技术摘要：
本发明涉及吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，其是利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤：(1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液；(2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液；(3)进样，按以下条件对步骤(1)供 全部
背景技术：
吲达帕胺为磺胺类利尿药，具有利尿和钙拮抗作用，是一种强效、长效的降压药， 临床上还用于充血性心力衰竭时水钠潴留的治疗。DCC(二环己基碳二亚胺)和DCU(二环己 基脲)为吲达帕胺合成工艺中的残留物，目前国标HG/T5320-2018仅公开了DCC质量分数的 测定方法，现有技术中并没有任何关于DCC和DCU含量的检测方法，更没有同时能够进行DCC 和DCU含量的检测方法。
技术实现要素：
本发明针对现有技术中存在的技术问题，提供一种吲达帕胺原料药中DCC和DCU含 量的检测方法，该检测方法可以同时进行DCC和DCU含量的检测，检出限低、节省时间且检测 结果准确。 本发明解决上述技术问题的技术方案如下：吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检 测方法，利用高效液相色谱法对吲达帕胺原料药中的DCC和DCU进行检测，包括以下步骤： (1)配制吲达帕胺原料药供试品溶液； (2)分别配制DCC对照品溶液、DCU的对照品溶液和DCC&DCU对照品溶液； (3)进样，按以下条件对步骤(1)供试品溶液和步骤(2)中的对照品溶液分别进行 检测： 色谱条件：流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由10-40％逐渐升至90- 98％；柱温为33-37℃；流速为1.4-1.6ml/min；检测波长为190-210nm； (4)将供试品DCC、DCU对应的峰面积与对照品溶液计算得到DCC、DCU的含量。 其中，色谱柱为C18液相色谱柱。 优选地，色谱柱为Agela Venusil C18 Plus，4.6*200mm,5μm。 优选地，色谱柱为Agela Venusil XBP C18，4.6*200mm，5μm。 其中，步骤(3)中色谱条件为：进样量为10μl。 优选地，步骤(3)中色谱条件为：检测波长为205nm。 优选地，步骤(3)中色谱条件为：梯度洗脱：0-30min乙腈比例由35％逐级升高至 95％；柱温为35℃；流速为1.5ml/min；检测波长为205nm。 其中，步骤(1)中吲达帕胺原料药供试品溶液的浓度为3-7mg/ml。 其中，步骤(1)中DCC的浓度为5-10μg/ml，DCU的浓度为5-10μg/ml。 1、本发明对色谱条件中的波长进行优化： 优化时：色谱柱：Agela Venusil C18 Plus，4.6*200mm,5μm；流速：1.5ml/min；柱 温：35℃；进样量：10μl；流动相：乙腈-水；梯度洗脱：0-30min乙腈比例由35％逐渐升至 3 CN 111595954 A 说 明 书 2/13 页 95％。 取DCC、DCU对照品溶液在160-400nm波长范围内进行扫描，根据扫描所得色谱图可 知，DCC、DCU的响应值在190-210nm范围内响应值较高，考虑到溶剂的末端吸收干扰，因此以 波长在205nm时为最佳。 2、本发明对色谱条件中的梯度洗脱条件进行优化： 优化时：色谱柱：Agela Venusil C18 Plus，4.6*200mm,5μm；流速：1.5ml/min；柱 温：35℃；检测波长：205nm；进样量：10μl；流动相:乙腈-水。 分别改变乙腈的起始比例为5％、10％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％， 其中以乙腈起始比例为35％时，分离和保留时间为最佳。 本发明检测吲达帕胺原料药中DCC和DCU的含量，DCