的实施方案的任一个中，R2是-CH2-CH＝CH2。 [1280] 在尤其优选的实施方案中，(R,R)-式T1和(S,S)-式T1微管溶素化合物具有以下结 构： 144 CN 111601803 A 说　明　书 128/185 页 [1281] [1282] 其中，R2B是–CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2或-CH2C(CH3)3，具体 地，–CH3。 [1283] 3.1编号的实施方案 [1284] 以下编号的实施方案描述了本发明的各种非限制性方面。 [1285] 1 .一种用于制备任选地是盐形式的式AB的微管缬氨酸中间体或者作为对映异构 体混合物，或者包含该中间体或对映异构体混合物的组合物的方法： [1286] [1287] 其中，环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代 的C3-C 杂烃基；R68 是任选取代的C1-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代 的不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂 烯基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 145 CN 111601803 A 说　明　书 129/185 页 C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， 所述方法包括以下步骤： [1288] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1289] 使式A的化合物： [1290] [1291] 与式B：R3NHC(O)OR1(B)的化合物接触，其中，式A和B的可变基团如式AB所定义， [1292] 以形成式AB微管缬氨酸中间体或组合物。 [1293] 2.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物，或者包含该 化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [1294] [1295] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代 的C 63-C8杂烃基；R 是任选取代的C1-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代 的不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂 烯基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1296] 所述方法包括以下步骤： [1297] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1298] 使式A的微管缬氨酸中间体： [1299] [1300] 与式B：R3NHC(O)OR1(B)的氨基甲酸酯化合物接触， [1301] 以形成式AB的微管缬氨酸中间体，任选地是盐形式： [1302] 或 [1303] 作为对映异构体混合物，或者包含该中间体或对映异构体混合物或基本上由其组 成的组合物；以及 [1304] (b)使式AB微管缬氨酸中间体或组合物与合适的还原剂接触，具体是手性还原剂， 以形成(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物，任选地是盐形式或组合物，其中，式A、B和AB的可变 146 CN 111601803 A 说　明　书 130/185 页 基团如(R,R)-式1a所定义。 [1305] 3.如实施方案2所述的方法，其中，所述方法还包括从微管缬氨酸组合物分离连接 R6的碳原子具有反转的立体化学的式1a微管缬氨酸化合物的非对映异构体的步骤，以获 得： [1306] 包含(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的纯化的微管缬氨酸组合 物，通过手性HPLC确定，相对于(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物，不超过约10重量％的式1a非 对映异构体，具体地，不超过约5重量％，更具体地，不超过约1.5重量％，或者基本上不含非 对映异构体。 [1307] 4.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式2的微管缬氨酸化合物，或者包含该 化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [1308] [1309] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基或任选取代 的C3-C6杂烃基；以及R6是任选取代的C1-C8烃基， [1310] 所述方法包括以下步骤： [1311] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1312] 使式A的化合物： [1313] [1314] 其中，R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的 C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任 选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20 杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团，与式B：R3NHC(O)OR1(B)的化合物 接触， [1315] 以形成式AB的微管缬氨酸中间体： [1316] [1317] 或者作为对映异构体混合物或包含该中间体或对映异构体混合物的组合物，任选 地是盐形式； [1318] (b)使式AB微管缬氨酸中间体(任选地是盐形式)或组合物与合适的还原剂接触， 具体地还原剂是手性还原剂，以形成(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物： 147 CN 111601803 A 说　明　书 131/185 页 [1319] [1320] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式；以及 [1321] (c)使(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或组合物与合适的水解试剂接触，以形成式2 微管缬氨酸组合物或化合物，任选地是盐形式，其中，式A、B、AB和(R,R)-式1a的可变基团如 (R,R)-式2的定义。 [1322] 5.如实施方案4所述的方法，其中，所述方法还包括从微管缬氨酸组合物分离具有 与连接R6的碳原子的反转立体化学的式1a或式2微管缬氨酸化合物的非对映异构体的步 骤，以获得： [1323] 包含(R,R)-式1a或(R,R)-式2微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的纯化的微管 缬氨酸组合物，任选地是盐形式，根据手性HPLC确定，相对于(R,R)-式1a或(R,R)-式2微管 缬氨酸化合物，不超过约10重量％的非对映异构体，具体地，不超过约5重量％，更具体地， 不超过约1.5重量％或者，基本上不含非对映异构体。 [1324] 6.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式2a的微管缬氨酸化合物，或者包含该 化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [1325] [1326] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R2B是任选取代的饱和C1-C8烃基，任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或 任选取代的C2-C8炔基；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使 得R1-OC(＝O)-是合适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3- C8烃基或任选取代的C3-C8杂烃基；以及R6是任选取代的C1-C8烃基， [1327] 所述方法包括以下步骤： [1328] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1329] 使式A的化合物： [1330] [1331] 其中，R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的 C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任 选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20 杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1332] 与式B：R3NHC(O)OR1(B)的化合物接触， [1333] 以形成式AB的微管缬氨酸中间体，任选地是盐形式： 148 CN 111601803 A 说　明　书 132/185 页 [1334] [1335] 或者作为对映异构体混合物或包含该中间体或对映异构体混合物或基本上由其 组成的组合物； [1336] (b)使式AB微管缬氨酸中间体或组合物与合适的还原剂接触，具体地还原剂是手 性还原剂，以形成(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物： [1337] [1338] 或包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式； [1339] (c)使(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或组合物与合适的水解试剂接触，以形成(R, R)-式2的微管缬氨酸化合物： [1340] [1341] 或包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式；以及 [1342] (d)使(R,R)-式2微管缬氨酸化合物或组合物与合适的酰化剂接触，以形成(R,R)- 式2a微管缬氨酸组合物或化合物，任选地是盐形式，其中，式A、B、AB、(R,R)-式1a和(R,R)- 式2的可变基团如(R,R)-式2a的定义。 [1343] 7.如实施方案6所述的方法，其中，所述方法还包括从微管缬氨酸组合物分离连接 R6的碳原子具有反转立体化学的式1、2或2a微管缬氨酸化合物的非对映异构体的步骤，以 获得： [1344] 包含(R,R)-式1a、(R,R)-式2或(R,R)-式2a微管缬氨酸化合物或基本上由其组成 的纯化的微管缬氨酸组合物，任选地是盐形式，相对于(R,R)-式1a、(R,R)-式2或(R,R)-式 2a微管缬氨酸化合物，不超过约10重量％的具有反转的R6立体化学的非对映异构体，具体 地，不超过约5重量％，更具体地，不超过约1重量％， [1345] 或者纯化的微管缬氨酸组合物，其中，相对于具有反转的R6立体化学的非对映异 构体，(R,R)-式1a、(R,R)-式2或(R,R)-式2a微管缬氨酸化合物为约80％非对映异构体过量 (d.e.)或更大，具体地，为约90％d.e.、约95％d.e.或约97％d.e。 [1346] 8.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式1b的微管缬氨酸化合物，或者包含该 化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [1347] [1348] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 149 CN 111601803 A 说　明　书 133/185 页 适的氮保护基团； [1349] R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯 基或任选取代的C -C 炔基或R2是R2A，其中R2A是–CH R2C，其中R2C2 8 2 是任选取代的饱和C1-C8醚或 任选取代的不饱和C2-C8醚； [1350] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基；R6是任选取代的C1-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱 和C1-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、 任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24 杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1351] 所述方法包括以下步骤： [1352] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1353] 使式A的化合物： [1354] [1355] 与式B：R3NHC(O)OR1(B)的化合物接触， [1356] 以形成式AB的微管缬氨酸中间体： [1357] [1358] 或者作为对映异构体混合物，或者包含该中间体或对映异构体混合物或基本上由 其组成的组合物； [1359] (b)使式AB微管缬氨酸中间体或组合物与合适的还原剂接触，具体地还原剂是手 性还原剂，以形成(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物： [1360] [1361] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式；以及 [1362] 使(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或组合物与合适的烃化剂接触，以形成(R,R)-式 1b微管缬氨酸组合物或化合物，任选地是盐形式，其中，式A、B、AB和(R,R)-式1a的可变基团 如(R,R)-式1b所定义。 [1363] 9.如实施方案8所述的方法，其中，所述方法还包括从微管缬氨酸组合物分离连接 R6的碳原子具有反转立体化学的(R,R)-式1a或(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物的非对映异 构体的步骤，以获得： [1364] 包含(R,R)-式1a或(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的纯化的微 管缬氨酸组合物，任选地是盐形式，相对于(R,R)-式1a或(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物，不 超过约10重量％的具有反转的R6反转立体化学的非对映异构体，具体地，不超过约5重 150 CN 111601803 A 说　明　书 134/185 页 量％，更具体地，不超过约1重量％，或者 [1365] 纯化的微管缬氨酸组合物，其中，相对于具有反转的R6立体化学的非对映异构体， (R,R)-式1a或(R,R)-式1b微管缬氨酸化合物为约80％非对映异构体过量(d.e.)或更大，具 体地，约90％d.e.、约95％d.e.或约97％d.e。 [1366] 10.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式2b的微管缬氨酸化合物，或者包含 该化合物或基本上由其组成的组合物的方法： [1367] [1368] 其中：环状Ar是亚苯基、或5-或6-元含氮杂亚芳基，其余位置任选地被取代；R1是 苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合适的保 护基团； [1369] R2是任选取代的饱和C1-C8烃基，任选取代的不饱和C3-C6烃基，任选取代的C2-C6烯 基或任选取代的炔基，或R2是R2A，其中R2A是–CH 2C2R ，其中R2C是任选取代的饱和C1-C8醚、任选 取代的不饱和C2-C8醚；并且R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或 任选取代的C3-C8杂烃基；以及R6是任选取代的C1-C8烃基， [1370] 所述方法包括以下步骤： [1371] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1372] 使式A的化合物： [1373] [1374] 其中，R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的 C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任 选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20 杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1375] 与式B：R3NHC(O)OR1(B)的化合物接触， [1376] 以形成式AB的微管缬氨酸中间体，任选地是盐形式： [1377] [1378] 或者作为对映异构体混合物，或者包含该中间体或对映异构体混合物或基本上由 其组成的组合物； [1379] (b)使式AB微管缬氨酸中间体或组合物与合适的还原剂接触，具体还原剂是手性 还原剂，以形成(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物： 151 CN 111601803 A 说　明　书 135/185 页 [1380] [1381] 或者包含该化合物或基本上由其组成获得组合物，任选地是盐形式； [1382] (e)使(R ,R)-式1a微管缬氨酸化合物或组合物与合适的烃化剂接触，以形成(R, R)-式1b的微管缬氨酸化合物，任选地是盐形式： [1383] [1384] 其中，R2如前文(R ,R)-式2b或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物所定 义；以及 [1385] (f)使(R ,R)-式1b微管缬氨酸化合物或组合物与合适的水解剂接触，以形成(R, R)-式2b微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)或组合物，其中，式A、B、AB、(R,R)-式1a和(R, R)-式1b的可变基团如(R,R)-式2b所定义。 [1386] 11.如实施方案10所述的方法，其中，所述方法还包括从微管缬氨酸组合物分离连 接R6的碳原子具有反转立体化学的(R,R)-式1a，(R,R)-式1b或(R,R)-式2b微管缬氨酸化合 物的非对映异构体，以获得： [1387] 包含(R,R)-式1a、(R,R)-式1b或(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物或基本上由其组成 的纯化的微管缬氨酸组合物，任选地是盐形式，相对于(R,R)-式1a或(R,R)-式1b微管缬氨 酸化合物，不超过约10重量％具有反转的R6立体化学的非对映异构体，具体地，不超过约5 重量％，更具体地，不超过约1重量％，或者 [1388] 纯化的微管缬氨酸组合物，其中，相对于具有反转的R6立体化学的非对映异构体， (R ,R)-式1a，(R ,R)-式1b或(R ,R)-式2b微管缬氨酸化合物为约80％非对映异构体过量 (d.e.)或更大，具体地为约90％d.e.、约95％d.e.或约97％d.e.。 [1389] 12.如实施方案6或7所述的方法，其中，酰化剂的结构为R2BC(O)Cl或[R2BC(O)]2O， 其中，R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C8烃基、C2-C8烯基或任选取代的C2-C4炔基。 [1390] 13 .如实施方案12所述的方法、其中、R2B是-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH2CH＝ CH2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH3)＝CH2、-CH＝CH2或-CHC≡CH，具体地–CH3。 [1391] 14.如实施方案8-11中任一项所述的方法，其中，烃化剂是R2AX或R2C-CH X，其中R2A2 是C -C 烃基，R2C1 8 是C1-C8醚，X是Br、I、-OTs、-OMs或其他合适的离去基团。 [1392] 15 .如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，过渡金属(II)催化剂包含Cu (II)。 [1393] 16 .如实施方案15所述的方法，其中，过渡金属(II)催化剂包含Cu(OTf) 2、Cu (SbF6)2或CuCl2，具体地Cu(OTf)2。 [1394] 17.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，合适的极性非质子溶剂是乙腈、 二氯甲烷、THF、二噁烷、或两种或三种这些溶剂的混合物，具体地二氯甲烷。 [1395] 18.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，手性还原剂包括BH3-DMS。 [1396] 19.如实施方案18所述的方法，其中，所述手性还原剂还包括(S)-(-)-CBS。 152 CN 111601803 A 说　明　书 136/185 页 [1397] 20 .如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，环状Ar是5-元含氮1,3-杂亚芳 基，其余位置任选地被取代。 [1398] 21.如实施方案2-20中任一项所述的方法，其中，(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物具 有以下结构： [1399] [1400] 其中：X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH3或–CH2CH3；以及 [1401] R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)- 是合适的氮保护基团；以及R3是任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基或 任选取代的C -C 杂烃基；R63 6 是C1-C6烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的 不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯 基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 C -C 杂芳基或任选取代的C -C 杂环基或其他部分，使得R75 24 3 20 -O-提供合适的羧酸保护基团。 [1402] 22.如实施方案4-7中任一项所述的方法，其中，(R,R)-式2微管缬氨酸化合物(任 选地是盐形式)具有以下结构： [1403] [1404] 其中：X是NH或O；且X1是＝N-；且X2是S、O或–N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是–N (RX2)-，其中RX1和RX2各自独立地选自：-H、-CH3和–CH2CH3；以及 [1405] R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)- 是合适的氨基保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基或任 选取代的C -C 杂烃基；以及R63 6 是C1-C6烃基。 [1406] 23.如实施方案6或7、或实施方案10或11所述的方法，其中，(R,R)-式2a或(R,R)- 式2b微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)分别具有以下结构： [1407] [1408] 其中：R1是任选取代的苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基或其他部分，使得R1-OC(＝ O)-是合适的氮保护基团； [1409] R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基、任选取代的C2-C6烯 基或任选取代的炔基，或R2是R2A其中R2A是–CH R2C2 ； [1410] X是NH或O；且X1是＝N-；且X2是S、O或NRX2，或X1是＝CRX1；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH 或–CH CH ；R2B 2C3 2 3 和R 如前所述；以及 [1411] R3是任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基或任选取代的C3-C6 杂烃基；以及R6是C1-C6烃基。 153 CN 111601803 A 说　明　书 137/185 页 [1412] 24.如实施方案21、22或23所述的方法，其中，X1是＝N。 [1413] 25.如实施方案21-24中任一项所述的方法，其中，X2是S。 [1414] 26.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，R3是任选取代的C1-C4烃基。 [1415] 27.如实施方案26的方法，其中，R3是甲基。 [1416] 28.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，R6是C1-C4烃基。 [1417] 29.如实施方案28的方法，其中，R6是异丙基。 [1418] 30.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中，R1是叔丁基。 [1419] 31 .如实施方案21所述的方法，其中，(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物具有以下结 构： [1420] [1421] 其中，R3是任选取代的C1-C4烃基。 [1422] 32 .如实施方案31所述的方法，其中，(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物具有以下结 构： [1423] [1424] 其中，R7是-CH3或–CH2CH3。 [1425] 33.如实施方案22或23所述的方法，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b微 管缬氨酸化合物(各自任选地是盐形式)分别具有以下结构： [1426] [1427] 其中，R2是饱和C1-C4烃基，具体地，–CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3或 [1428] R2是R2A，其中R2A是–CH R2C，其中R2C是C -C 醚，具体地R2C2 1 4 是-OCH3或-OCH2CH3； [1429] R2B是饱和C1-C4烃基、不饱和C3-C6烃基或C2-C6烯基，具体地–CH3、–CH2CH3、-CH (CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2CH＝CH2、-CH2C(CH3)＝CH2、-CH＝CH2、-CH＝CHCH3或– C(CH3)＝CH2；以及 [1430] R3是任选取代的C1-C4烃基，具体地，–CH3或–CH2CH2CH3。 [1431] 34.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式Ti-1的微管溶素中间体，或者包含 该中间体或基本上由其组成的组合物的方法： 154 CN 111601803 A 说　明　书 138/185 页 [1432] [1433] 其中：环状Ar是5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代； [1434] R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)- 是合适的氮保护基团； [1435] R2是–H或任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基、任选取代的C2- C6烯基或任选取代的C2-C6炔基，或者 [1436] R2是R2A其中R2A是–CH R2C2 ，其中R2C是任选取代的饱和C1-C6醚或任选取代的不饱和 C2-C6醚，或R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B是任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6 烃基、任选取代的C2-C6烯基或任选取代的C2-C6炔基； [1437] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基； [1438] R6是任选取代的C1-C8烃基；以及 [1439] 一个RT是氢、任选取代的饱和C T1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个R 是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取 代的C3-C8杂烃基， [1440] 所述方法包括以下步骤： [1441] (a)在第一偶联剂的存在下，以及任选地在第一受阻碱的存在下，使(R,R)-式2、 (R,R)-式2a或(R,R)-式2b的微管缬氨酸化合物，任选地是盐形式，其中，(R,R)-式2、(R,R)- 式2a和(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物分别具有以下结构： [1442] [1443] 或者包含这些微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的组合物，其中，R1是苯基、叔 丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合适的氮保护基 团， [1444] R2是任选取代的饱和C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基、任选取代的C2-C6烯 基或任选取代的C -C 炔基，或R2是R2A其中R2A是–CH R2C2 6 2 ，其中R2C是任选取代的饱和C1-C6醚或 任选取代的不饱和C2-C6醚，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b的其他可变基团如(R,R)- 式T1所定义，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物或组合物分别 155 CN 111601803 A 说　明　书 139/185 页 根据实施方案7、9和11所述的方法进行制备， [1445] 与具有HN(RT)2结构的式C的胺化合物(任选地是盐形式)接触，其中，每个RT如(R, R)-式Ti-1所定义， [1446] 以形成(R,R)-式Ti-1微管溶素中间体、或者包含该中间体或基本上由其组成的组 合物，任选地是盐形式，其中，(R,R)-式Ti-1微管溶素中间体具有(R,R)-式3、(R,R)-式3a或 (R,R)-式3b的结构： [1447] [1448] 其中，R2保留其在(R,R)-式2b中的含义，并且(R,R)-式3、(R,R)-式3a和(R,R)-式 3b的其他可变基团如式C和(R,R)-式Ti-1所定义。 [1449] 35.一种用于制备任选地是盐形式的(R,R)-式Ti-2的微管溶素中间体，或者包含 该中间体或基本上由其组成的组合物的方法： [1450] [1451] 其中：环状Ar是5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代，其中： [1452] R2是–H或任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2- C8烯基或任选取代的C2-C8炔基，或 [1453] R2是R2A，其中R2A是–CH R2C，其中R2C2 是任选取代的C1-C8醚，任选取代的C2-C8烯基或 任选取代的C -C 炔基，或R2A2 8 是–C(＝O)R2B，其中R2B是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代 的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C2-C8炔基；以及 [1454] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基； [1455] R6是任选取代的C1-C8烃基；以及 [1456] 一个RT是氢、任选取代的饱和C1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个RT 是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取 代的C3-C8杂烃基， [1457] 所述方法包括以下步骤： [1458] (g)在第一偶联剂的存在下，并且任选地在第一受阻碱的存在下，使(R,R)-式2、 (R,R)-式2a或(R,R)-式2的微管缬氨酸化合物，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b 156 CN 111601803 A 说　明　书 140/185 页 微管缬氨酸化合物分别具有以下结构： [1459] [1460] 或者包含那些化合物中的一种或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式，或 者其中R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是 合适的氮保护基团；以及 [1461] R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯 基或任选取代的C -C 炔基，或R2是R2A2 8 ，其中R2A是–CH2R2C，其他可变基团如(R,R)-式Ti-2的 定义，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物(各自任选地是盐形 式)或组合物分别根据实施方案7、9和11所述的方法进行制备， [1462] 与HN(RT)2结构的式C的胺(任选地是盐形式)接触，其中，每个RT如(R,R)-式Ti-2所 定义， [1463] 以形成具有以下结构(R,R)-式3、(R,R)-式3a或(R,R)-式3b的(R,R)-式Ti-1微管 溶素中间体(任选地是盐形式，和/或作为其活化酯)： [1464] [1465] 或者包含那些微管溶素中间体中的一种或基本上其由其组成的组合物，其中，R1 和R2如(R,R)-式2b所定义，其他可变基团如(R,R)-式Ti-2所定义；以及 [1466] (h)使(R,R)-式3、(R,R)-式3a或(R,R)-式3b微管溶素中间体(任选地是盐形式)或 组合物与合适的第一脱保护剂接触，以形成(R,R)-式Ti-2微管溶素中间体或组合物，其中， (R,R)-式Ti-2微管溶素中间体分别具有以下结构(R,R)-式4，(R,R)-式4a或(R,R)-式4b： 157 CN 111601803 A 说　明　书 141/185 页 [1467] [1468] 其中，R2如(R,R)-式2b所定义，其他可变基团如(R,R)-式Ti-2所定义。 [1469] 36.一种用于制备具有以下结构的微管溶素中间体或微管溶素化合物： [1470] [1471] 或者包含该微管溶素化合物或中间体或基本上由其组成的组合物的方法，任选地 是盐形式，其中：环状Ar是5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基其余位置任选地被取代； [1472] R2是–H或任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2- C8烯基或任选取代的C 2 2A 2A 2C 2C2-C8炔基，或R 是R ，其中R 是–CH2R ，其中R 是任选取代的饱和C1- C 醚或任选取代的不饱和C -C 醚，或R2A 2B 2B8 2 8 是–C(＝O)R ，其中R 是任选取代的饱和C1-C8烃基、 任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C2-C8炔基；以及 [1473] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8杂 烃基；R5和R6独立地是任选取代的C1-C8烃基； [1474] 一个RT是氢、任选取代的饱和C1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个RT 是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取 代的C3-C8杂烃基；以及 [1475] R9是–OR1A，使得微管溶素中间体是(R,R)-式Ti-3，其中，R1A，独立于R1，是任选取代 的苯基、叔丁基、9-芴基、或烯丙基或其他部分，使得R1A-OC(＝O)-独立地是合适的氮保护基 团；以及 [1476] 或者R9具有以下结构： [1477] 或其盐，使得微管溶素化合物是(R,R)-式T， [1478] 其中，R4是C1-C4烃基；R4a是氢或任选取代的C1-C8烃基；R4B是任选取代的C1-C8烃基， 或它们与连接的氮原子一起形成(如弯曲的虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或8-元含氮杂 环基；波浪线指示共价连接至(R,R)-式T微管溶素化合物的其他部分的位点， [1479] 所述方法包括以下步骤： [1480] (g)在第一偶联剂的存在下，并且任选地在第一受阻碱的存在下，使(R,R)-式2、 (R,R)-式2a或(R,R)-式2b的微管缬氨酸中间体或者包含这些中间体或基本上由其组成的 组合物，任选地是盐形式，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物分 158 CN 111601803 A 说　明　书 142/185 页 别具有以下结构： [1481] [1482] [1483] 其中，R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的 C -C 烯基或任选取代的C -C 炔基或R2is  R2A，其中，R2A是–CH R2C2 8 2 8 2 ，其中其他可变基团如(R, R)-式Ti-3的定义，其中，(R,R)-式2、(R,R)-式2a或(R,R)-式2b微管缬氨酸化合物或组合物 分别根据实施方案7、9或11进行制备， [1484] 与HN(RT)2结构的式C的胺(任选地是盐形式)接触，其中每个RT如(R,R)-式Ti-3所 定义， [1485] 以形成(R,R)-式Ti-1微管溶素中间体(任选地是盐形式)或者包含该中间体或其 盐的组合物，其中，(R,R)-式Ti-1微管溶素中间体分别具有以下结构(R,R)-式3、(R,R)-式 3a或(R,R)-式3b: [1486] [1487] 其中，R1和R2如(R,R)-式2、(R,R)-式2a和(R,R)-式2b所定义，其他可变基团如(R, R)-式Ti-3所定义； [1488] (h)使(R,R)-式3、(R,R)-式3a或(R,R)-式3b微管溶素中间体或其组合物，与第一 合适的脱保护剂接触，以形成(R,R)-式Ti-2微管溶素中间体，其中，(R,R)-式Ti-2微管溶素 中间体具有以下结构(R,R)-式4、(R,R)-式4a或(R,R)-式4b： 159 CN 111601803 A 说　明　书 143/185 页 [1489] [1490] 其中，可变基团保留它们在(R,R)-式3、(R,R)-式3a或(R,R)-式3b中的含义； [1491] (i)在第二偶联剂的存在下，并且任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4、 (R,R)-式4a或(R,R)-式4b微管溶素中间体或其组合物，与式D2的受保护的氨基酸，任选地 是盐形式，具有以下结构： [1492] [1493] 或其活化酯接触，其中R1A(独立于R1)，是任选取代的苯基、叔丁基、9-芴基、或烯丙 基或其他部分，使得R1A-OC(＝O)-独立地是合适的氮保护基团，以及R5如(R,R)-式Ti-3所定 义， [1494] 以形成(R,R)-式Ti-3微管溶素中间体或其组合物，包含该中间体或基本上由其组 成的组合物，任选地是盐形式， [1495] 其中，(R,R)-式Ti-3微管溶素中间体具有以下结构(R,R)-式5、(R,R)-式5a或(R, R)-式5b： [1496] [1497] [1498] 其中，可变基团如D1所定义，其他可变基团保留它们在(R,R)-式4、(R,R)-式4a或 (R,R)-式4b中的含义，或者 160 CN 111601803 A 说　明　书 144/185 页 [1499] (i')在第二偶联剂的存在下，并且任选地在第二受阻碱的存在下，使(R,R)-式4、 (R,R)-式4a或(R,R)-式4b微管溶素中间体(任选地是盐形式)、或者包含这些中间体或基本 上由其组成的组合物与具有以下结构的式D1-D2(任选地是盐形式)： [1500] [1501] 或其活化酯接触，其中，R4、R4A、R4B和R5如(R,R)-式Ti-3所定义，以形成(R,R)-式T 微管溶素化合物、或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式，其中， 制备得到的(R,R)-式T微管溶素化合物具有以下结构(R,R)-式T1、(R,R)-式T1A或(R,R)-式 T1B： [1502] [1503] 其中，R2是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的 C -C 烯基或任选取代的C -C 炔基，或R2是R2A，其中R2A是–CH R2C2 8 2 8 2 ，其他可变基团保留它们在 二肽D1-D2和(R,R)-式4、(R,R)-式4a或(R,R)-式4b中的含义。 [1504] 37.一种制备任选地是盐形式的(R,R)-式T的微管溶素化合物、或者包含该化合物 或基本上由其组成的组合物的方法： [1505] [1506] 其中，环状Ar是5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代； [1507] R2是–H或任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2- C 2 2A 2A 2C 2C8烯基或任选取代的C2-C8炔基，或R 是R ，其中R 是–CH2R ，其中R 是任选取代的饱和C1- C 醚或任选取代的不饱和C -C 醚，或R2A是–C(＝O)R2B8 2 8 ，其中R2B是任选取代的饱和C1-C8烃基、 任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C2-C8炔基； 161 CN 111601803 A 说　明　书 145/185 页 [1508] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基；R4是C1-C4烃基；R4a是氢或任选取代的C1-C8烃基；R4B是任选取代的C1-C8烃基，或者它 们与连接的碳原子一起形成(如弯曲不虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或8-元含氮杂环基； 以及R5和R6独立地是任选取代的C1-C8烃基； [1509] 一个RT是氢、任选取代的饱和C1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个RT 是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取 代的C3-C8杂烃基； [1510] 所述方法包括以下步骤： [1511] (i)使微管溶素中间体，其中所述化合物具有结构(R,R)-式Ti-3： [1512] [1513] 或者包含该微管溶素中间体或基本上由其组成的组合物，其中R9是–OR1A，其中R1A 是任选取代的苯基、叔丁基、9-芴基、或烯丙基或其他部分，使得R1A-OC(＝O)-是合适的氮保 护基团，其他可变基团如(R,R)-式T所定义；以及其中(R,R)-式Ti-3微管溶素中间体根据实 施方案36的步骤(g)和(h)进行制备， [1514] 与第二合适的脱保护剂接触，以提供(R,R)-式Ti-4的微管溶素中间体： [1515] [1516] 或者包含该中间体或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式，其中，可变基团 保留它们在(R,R)-式Ti-3中的含义；以及 [1517] (i')在第三偶联剂的存在下，并且任选地在第三受阻碱的存在下，使(R,R)-式Ti- 4微管溶素中间体(任选地是盐形式)或组合物与具有以下结构的式D1-D2的二肽(任选地是 盐形式)： [1518] [1519] 或其活化酯接触，以形成具有(R,R)-式T1、(R,R)-式T1A或(R,R)-式T1B结构的(R, R)-式T微管溶素化合物或其组合物： 162 CN 111601803 A 说　明　书 146/185 页 [1520] [1521] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式，其中，R2是任选 取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的 C2-C8炔基，或R2是R2A，其中R2A是–CH2R2C，其中R2B和R2C以及其他可变基团如(R,R)-式T所定 义。 [1522] 38.一种制备任选地是盐形式的(R,R)-式T1A的微管溶素化合物、或者包含该化合 物或基本上由其组成的组合物的方法： [1523] [1524] 其中，环状Ar是5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代；R2B是任选取 代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C2-C8 炔基；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8杂烃 基； [1525] R4是C1-C4烃基；R4a是氢或任选取代的C1-C8烃基；R4B是任选取代的C1-C8烃基，或者 它们与连接的氮原子一起形成(如弯曲的虚线所示)任选取代的5-、6-、7-或8-元含氮杂环 基；以及R5和R6独立地是任选取代的C1-C8烃基； [1526] 一个RT是氢、任选取代的饱和C1-C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个RT 是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取 代的C3-C8杂烃基； [1527] 所述方法包括以下步骤： [1528] (i)使(R,R)-式5的微管溶素中间体： 163 CN 111601803 A 说　明　书 147/185 页 [1529] [1530] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，其中，R1A是任选取代的苯基、叔丁 基、9-芴基、或烯丙基或其他部分，使得R1A-OC(＝O)-独立地是合适的氮保护基团，其他可变 基团如(R,R)-式T1A所定义，其中，微管溶素中间体根据实施方案36的步骤(g)-(i)进行制 备， [1531] 与第二合适的脱保护剂接触，以形成(R,R)-式6的微管溶素中间体： [1532] [1533] 或者包含该化合物或基本上由其组成的组合物，任选地是盐形式；以及 [1534] (i”)在第三偶联剂的存在下，任选地在第三受阻碱的存在下，使(R,R)-式6微管溶 素中间体或组合物与具有以下结构的式D1的非天然氨基酸： [1535] [1536] 任选地是盐形式，或其活化酯接触，其中D1的可变基团如(R,R)-式T1A所定义，以 提供(R,R)-式T1A微管溶素组合物或化合物，任选地是盐形式。 [1537] 39.如实施方案34-38中任一项所述的方法，其中，-N(RT)2中的一个RT是–H或C1-C4 烃基且另一个RT是任选取代的(C6-C10芳基)-C1-C4烃基-或任选取代的(C5-C10杂芳基)-C1-C4 烃基，或者一个RT是C1-C4烃基且另一个RT是独立选择的C1-C4烃基，被–CO2H或其酯，和/或被 任选取代的苯基任选地取代。 [1538] 40 .如实施方案34-38中任一项所述的方法，其中，-N(RT)2是-NH(C1-C6烃基)，其 中，C1-C6烃基是饱和C1-C4烃基或不饱和C3-C6烃基，并且被–CO2H或其酯，和/或任选取代的 苯基取代，具体地，–NH(CH3)、-NHCH2CH2Ph、–NHCH2-CO2H、-NHCH2CH2CO2H和–NHCH2CH2CH2CO2H。 [1539] 41.如实施方案34-38中任一项所述的方法，其中，-NH(RT)2具有以下结构： [1540] [1541] 或其盐或C1-C6酯，其中，波浪线表示与微管溶素中间体或微管溶素化合物的其余 部分共价连接的位点；Z是任选取代的C1-C4亚烃基或任选取代的C -C 亚烯基；R8A2 6 是任选取 代的C1-C4烃基；R8B是任选取代的苯基或任选取代的5-或6-元杂芳基。 [1542] 42.如实施方案41所述的方法，其中，-NH(RT)2具有以下结构： 164 CN 111601803 A 说　明　书 148/185 页 [1543] [1544] 或其盐或C1-C6酯，其中，下标u是0、1、2或3，Z是C1-C4亚烃基或C2-C6亚烃基；下标u 是0时，R8C不存在，当下标u是1、2或3时，存在1、2或3的独立选择的R8C取代基；R8A是–H或C1-C4 烃基；如果存在，每个R8C独立地选自：卤素、O-连接的取代基和N-连接的取代基，具体地选 自–OH和NH2。 [1545] 43.如实施方案42所述的方法，其中，-NH(RT)2具有以下结构： [1546] [1547] 或其盐C1-C6酯，具体地，甲基、乙基或烯丙基酯，其中，下标u是0或1；下标n是0、1或 2；如果存在，R8C是–OH或–NH2。 [1548] 44.如实施方案34-43中任一项所述的方法，其中，环状Ar是5-元含氮1,3-杂亚芳 基，其余位置任选地被取代。 [1549] 45.如实施方案44所述的方法，其中，5-元含氮1,3-杂亚芳基具有以下结构： [1550] [1551] 其中：X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH3和–CH2CH3。 [1552] 46.如实施方案36、37或38所述的方法，其中，微管溶素化合物具有以下结构： [1553] [1554] 或其盐或C1-C4酯，其中，下标m是0或1；R2是–H或R2是R2A，其中R2A是任选取代的C1- C4烃基或R2A–CH 2C 2C2R ，其中R 是–OCH3、-OCH2CH3或任选取代的C 2A2-C6烯基，或R 是–C(O)R2B，其 中R2B是任选取代的饱和C1-C4烃基或任选取代的不饱和C3-C6烃基；以及 [1555] X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独 立地选自：-H、-CH3和–CH2CH3。 [1556] 47.如实施方案45或46所述的方法，其中，X1是＝N-。 165 CN 111601803 A 说　明　书 149/185 页 [1557] 48.如实施方案36-47中任一项所述的方法，其中，R5是–CH(CH3)CH2CH3。 [1558] 49.如实施方案48所述的方法，其中，微管溶素化合物具有以下结构： [1559] [1560] 或其盐或C1-C4酯，具体地，甲基、或烯丙基，其中下标u是0或1；R2是饱和C1-C4烃基、 不饱和C3-C6烃基或C2-C6烯基，或R2是R2A，其中R2A是–CH R2C2 ，其中R2C是饱和C1-C6醚或不饱和 C -C 醚；R3是–CH 、-CH CH 、-CH CH CH 或–C(R3A)(R3A)C(＝O)-XC，其中XC是–OR3B 3C2 6 3 2 3 2 2 3 或–N(R ) (R3C)，其中，R3A、R3B和R3C各自独立地选自：–H和–CH3；如果存在，R8C是–OH。 [1561] 50.如实施方案49所述的方法，其中，R2是–CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2、- CH2CH(CH3) 2、-CH2C(CH3)3、-CH＝CH2或–C(CH3)＝CH2或R2A–CH R2C2 ，其中R2C是-OCH3或– OCH2CH ；R2B3 是CH3、–CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2CH＝CH2、-CH2C(CH3) ＝CH2、-CH＝CH2、-CH＝CHCH 33或–C(CH3)＝CH2；R 是–CH3或–CH2CH3。 [1562] 51.如实施方案1-50中任一项所述的方法，其中，R6是–CH(CH3)2。 [1563] 52.如实施方案51所述的方法，其中，微管溶素化合物具有以下结构： 166 CN 111601803 A 说　明　书 150/185 页 [1564] [1565] 或其盐或C1-C4酯，具体地，甲基、乙基或烯丙基酯，其中下标u是0或1；如果存在， R8C是–OH；ZD不存在或是–CH -；每个R2D2 独立地选自–H和-CH ；以及R33 是–CH3、-CH2CH3或- CH2CH2CH3。 [1566] 53.如实施方案51所述的方法，其中，微管溶素化合物具有以下结构： [1567] [1568] 或其盐或甲基、乙基或烯丙基酯。 [1569] 54.如实施方案51所述的方法，其中，微管溶素化合物具有以下结构： 167 CN 111601803 A 说　明　书 151/185 页 [1570] [1571] 或其盐或甲基、乙基或烯丙基酯。 [1572] 55.如实施方案34-54中任一项所述的方法，其中，过渡金属(II)是Cu(II)。 [1573] 56.如实施方案55所述的方法，其中，过渡金属催化剂包含Cu(OTf)2、Cu(SbF6)2或 CuCl2。 [1574] 57.如实施方案34-56中任一项所述的方法，其中，合适的极性非质子溶剂是乙腈、 二氯甲烷、THF、二噁烷、或这些溶剂中的两种或三种的混合物，具体地二氯甲烷。 [1575] 58.如实施方案34-57中任一项所述的方法，其中，手性还原剂包括BH3-DMS。 [1576] 59.如实施方案58所述的方法，其中，手性还原剂还包括(S)-(-)-CBS。 [1577] 60.如实施方案34-59中任一项所述的方法，其中，R1和/或R1A是叔丁基，第一、第二 和/或第三脱保护剂包含HCl或TFA。 [1578] 61.如实施方案60所述的方法，其中，R1和R1A是叔丁基，第一、第二和第三脱保护剂 是TFA/CH2Cl2。 [1579] 62.如实施方案34-61中任一项所述的方法，其中，第一、第二和第三偶联剂各自独 立地选自：N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)，2-乙氧基-1-乙氧 基羰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)，(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗 啉基-碳正离子六氟磷酸盐(COMU)，N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟 基琥珀酰亚胺，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)，二 苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)，氯-N,N,N’,N’-双(四亚甲基)甲脒鎓四氟硼酸盐，氟-N,N,N’, N’-双(四亚甲基)甲脒鎓六氟磷酸盐，N,N’-二环基己基碳二亚胺，N-(3-二甲基氨基丙基)- N’-乙基碳二亚胺盐酸盐，1,1’-羰基二咪唑，2-氯-1,3-二甲基咪唑啉鎓四氟硼酸盐，(苯并 三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲 基脲鎓六氟磷酸盐，2-氯-1-甲基吡啶鎓氢碘酸盐和丙基磷酸酐。 [1580] 63.如实施方案34-61中任一项所述的方法，其中，第一、第二和第三偶联剂各自独 立地选自：HATU和COMU。 [1581] 64.一种包含具有以下结构的微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的组合物： 168 CN 111601803 A 说　明　书 152/185 页 [1582] [1583] 各自任选地是盐形式，微管缬氨酸杂质具有以下结构： [1584] [1585] 各自任选地是盐形式，具有相同的可变基团，其中，R2选自：–H、任选取代的饱和C1- C4烃基和R2A，其中R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B是任选取代的饱和C1-C4烃基，具体地，R2是–H或– C(＝O)CH3；R3选自：–CH3、-CH2CH3和–CH2CH2CH3，具体地–CH3；R7是C1-C4饱和烃基，具体地– CH2CH3；以及其中，相对于合并量的微管缬氨酸化合物，组合物中合并量的微管缬氨酸杂质 不超过约5重量％至约10重量％。 [1586] 65.如实施方案64所述的组合物，其中，相对于合并量的微管缬氨酸化合物，组合 物中合并量的微管缬氨酸杂质不超过约1重量％至约3重量％，具体地不超过约1.5重量％。 [1587] 66.一种包含具有以下结构的微管缬氨酸化合物或基本上由其组成的组合物： [1588] 任选地是盐形式，以及 [1589] 微管缬氨酸杂质具有以下结构： [1590] [1591] 任选地是盐形式，其中，微管缬氨酸化合物和微管缬氨酸杂质中的R2是–H或–C(＝ O)R2B，其中R2B是任选取代的饱和C1-C4烃基，具体地，R2是–H或–C(＝O)CH3；微管缬氨酸化合 物和微管缬氨酸杂质中的R3各自为–CH3、-CH2CH3或–CH CH 72 2CH3，具体地，–CH3；R 是C1-C4饱和 烃基，具体地–CH2CH3；以及其中，相对于微管缬氨酸化合物的量，所述组合物中包含不超过 约3重量％至约5重量％的微管缬氨酸杂质。 [1592] 67.如实施方案66所述的组合物，其中，相对于微管缬氨酸化合物，所述组合物包 含不超过约1重量％至约3重量％，具体地不超过约1.5重量％的微管缬氨酸杂质。 [1593] 68.如实施方案66或67所述的组合物，其中，组合物包含0.5重量％或更小，或基本 上不含具有以下结构的其它微管缬氨酸杂质： [1594] 169 CN 111601803 A 说　明　书 153/185 页 [1595] 任选地是盐形式，其中，R2、R3和R7与实施方案68的微管缬氨酸杂质系统。 [1596] 69.如实施方案64-68中任一项所述的组合物，其中，R2是–H；R3是–CH 73；以及R 是– CH2CH3。 [1597] 70.一种药物接头组合物，其包含合适的盐形式的药物接头化合物或基本上由其 组成，并具有通过如实施方案64-69中任一项所述的微管缬氨酸组合物的季铵化制备得到 的季铵化的微管溶素药物单元(D )。 [1598] 71.如实施方案70所述的药物接头组合物，其中，所述组合物包含药物接头化合物 和药物接头杂质或基本上由其组成，药物接头化合物具有以下结构： [1599] [1600] 处于合适的盐形式， [1601] 药物接头杂质具有以下结构： [1602] [1603] 也是盐形式， [1604] 其中，相对于药物接头化合物，组合物中药物接头杂质不超过10重量％，它们的可 变基团的含义与药物接头化合物相同， [1605] 括号中的季铵化的部分是D ，其中： [1606] 环状Ar是5-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代，弯曲的虚线表示任选 的环化；R2是–H或任选取代的饱和C1-C8烃基，或R2是R2A，其中R2A是–CH2R2C，其中R2C是任选取 代的C1-C8醚、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的C -C 炔基或R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B2 8 是任 选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基、任选取代的C2-C8烯基或任选取代的 C2-C8炔基； [1607] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基；R4是C1-C 4A4烃基；R 是氢或任选取代的C1-C 烃基；R4B8 是任选取代的C1-C8烃基，不存在 环化，或者如果存在环化，R4A和R4B与它们连接的氮原子一起形成任选取代的5-、6-、7-或8- 元含氮杂环基；以及R5和R6独立地是任选取代的C1-C8烃基；一个RT是氢、任选取代的饱和C1- C8烃基或任选取代的不饱和C3-C8烃基且另一个RT是任选取代的C1-C8烃基、任选取代的饱和 C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8杂烃基； [1608] Lb’是配体共价结合前体；Q1是Aa-Ww，其中A是任选的延伸单元，使得当A不存在下 时，下标a是0，或者当A存在时候，下标a是1，并且是单一单元，或者具有两个、三个或四个亚 170 CN 111601803 A 说　明　书 154/185 页 单元；Q2是W'w '-E'-，其中如果存在，Q2键合至V、Z1、Z2或Z3；下标w是0或1，分别表示W不存在 或存在，下标w'是0或1，分别表示W'-E'不存在或存在，其中w w'是1，表示存W、W'在一个且 仅存在一个，其中： [1609] 当下标w是1时，存在W，则W是肽可裂解单元，与血清蛋白酶相比能够被细胞内或调 解性蛋白酶选择性裂解，或者W是非酶促裂解的部分，在低氧条件下更易被谷胱甘肽通过二 硫键交换裂解，或与血清的生理pH值相比，在溶酶体中存在的pH值较低的条件下更易水解； 以及 [1610] 当下标w’为1时表示存在W’，则J替换J’，并且W’包括具有下式的葡糖醛酸苷可裂 解单位： [1611] [1612] 其中，W'-E'提供可被细胞内糖苷酶裂解的糖苷键，其中W’是碳水化合物部分；J或 E'和J’独立地是–O-、-S-或–N(R33)-，其中R33是氢或任选取代的C1-C8烃基；V、Z1、Z2和Z3是＝ N-或＝C(R24)-，其中R24是氢或烷基、烯基或炔基，任选地被取代，或卤素、-NO2、-CN或其他吸 电子基团，供电子基团，-Q2或–C(R9)(R9)-D ，其中，当w是1时，V、Z1、Z2和Z3中至少一个是＝C (R24)-，当w'是1时，V、Z1、Z2和Z3中至少两个是＝C(R24)-， [1613] 前体是当w是1时，Q2不存在，一个且仅一个R24是–C(R9)(R9)-D ，使得–C(R9)(R9)-D 键合至V、Z1、Z2、Z3中的一个，如果该可变基团是＝C(R24)-，Q1-J-和–C(R8)(R9)-D 取代基彼 此处于邻位或对位，前提是w'是1时，一个且仅一个R24是–C(R8)(R9)-D ，使得–C(R8)(R9)-D 键合至V、Z1、Z2、Z3中的一个，如果该可变基团是＝C(R24)-，一个且仅一个其他R24是Q2，使得 Q2键合至V、Z1、Z2、Z3中的另一个，如果该可变基团是＝C(R24)-，Q2和–C(R8)(R9)-D 取代基彼 此处于邻位或对位；每个R9独立地是氢、C1-C8烃基、C2-C8烯基，C2-C8炔基，C6-C24芳基或C5- C24杂芳基，任选地被取代，或者两个R9与它们连接的碳原子一起形成任选取代的C3-C8碳环 或任选取代的饱和或部分不饱和的C5-C8杂环；R’是氢或是卤素、-NO2、-CN或其他吸电子基 团，如果下标w’是1，或是氢或供电子基团，如果下标w是1；以及其中，所述蛋白酶裂解，二硫 键交换，酸水解或糖苷酶裂解导致D 作为微管溶素化合物从药物接头化合物释放。 [1614] 72.如实施方案71所述的药物接头组合物，其中，所述药物接头化合物具有以下结 构： [1615] [1616] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： 171 CN 111601803 A 说　明　书 155/185 页 [1617] [1618] 也是盐形式，其中下标a是0或1，分别表示A不存在或存在。 [1619] 73.如实施方案71所述的药物接头组合物，其中，所述药物接头化合物具有以下结 构： [1620] [1621] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1622] [1623] 也是盐形式，其中下标a是0或1，分别表示A不存在或存在；并且Q2是W'w'-E'-，其中 下标w’是1。 [1624] 74.如实施方案71所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1625] [1626] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1627] [1628] 也是盐形式，其中，R’是供电子基团；J是–NH-；W包含二肽残基，其C-末端连接至J 作为酰胺键，其中所述酰胺碱能够被调节性蛋白酶裂解以启动D 作为微管溶素化合物的释 172 CN 111601803 A 说　明　书 156/185 页 放；X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-或X1是＝C(RX1)-； [1629] 并且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：-H、-CH3和–CH2CH3；并且Z是任选取代 的C1-C4亚烃基或任选取代的C -C 8A2 6亚烯基；R 是任选取代的C1-C4烃基；R8B是任选取代的苯 基或任选取代的5-或6-元杂芳基；以及R8D是–H或提供合适的酯官能团，具体地，R8D是–H、- CH3、-CH2CH3或–CH2-CH＝CH2。 [1630] 75.如实施方案71所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1631] [1632] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1633] [1634] 也是盐形式，其中：R’是–H或供电子基团；R34是异丙基；R35是–CH3、异丙基、– CH2CH2CH2NH(C＝O)NH2或–CH2CH2CO H；R8C2 是–OH或不存在；R2是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C6烃 基，或R2是R2A，其中R2A是-OCH R2C，其中R2C是饱和C -C 醚或不饱和C -C 烃基，或R2A2 1 6 2 6 是–C(＝ O)R2B，其中R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C6烃基或任选取代的C2-C6烯基；并且下标u是0或 1。 [1635] 76.如实施方案75所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1636] [1637] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1638] [1639] 也是盐形式，其中：R’是–H或供电子基团；R35是–CH3、异丙基、–CH2CH2CH2NH(C＝O) NH 或–CH CH CO H；R8C2 2 2 2 是–OH或不存在；R2是饱和C1-C6烃基或不饱和C3-C6烃基，或R2是R2A，其 中R2A是–CH2R2C，其中R2C是饱和C1-C6醚，或R2A是-C(＝O)R2B，其中，R2B是饱和C1-C6烃基或不饱 173 CN 111601803 A 说　明　书 157/185 页 和C3-C6烃基；并且下标u是0或1。 [1640] 77.如实施方案76所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1641] [1642] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1643] [1644] 也是盐形式，其中：R35是–CH3、异丙基、–CH2CH2CH2-NH(C＝O)NH2或–CH2CH2CO2H；以及 R2是饱和C -C 烃基或不饱和C -C 烃基，或R2 2A1 6 3 6 是R 以及R2是–C(＝O)R2B，其中R2B是饱和C1-C6 烃基或不饱和C3-C6烃基，具体地，R2是–CH3或CH2CH3或–C(＝O)CH3。 [1645] 78.如实施方案77所述的药物接头组合物，其中，药物结构化合物具有以下结构： [1646] [1647] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1648] [1649] 也是盐形式，其中R35是–CH3或–CH2CH2CH2NH(C＝O)NH2。 [1650] 79.如实施方案71所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1651] 174 CN 111601803 A 说　明　书 158/185 页 [1652] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1653] [1654] 也是盐形式，其中R’是吸电子基团；J’是–NH-；X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1 是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各自独立地选自：-H、-CH3和–CH2CH3；并且Z是任选取 代的C1-C4亚烃基或任选取代的C2-C6亚烯基；R8A是任选取代的C1-C4烃基；R8B是任选取代的 苯基或任选取代的5-或6-元杂芳基；R8D是–H或提供了合适的酯官能团，具体地，R8D是-H、- CH3、-CH CH 或–CH -CH＝CH 45 45A 45A2 3 2 2；以及R 是–OH或–C(＝O)OR ，其中R 提供了合适的酯官能 团，具体地，R45A是-CH3，-CH2CH3或–CH2-CH＝CH2。 [1655] 80.如实施方案79所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1656] [1657] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1658] [1659] 也是盐形式，其中，R’是–H、卤素、-CN或–NO2；R8C是–OH或不存在；R2是饱和C1-C6烃 基、不饱和C3-C6烃基，或R2是R2A，其中R2A是-OCH R2C2 ，其中R2C是C1-C6醚或取代的C2-C6烯基， 或R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C6烃基或任选取代的C2-C6烯基；并 175 CN 111601803 A 说　明　书 159/185 页 且下标u是0或1；并且A是天然或非天然氨基酸残基或者其他含胺酸，使得A-J键在生理条件 下稳定或者耐受蛋白酶裂解；并且Lb’包含马来酰亚胺(M1)部分。 [1660] 81.如实施方案80所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1661] [1662] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1663] 176 CN 111601803 A 说　明　书 160/185 页 [1664] [1665] 也是盐形式，其中，下标a是1；下标m’为1至5；BU是碱性单元，其碱性氮原子任选地 质子化或者被合适的氮保护基团保护；Ra2–H或C1-C6烃基；弯曲的虚线表示BU和Ra2之间任选 的环化， [1666] 当BU是非环状碱性单元不存在环化，其中，非环状碱性单元具有式–[C(Ra1) (Ra1)]-[C(Ra1)(Ra1)]0-3-N(Ra3)(Ra3)，其中每个Ra1独立地是氢或C1-C4烃基、C6-C10芳基，C5- C10杂芳基，(C6-C10芳基)-C1-C4烃基-或(C5-C10杂芳基)-C1-C4烃基-，任选地被取代，或者两 个Ra1与它们连接的碳原子以及任何居间碳一起形成任选取代的C a33-C6环烃基；R 独立地是 卤素、任选取代的C -C 烃基，或Ra31 6 与它们连接的氮原子一起形成任选取代的C3-C6杂环基， 其中，碱性氮是骨架原子；当BU是环状碱性单元时形成环化，其中Ra2是环化至BU的C1-C6烃 基，使得BU和Ra2与它们连接的碳原子一起形成任选取代的4-、5-或6-元环系统。 [1667] 82.如实施方案81所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1668] [1669] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1670] 177 CN 111601803 A 说　明　书 161/185 页 [1671] 也是盐形式，或者，药物接头化合物具有以下结构： [1672] [1673] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1674] [1675] 也是盐形式，其中，下标a是1，表示A存在，优选地作为α-氨基酸或β-氨基酸残基； 下标m’为1至5；R2是饱和C -C 烃基或R2是R2A，其中R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B1 6 是饱和C1-C6烃基 或不饱和C3-C6烃基，具体地，R2是–CH3、-CH2CH3或–C(＝O)CH ；以及R33 是–CH3或–CH2CH2CH3。 [1676] 83.如实施方案82所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1677] [1678] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： 178 CN 111601803 A 说　明　书 162/185 页 [1679] [1680] 84.如实施方案81所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： [1681] [1682] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1683] [1684] 也是盐形式，其中，下标a是1；R2是饱和C -C 烃基或R2是R2A，其中R2A是–C(＝O)R2B1 6 ， 其中R2B是饱和C -C 烃基或不饱和C -C 烃基，具体地，R2是–CH 、CH CH 或–C(＝O)CH ；以及R31 6 3 6 3 2 3 3 是–CH3或–CH2CH2CH3。 [1685] 85.如实施方案84所述的药物接头组合物，其中，药物接头化合物具有以下结构： 179 CN 111601803 A 说　明　书 163/185 页 [1686] [1687] 处于合适的盐形式，药物接头杂质具有以下结构： [1688] [1689] 也是盐形式。 [1690] 86.一种配体药物偶联物组合物，其具有下式： [1691] L-(Lb-L O-D )p [1692] 或其盐，具体地药学上可接受的盐， [1693] 其中，L是来自靶向剂的配体单元，具体地抗体配体单元，以限定抗体药物偶联物； Lb是共价结合部分；LO是存在的第二接头；下标p表示1-20，1-16或1-8，其中，配体药物偶联 物组合物通过以下过程制备：在pH为约7.0至约7.5的合适的水基溶剂中，使靶向部分与如 实施方案70-85中任一项所述的药物接头组合物接触，其中所述接触缩合靶向部分的反应 性官能团和药物接头组合物的药物接头化合物的的反应性官能团Lb’，通过将Lb’转化为Lb 和靶向部分转化为配体单元，在L和Lb之间形成共价键。 [1694] 87.一种化合物，其具有以下结构： [1695] [1696] 其中，R2是–H、C1-C4烃基或R2A，其中R2A是–C(＝O)R2B，其中R2B是任选取代的饱和C1- C4烃基或任选取代的C3-C6不饱和烃基，具体地，R2是–H、–C(＝O)CH3、-OCH3或-OCH2CH3；R3是– 180 CN 111601803 A 说　明　书 164/185 页 CH3、-CH2CH3或–CH2CH2CH3，具体地–CH3；以及R7是–H或C1-C4饱和烃基，具体地–H或–CH2CH3。 [1697] 88 .如实施方案87所述的化合物，其中，R2是–H或-CH2CH3；R3是–CH3、-CH2CH3或– CH 72CH2CH3；以及R 是–H、-CH3或–CH2CH3。 [1698] 89.如实施方案87所述的化合物，其中，R2是–H或–C(＝O)R2B，R3是–CH3、-CH2CH3或– CH2CH2CH3，以及R7是–H。 [1699] 90.如实施方案88所述的化合物，其中，R2是–CH2CH3，R3是–CH3或–CH2CH2CH3，以及R7 是–H或–CH2CH3。 [1700] 91 .如实施方案89所述的化合物，其中，R2是–H，R3是–CH3或–CH CH CH ，以及R72 2 3 是– H。 [1701] 92.如实施方案87所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1702] [1703] 93.如实施方案87所述的化合物，任选地是盐形式，其中，所述化合物具有以下结 构： [1704] [1705] 94.如实施方案87所述的化合物，任选地是盐形式，其中，所述化合物具有以下结 构： [1706] [1707] 95.如实施方案87所述的化合物，任选地是盐形式，其中，所述化合物具有以下结 构： [1708] [1709] 96.如实施方案87所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1710] [1711] 1A.一种化合物，其具有以下结构： 181 CN 111601803 A 说　明　书 165/185 页 [1712] [1713] 任选地是盐形式，其中，R2选自：–H、C -C 烃基和R2A，其中R2A1 4 是–C(＝O)R2B，其中R2B 是任选取代的饱和C1-C4烃基或任选取代的C3-C6不饱和烃基；R3是–CH3、-CH2CH3或– CH2CH2CH3；以及R7是–H或C1-C4饱和烃基。 [1714] 2A.如实施方案1A所述的化合物，其中，R2是–H、-CH2CH 2B3或–C(＝O)R ；R3是–CH3、– CH2CH3或–CH2CH2CH3；以及R7是–H、-CH3或–CH2CH3. [1715] 3A.如实施方案1A所述的化合物，其中，R2是–C(＝O)R2B，R3是–CH3或–CH2CH2CH3，以 及R7是–H或–CH2CH3。 [1716] 4A.如实施方案1A所述的化合物，其中，R2是–CH2CH ，R33 是–CH3或–CH2CH2CH 73，以及R 是H或–CH2CH3。 [1717] 5A.如实施方案1A所述的化合物，其中，R2是–H，R3是–CH3或–CH2CH2CH3，以及R7是– H。 [1718] 6A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1719] [1720] 7A.如实施方案1A所述的化合物，任选地是盐形式，其中，所述化合物具有以下结 构： [1721] [1722] 8A.如实施方案1A所述的化合物，任选地是盐形式，其中，所述化合物具有以下结 构： [1723] [1724] 9A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1725] 182 CN 111601803 A 说　明　书 166/185 页 [1726] 10A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1727] [1728] 11A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1729] [1730] 12A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1731] [1732] 13A.如实施方案1A所述的化合物，其中，所述化合物具有以下结构： [1733] [1734] 14A.一种包含具有以下结构的(R,R)-式1a的微管缬氨酸化合物和一种或多种光 学异构体作为光学杂质的组合物： [1735] [1736] 其中，(R,R)-式1a微管缬氨酸化合物或其盐是主要的光学异构体，其相应的对映 异构体(S,S)-式1a是主要的光学杂质，任选地是盐形式，其具有以下结构： [1737] [1738] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团； [1739] R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3-C8 杂烃基；R6是任选取代的C1-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱 和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、 任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24 杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1740] 具体地，(R,R)-式1a具有以下结构： 183 CN 111601803 A 说　明　书 167/185 页 [1741] [1742] (S,S)-式1a具有以下结构： [1743] [1744] 其中：X1是＝N-；且X2是S，O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，RX1和RX2各自独 立地选自：-H、-CH3或–CH2CH3；以及其中，其他可变基团如前文所定义， [1745] 更具体地，(R,R)-式1a具有以下结构： [1746] [1747] (S,S)-式1a具有以下结构： [1748] [1749] 15A.如实施方案14A所述的组合物，其中，微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式1a微管 缬氨酸化合物或其盐作为主要的光学异构体，根据手性HPLC确定，相对于组合物中光学异 构体中的总量，具有不超过约5重量％的非对映异构的微管缬氨酸化合物(R,S)-式1a，具体 地，不超过约1.5重量％，更具体地，不超过约1.0重量％，或者，基本上不含非对映异构体， 其中，非对映异构的微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)具有以下结构： [1750] [1751] 具体地，(R,S)-式1a具有以下结构： [1752] [1753] 其中，可变基团保留前述(R,R)-式1a和(S,S)-式1a的含义，更具体地，(R,S)-式1a 具有以下结构： [1754] [1755] 16A.如实施方案15A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，所述组合物基本上 不含非对映异构体(R,S)-式1a并且基本上不含其相应的对映异构体(S,R)-式1a，其具有以 下结构： 184 CN 111601803 A 说　明　书 168/185 页 [1756] [1757] 具体地，(S,R)-式1a具有以下结构： [1758] [1759] 其中，可变基团保留前述(R,R)-式1a、(S,S)-式1a和(R,S)-式1a的含义，更具体 地，(S,R)-式1a具有以下结构： [1760] [1761] 17A.如实施方案14A、15A或16A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，相对于组 合物中存在下的光学异构体的总量，所述组合物包含不超过约3重量％，具体地不超过约2 重量％或不超过约1.5重量％的光学杂质(S,S)-式1a。 [1762] 18A.一种包含具有以下结构的(R,R)-式2的微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式) 以及一种或多种其光学异构体的光学杂质的组合物： [1763] [1764] 其中，(R,R)-式2微管缬氨酸化合物或其盐是主要的光学异构体，其相应的的对映 异构体(S,S)-式2(任选地是盐形式)是主要的光学杂质，其具有以下结构： [1765] [1766] 其中： [1767] 环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取代；R1 是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合适的 氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代的C3- C8杂烃基；R6是任选取代的C1-C8烃基；以及R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱 和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、 任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24 杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1768] 具体地，(R,R)-式2具有以下结构： [1769] [1770] 或其盐， 185 CN 111601803 A 说　明　书 169/185 页 [1771] (S,S)-式2具有以下结构： [1772] [1773] 或其盐， [1774] 其中：X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH3或–CH2CH3；其他可变基团如前文所述，更具体地，(R,R)-式2具有以 下结构： [1775] [1776] 或其盐， [1777] (S,S)-式2(任选地是盐形式)具有以下结构： [1778] [1779] 19A.如实施方案18A所述的组合物，其中，微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式2微管 缬氨酸化合物或其盐作为主要的光学异构体，通过手性HPLC确定，相对于组合物中存在的 光学异构体的总量，具有不超过约5重量％非对映异构的微管缬氨酸化合物(R,S)-式2，具 体地，不超过约1.5重量％，更具体地，不超过约1.0重量％，或者，基本上不含非对映异构 体，其中，非对映异构的微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)具有结构(R,S)-式2： [1780] [1781] 其中，可变基团保留前述定义，具体地，(R,S)-式2具有以下结构： [1782] [1783] 或其盐，其中：X1是＝N-；且X2是S、O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，RX1和 RX2各自独立地选自：-H、-CH3或–CH2CH3；以及其中，其他可变基团如前所述，更具体地，(R, S)-式2(任选地是盐形式)具有以下结构： [1784] [1785] 20A.如实施方案19A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，所述组合物基本上 不含非对映异构体(R,S)-式2或其盐，基本上不含其相应的对映异构体(S,R)-式2，其具有 以下结构： 186 CN 111601803 A 说　明　书 170/185 页 [1786] [1787] 或其盐，具体地，(S,R)-式2具有以下结构： [1788] [1789] 或其盐， [1790] 其中，可变基团如前(R,R)-式1a、(R,S)-式1a和(S,S)-式1a的定义，更具体地，(S, R)-式2(任选地是盐形式)具有以下结构： [1791] [1792] 21A.如实施方案18A、19A或20A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，相对于组 合物中存在的光学异构体的总量，所述组合物包含不超过约3重量％，具体地不超过约2重 量％、或不超过约1.5重量％的光学杂质(S,S)-式2。 [1793] 22A .一种包含具有以下结构的(R,R)-式2a的微管缬氨酸化合物(任选地是盐形 式)和一种或多种其光学异构体作为光学杂质的组合物： [1794] [1795] 其中，(R,R)-式2a微管缬氨酸化合物或其盐是主要的光学异构体，其相应的对映 异构体(S,S)-式2a(任选地是盐形式)是主要的光学杂质，其具有以下结构： [1796] [1797] 其中：环状Ar是1,3-亚苯基、或5-或6-元含氮1,3-杂亚芳基，其余位置任选地被取 代；R1是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其他部分，使得R1-OC(＝O)-是合 适的氮保护基团；R3是任选取代的饱和C1-C8烃基、任选取代的不饱和C3-C8烃基或任选取代 的C3-C8杂烃基；R6是任选取代的C1-C 78烃基；以及R 是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代 的不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂 烯基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， 具体地，(R,R)-式2a具有以下结构： 187 CN 111601803 A 说　明　书 171/185 页 [1798] [1799] 或其盐， [1800] (S,S)-式2a具有以下结构： [1801] [1802] 或其盐， [1803] 其中：X1是＝N-；且X2是S，O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH3或–CH2CH3；以及其中，其他可变基团如前所述，更具体地，(R,R)-式 2a具有以下结构： [1804] [1805] 或其盐， [1806] (S,S)-式2a(任选地是盐形式)具有以下结构： [1807] [1808] 23A.如实施方案22A所述的组合物，其中，微管缬氨酸组合物包含(R,R)-式2a微管 缬氨酸化合物或其盐作为主要的光学异构体，根据手性HPLC确定，相对于组合物中存在的 光学异构体的总量，具有不超过约5重量％的非对映异构的微管缬氨酸化合物(R,S)-式2a， 具体地不超过约1.5重量％，更具体地不超过约1.0重量％，或者基本上不含非对映异构体， 其中，非对映异构的微管缬氨酸化合物(任选地是盐形式)具有结构(R,S)-式2a： [1809] [1810] 具体地，(R,S)-式2a具有以下结构： 188 CN 111601803 A 说　明　书 172/185 页 [1811] [1812] 或其盐， [1813] 其中可变基团如(R,R)-式2a和(S,S)-式2a的定义，更具体地，(R,S)-式2a(任选地 是盐形式)具有以下结构： [1814] [1815] 24A.如实施方案23A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，所述组合物基本上 不含非对映异构体(R,S)-式2a，且基本上不含其相应的对映异构体(S,R)-式2a，其具有以 下结构： [1816] [1817] 具体地，(S,R)-式2a具有以下结构： [1818] [1819] 或其盐，其中，可变基团保留它们在(R,R)-式2a、(S,S)-式2a和(R,S)-式2a中的定 义，更具体地，(S,R)-式2a(任选地是盐形式)具有以下结构： [1820] [1821] 25A.如实施方案22A、23A或24A所述的组合物，其中，根据手性HPLC确定，相对于组 合物中存在的光学异构体的总量，组合物包含不超过约3重量％，具体地不超过约2重量％， 或不超过约1.5重量％的光学杂质(S,S)-式2a。 [1822] 26A.一种用于制备如实施方案14A-17A中任一项所述的组合物的方法，所述方法 包括以下步骤： [1823] (a)在合适的过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂，特别是包含选自Cu(II)、Zn (II)和Yb(III)的过渡金属的催化剂的存在下，在合适的极性非质子溶剂中， [1824] 使式A的化合物： 189 CN 111601803 A 说　明　书 173/185 页 [1825] [1826] 其中，R7是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代的不饱和C3-C20烃基、任选取代的 C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂烯基、任选取代的C2-C20炔基、任 选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的C5-C24杂芳基、任选取代的C3-C20 杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， [1827] 与式B的化合物： [1828] R3NHC(O)OR1(B)， [1829] 进行接触，以形成包含式AB的微管缬氨酸中间体的对映异构体混合物的组合物： [1830] [1831] (b)使该对映异构体混合物与合适的手性还原剂接触，以形成包含基本上等摩尔 的非对映体混合物的组合物，其中该非对映体混合物由式R-1a表示： [1832] [1833] 其中，所述组合物进一步包含该非对映异构体的对映异构体的基本上等摩尔的混 合物的光学杂质， [1834] (b’)从式R-1a非对映异构体混合物分离非对映异构体，从而获得包含(R,R)-式1a 作为主要的光学异构体并具有(S,S)-式1a作为主要的光学杂质的组合物，其中，所述主要 的光学异构体和所述主要的光学杂质各自任选地是盐形式，分别具有以下结构： [1835] [1836] 其中，AB、式R-1a、R,R-式1a和(S,S)-式1a的可变基团保留它们在式A和式B化合物 中的含义。 [1837] 27A.如实施方案26A所述的方法，其中，过渡金属(II)催化剂包含Cu(II)，具体地 Cu(OTf)2、Cu(SbF6)2或CuCl2，更具体地Cu(OTf)2。 [1838] 28A.如实施方案26A或27A所述的方法，其中，所述合适的极性非质子是乙腈、二氯 甲烷、THF、二噁烷、或这些溶剂中的两种或三种的混合物，具体地二氯甲烷。 [1839] 29A.如实施方案26A、27A或28A所述的方法，其中，所述手性还原剂是通过使THF中 的BH3-DMS与合适的手性配体，具体地(S)-(-)-CBS进行接触制备的手性噁唑硼烷。 [1840] 30A.一种用于制备如实施方案18A-21A中任一项所述的组合物的方法，所述方法 190 CN 111601803 A 说　明　书 174/185 页 包括以下步骤： [1841] (c)使如实施方案26A-29A中任一项所述的步骤(a)、(b)和步骤(b’)获得的组合物 与合适的水解试剂接触，其中，得到的所述组合物中主要的光学异构体是(R,R)-式2，任选 地是盐形式，具有以下结构： [1842] [1843] 主要的光学杂质是(S,S)-式2，任选地是盐形式，具有以下结构： [1844] [1845] 其中，R,R-式2和S,S-式2的可变基团保留它们在式A和式B化合物中的含义。 [1846] 31.一种用于制备如实施方案22A-25A中任一项所述的组合物的方法，所述方法包 括以下步骤： [1847] (c)使如实施方案26A-29A中任一项所述的步骤(a)、(b)和步骤(b’)获得的组合物 与合适的水解试剂接触，以获得包含(R,R)-式2作为主要的光学异构体的组合物，任选地是 盐形式，其具有以下结构： [1848] [1849] 该组合物进一步包含其对映异构体(任选地是盐形式)作为主要的光学杂质，其具 有以下结构： [1850] 和 [1851] (d)使得到的组合物与合适的酰化剂接触以获得包含(R,R)-式2a作为主要的光学 异构体和(S,S)-式2a作为主要的光学杂质的组合物，其中，主要的光学异构体和主要的光 学杂质(各自任选地是盐形式)具有以下结构： [1852] [1853] 其中，R2B是饱和C1-C6烃基、不饱和C3-C8烃基、C2-C8烯基或C2-C4炔基，任选地被取 代，具体地-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH2CH＝CH2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH3)＝ 191 CN 111601803 A 说　明　书 175/185 页 CH2、-CH＝CH2或-CHC≡CH，更具体地–CH3，并且其他可变基团保留它们在式A和式B化合物中 的含义。 [1854] 32A.如实施方案26A-31A中任一项所述的方法，其中，来自步骤(b’)的组合物的光 学纯度在步骤(c)和/或步骤(d)获得的组合物中基本上保留。 [1855] 33A.如实施方案26A-32A中任一项所述的方法，其中，所述步骤(b’)分离是通过硅 胶快速色谱。 [1856] 34A.如实施方案26A-33A中任一项所述的方法，其中，所述环状Ar是5-元含氮1,3- 杂亚芳基，其余位置任选地被取代。 [1857] 35A.如实施方案26A-34A中任一项所述的方法，其中，步骤(a)的化合物A和化合物 B具有以下结构： [1858] [1859] 其中，X1是＝N-；且X2是S，O或N(RX2)-，或X1是＝C(RX1)-；且X2是NRX2，其中RX1和RX2各 自独立地选自：-H、-CH 或–CH CH ；R13 2 3 是苯基、叔丁基、9-芴基或烯丙基，任选地被取代，或其 他部分，使得R1-OC(＝O)-是合适的氮保护基团，具体地叔丁基；以及R3是任选取代的饱和 C1-C6烃基、任选取代的不饱和C3-C6烃基或任选取代的C3-C6杂烃基，具体地–CH3或– CH2CH2CH3；R6是C1-C6烃基，具体地–CH(CH 73)2；以及R 是任选取代的饱和C1-C20烃基、任选取代 的不饱和C3-C20烃基、任选取代的C3-C20杂烃基、任选取代的C2-C20烯基、任选取代的C3-C20杂 烯基、任选取代的C2-C20炔基、任选取代的C3-C20杂炔基、任选取代的C6-C24芳基、任选取代的 C5-C24杂芳基或任选取代的C3-C20杂环基或其他部分，使得R7-O-提供合适的羧酸保护基团， 具体地R7是–CH3或–CH2CH3，具体地，化合物A和化合物B具有以下结构： [1860] [1861] 36A.一种包含具有以下结构的化合物： 192 CN 111601803 A 说　明　书 176/185 页 [1862] [1863] 作为主要的光学异构体(任选地是盐形式)和相应的光学杂质(任选地是盐形式) 的组合物，所述光学杂质具有以下结构： [1864] [1865] 37A.如实施方案36A所述的组合物，其中，所述组合物基本上不含具有以下结构的 相应的光学杂质： 193 CN 111601803 A 说　明　书 177/185 页 [1866] [1867] 并且基本上不含具有以下结构的相应的光学杂质： [1868] [1869] 38A.如实施方案37A所述的组合物，其中，所述组合物通过实施方案24A的组合物 进行制备，根据手性HPLC确定，相对于所述组合物中存在下的光学异构体的总量，所述实施 方案24A的组合物包含不超过约3重量％，具体地不超过约2重量％，或不超过约1.5重量％ 194 CN 111601803 A 说　明　书 178/185 页 的光学杂质(S,S)-式2a。 [1870] 39A.一种药物接头组合物，其中，所述组合物包含具有以下结构药物接头化合物： [1871] [1872] 处于合适的盐形式，并且包含具有以下结构的药物接头杂质： [1873] [1874] 也是盐形式，或者其中，所述药物接头化合物具有以下结构： [1875] [1876] 处于合适的盐形式，所述药物接头杂质具有以下结构： 195 CN 111601803 A 说　明　书 179/185 页 [1877] [1878] 也是盐形式，其中，下标a是1以表示A存在，优选地作为α-氨基酸或β-氨基酸残基； 下标m’为1至5；R2是饱和C1-C 烃基或R2是R2A，其中R2A6 是–C(＝O)R2B，其中R2B是饱和C1-C6烃基 或不饱和C3-C6烃基，具体地，R2是–CH3、-CH2CH3或–C(＝O)CH3；以及R3是–CH3或–CH2CH2CH3。 [1879] 40A.如实施方案39A所述的药物接头组合物，其中，R2是R2A，其中R2A是–C(＝O)CH3， 以及R3是–CH3，其中所述组合物通过实施方案36A、37A或38A的组合物进行制备。 [1880] 41A.一种具有以下式1结构的配体药物偶联物组合物： [1881] L-(LU-D )p(1) [1882] 其中，L是配体单元，LU是接头单元，D 是季铵化的微管溶素药物单元；下标p为2- 12， [1883] 其中，组合物的多个配体药物偶联物化合物具有相同的季铵化的微管溶素药物单 元，其具有(R,R)-式D 的结构： [1884] [1885] 处于药学上可接受的盐的形式，其中，波浪线表示与LU共价连接的位点，其中，所 述组合物中至少一个化合物具有至少一个结构(S,S)-式D 的季铵化的微管溶素药物单元： [1886] [1887] 其余部分具有相同的(R,R)-式D 结构。 [1888] 42A.如实施方案41A所述的配体药物偶联物组合物，其中，所述配体药物偶联物组 合物是通过实施方案39A或40A的药物接头组合物制备的。 [1889] 43A.如实施方案41A或42A所述的配体药物偶联物组合物，其中，所述配体单元是 导向癌细胞抗原的抗体配体单元，具体地CD30、CD33或CD70。 196 CN 111601803 A 说　明　书 180/185 页 [1890] 实施例 [1891] 一般反应方案 [1892] 方案1和方案2分别显示了从市售材料开始，通过描述的文献路线以及涉及过渡 (II)金属催化的氮杂-迈克尔反应的本发明路线制备BOC保护的微管缬氨酸。 [1893] 方案1：根据文献路线制备BOC保护的微管缬氨酸： [1894] [1895] 方案1一直到步骤6以制备脱酰基-微管缬氨酸乙酯的反应顺序参见Ellman等人 .J.Org.Chem.(2008)73:4326-4396，步骤3的起始原料2-甲酰基噻唑-4-羧酸乙酯是从市售 的二乙氧基乙腈和3-溴丙酮酸盐3步骤(步骤2a-2c)进行制备(总产率78％)，参见Ellman等 人.J .Amer .Chem .Soc .(2006)128；16018-16019，使用Inami，K .和Shiba，T .的方法， Bull.Chem.Soc.(Jpn)(1985)58:352-360。该噻唑中间体的制备要求快速色谱纯化中间体 2-(二乙氧基甲基)-4-噻唑羧酸乙酯。然后2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)-氨基)- 1-羟基-4-甲基戊基)噻唑-4-羧酸乙酯(BOC-受保护的微管缬氨酸)的制备要求步骤6提供 的脱酰基-微管缬氨酸乙酯的仲胺进行BOC保护，然后乙酯水解，羟基酰化(步骤7-9)。因此， 方案1需要从市售原来开始的10个步骤来制备BOC-保护的微管缬氨酸。 [1896] 方案2：通过氮杂-迈克尔共轭加成反应的过渡(II)金属催化制备BOC保护的微管 缬氨酸 197 CN 111601803 A 说　明　书 181/185 页 [1897] [1898] 根据Zanda等人，Angew.Chem.Int’l.Ed.(2007)46:3526-3529，在方案2的步骤2中 通过将异丁醛与2-乙酰基噻唑-4-羧酸乙酯(1)缩合，制备中间体(E)-2-(4-甲基戊-2-烯酰 基)噻唑-4-羧酸乙酯(2)。噻唑起始材料则根据Zanda等的报道，从半胱氨酸和丙酮醛 (pyruvadehyde)分2个步骤(步骤1a和1b)进行制备。因此，方案2涉及从起始材料开始的7个 步骤，而方案1需要10个步骤。 [1899] 在方案2的步骤3中，BOC-NHMe通过过渡金属催化的氮杂-迈克尔共轭加成至化合 物2，提供外消旋的2-(3-((叔丁氧基羰基)-(甲基)氨基)4-甲基戊酰基)噻唑-4-羧酸乙酯 (3)。方案2的步骤4中，手性酮还原化合物3，通过快速色谱除去不希望的非对映异构体后， 得到非对映异构的醇2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)-氨基)-1-羟基-4-甲基戊基) 噻唑-4-羧酸乙酯(4)。相反，方案1的步骤6中，采用步骤1的(S)-亚砜作为手性辅助试剂获 得所需的(R,R)-非对映异构体，必需以化学计量使用。 [1900] 手性配体(S)-CBS，即(S)-(-)-2-(二苯基羟基甲基)吡咯烷的制备及其与BH3-Me2S 联用用于立体选择性还原酮参见Corey等，J.Amer.Chem.Soc.(1987)，109:5551-5553。方案 2中适合立体选择性还原用于制备微管缬氨酸类似物的那些和其他手性配体进一步参见 Corey等，Angew.Chem，Int’l.Ed.(1998)37:1986-2012。 [1901] 据报道，方案1的步骤6得到的脱酰基-微管缬氨酸乙酯的总收率为40％；然而，反 应规模仅为约150mg。放大到克规模已被证明对于要求85℃12天(77％收率)的密封容器反 应而言存在更多问题。试图通过提高温度(125℃，60h)来加快反应时间，使其与生产要求更 加一致，但由于收率大幅降低(41％)而被证明是徒劳的。此外，试图保护仲胺以使其乙酰 化，从而提供BOC保护的微管缬氨酸，其收率令人失望，为55％。 [1902] 除了麻烦的密封容器反应外，如前所述，方案1中，在步骤7的中间体2-((1R ,3R)- 1-羟基-4-甲基-3-(甲基氨基)戊基)噻唑-4-羧酸乙酯(脱酰基-微管缬氨酸乙酯)的BOC保 护期间发生材料的最大损失。不受理论的束缚，相信在引入BOC保护基(这应该是一个简单 的保护步骤)的反应顺序后期的如此大量损失是由于逆向的氮杂-迈克尔反应。如方案2的 198 CN 111601803 A 说　明　书 182/185 页 步骤2中所示，正向的氮杂-迈克尔反应允许在反应顺序的早期直接引入BOC保护的甲基氨 基部分。虽然步骤3中(E)-2-(4-甲基戊-2-烯酰基)噻唑-4-羧酸乙酯不完全转化为为外消 旋(rac)-2-(3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)4-甲基戊酰基)噻唑-4-羧酸乙酯，在较短的 反应顺序中物料的损失较早发生，因此根据方案2制备的2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基) (甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻唑-4-羧酸乙酯(BOC-保护的微管缬氨酸)的总产率为 15.9％，而多克数进行的方案2为5.3％。此外，除了无法放大方案1的密封容器反应和BOC保 护过程中的材料损失之外，从制造的角度来看，方案2也是不切实际的，因为总共需要进行7 次色谱纯化。 [1903] 一般信息。所有市售可得的无水溶剂均直接使用无需进一步纯化。硅胶色谱是在 CombiFlash  Rf 系统上进行的。所有市售可得的无水溶剂均直接使用无需进一步纯化。硅 胶色谱是在CombiFlash  Rf 系统上进行的。分析型HPLC采用Agilent  1200  HPLC进行，使用 Phenomenex  Kinetex  XB-C18  RP柱(150x4.5mm，2.6μm)，PN:00F-4496-E0，室温，240nm检 测，30分钟内洗脱(1.0mL/分钟)，线性梯度5％至95％的乙腈/水(0.1％甲酸)(方法A)，或15 分钟内洗脱，线性梯度25％至90％的乙腈/水(0 .1％甲酸)(方法B)。手性分析色谱在 Agilent  1260  HPLC上进行，使用手性pak  IB-3(4.6x150mm，3μm)柱，室温，220nm检测，30分 钟内洗脱(流速＝1.0mL/分钟)，等度梯度60:40的水:乙腈(0.1％甲酸)(方法C)。 [1904] [1905] 实施例1:(E)-2-(4-甲基戊-2-烯酰基)噻唑-4-羧酸乙酯 [1906] 0℃，向2-乙酰基噻唑-4-羧酸乙酯(1，11.6g，58.2mmol)的无水THF(200mL)溶液中 缓慢加入1N  TiCl4的甲苯溶液128mL，128mmol)。将该混合物在0℃搅拌30分钟。将溶液冷却 至–78℃。-78℃逐滴加入纯Et3N(18mL，535mmol)。在-78℃继续搅拌10分钟。逐滴加入异丁 醛(6.5mL，2.3mmol)。将反应混合物于-78℃搅拌1小时，然后将溶液升温至室温。用50％饱 和NH4Cl水溶液，然后是EtOAc淬灭反应。水相用EtOAc萃取五次。收集的有机相用无水Na2SO4 干燥、过滤和浓缩。将残留物用快速柱色谱纯化，得到9.2g的标题化合物(2，63％的分离产 率)，为黄色的油。1H  NMR与文献一致(J.Org.Chem.2016，81，10302-10320)，MS[M H]m/z＝ 254.0598(实测值)。 [1907] [1908] 实施例2:2-(3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)4-甲基戊酰基)噻唑-4-羧酸乙酯 [1909] 室温下，向(E)-2-(4-甲基戊-2-烯酰基)噻唑-4-羧酸乙酯(2，9.2g，36.36mmol)的 DCM(150mL)溶液中一次性加入BOC-NHMe(9.85g，75.09mmol)，然后室温下一次性加入Cu 199 CN 111601803 A 说　明　书 183/185 页 (OTf)2(2.72g，7.51mmol)。所得反应混合物搅拌15h，然后真空浓缩，得到残留物，该残留物 通过快速柱色谱纯化，得到5.2g标题化合物(3，38％的分离产率)。1H  NMR与其结构一致。MS [M Na]m/z＝407.1250(实测值).HPLC(方法B):tR＝11.7分钟。 [1910] 实施例3:用于氮杂-迈克尔共轭加成反应的过渡金属催化剂和溶剂中的变化 [1911] 在10摩尔％各种过渡金属(II)或过渡金属(III)催化剂的存在下，以及各种溶剂 变化，通过RP-HPLC分析反应混合物，在220nm监测，确定(E)-2-(4-甲基戊-2-烯酰基)噻唑- 4-羧酸酯(2)和BOC-NHMe向2-(3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)4-甲基戊酰基)-噻唑-4-羧 酸乙酯(3)的转化。表1列出了这些变化导致的各种转化。 [1912] 表1：过渡金属催化剂和溶剂对氮杂-迈克尔共轭加成反应的影响。 [1913] [1914] [1915] [1916] *文献报道采用Sn(OTf)2和BOC-NH2，通过氮杂-迈克尔共轭加成合成2-(3-((叔丁 氧基羰基)氨基)4-甲基戊酰基)噻唑-4-羧酸乙酯(化合物3的脱甲基形式)，产率60％ (Sani，M.等，Angew.Chem.Int’l.Ed .(2007)46:3526-3529)，而采用BOC-NHMe的相同的氮 杂-迈克尔共轭加成没有可观察到的向化合物3的转化。 [1917] 实施例4:2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻 唑-4-羧酸乙酯 200 CN 111601803 A 说　明　书 184/185 页 [1918] 0℃，向(S)-CBS催化剂(1.0M在THF中，3.74mL，3.74mmol)的THF(130mL)溶液中加 入BH3·SMe2(2.0M  in  THF，9.85mL，19.68mmol)。搅拌10分钟后，所得反应混合物冷却至-40 ℃，然后加入2-(3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-4-甲基戊酰基)噻唑-4-羧酸乙酯(7.2g， 18.75mmol)的THF(65mL)溶液，然后搅拌18h，使温度逐渐升至室温。然后用MeOH(130mL)淬 灭反应，减压除去溶剂。残留物通过快速色谱进行纯化，得到3 .27g(44％的分离产率， 97 .3％e .e .)油状的标题化合物(1R ,3R)-非对映异构体of(R ,R)-式1a。S[M Na]m/z＝ 409.1461(实测值)，也提供纯化形式的(R,S)-式1a的(1R,3S)-非对映异构体。通过手性色 谱和旋光性对这两种非对映异构体的光学表征如下所示。 [1919] HPLC(方法C):tR(1R,3R)＝17.2分钟，[α]21 .6D(c＝10，MeCN)-7.7度；tR(1R,3S)＝ 7.7分钟(方法C)，[α]21.6D(c＝10，MeCN) 37.3度。 [1920] 在快速色谱之前和之后，标题化合物(1R,3R)-BOC-脱酰基-Tuv-OEt，及其光学异 构体的百分含量如下表2所示。 [1921] 表2：BOC-脱酰基-Tuv-OEt的光学异构体的相对含量(％) [1922] [1923] 通过分析型手性色谱，通过扩展先前报道的立体选择性途径(J.Org .Chem.2008， 73:4362-4369)制备(1R,3R)-BOC-脱酰基-Tuv-OEt与分离的(R,R)-式1a的主要光学异构体 的1H-NMR谱相同，如表2所示。 [1924] 对于粗品中的两种次要光学杂质(表2的(S,R)-式1a和(S,S)-式1a)进行光学表 征，用(R)-CBS还原2-(3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-4-甲基戊酰基)-噻唑-4-羧酸乙酯 以获得作为主要的光学产物的那些化合物。这两种分离的非对映异构体的光学表征如下： [1925] HPLC(方法C):t (1S,3R)＝7.7分钟.，[α]22.0R D(c＝10，MeCN)-39.1度；tR(1S,3S)＝ 12.1分钟，[α]21.9D(c＝10，MeCN) 7.6度。 [1926] [1927] 实施例5:2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻 唑-4-羧酸 [1928] 0℃，向2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊基)噻唑- 201 CN 111601803 A 说　明　书 185/185 页 4-羧酸乙酯(1.4g，3.7mmol)的THF(26mL)溶液中加入LiOH一水合物(0.19g，4.4mmol)的水 (5mL)溶液。所得反应溶液逐渐升温至室温保持16小时，然后用饱和KHSO4淬灭，用EtOAc稀 释。收集有机相，剩余的水相用EtOAc萃取两次。合并的有机提取物用盐水洗涤，然后用无水 Na2SO4干燥，过滤，浓缩后得到粗品标题化合物(1.3g，96％的分离产率)。 [1929] (R ,R)-式2标题化合物的其他光学异构体类似地通过水解实施例4中所述的每种 相应的光学异构体来制备。每种光学异构体的旋光度如下。(R ,R)-式2:[α]22 .0D(c＝10， MeCN)-1 .00度；(R ,S)-式2:[α]22 .0D(c＝10，MeCN) 0 .52度；(S,S)-式2:[α]22 .0D(c＝10， MeCN) 1.28度；(S,R)-式2:[α]22.0D(c＝10，MeCN)–0.42度。 [1930] [1931] 实施例6:2-((1R ,3R)-1-乙酰氧基-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-4-甲基戊 基)噻唑-4-羧酸 [1932] 0℃，5分钟内向2-((1R,3R)-3-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)-1-羟基-4-甲基戊 基)噻唑-4-羧酸(3.51mmol)的DCM(25mL)溶液中加入吡啶(1.5mL，18.42mmol)。10分钟内向 该溶液中加入Ac2O(1.5mL，16.84mmol)。除去冰浴，将反应溶液升温至室温保持16h。在0℃ 将水(10mL)逐滴加入反应混合物中。然后除去冰浴，并将反应混合物在室温剧烈搅拌1小 时。将溶液用DCM(10mL)稀释。收集有机层。将水相用DCM萃取三次。有机相先后用10％柠檬 酸溶液和水萃取。有机层经无水Na2SO4干燥、过滤，浓缩后得到粗品材料。将粗品材料通过快 速色谱进行纯化，得到1.215g标题化合物(BOC-Tuv-OH)，为白色泡沫(86％产率)。1H  NMR (400MHz，CDCl3)显示与BOC-Tuv-OH报道一致(Columbo，R .等，J.Org .Chem .(2016)81: 10302-10320)；[M H]m/z＝400.9301(实测值)，HPLC(方法A):tR＝19.24分钟。 202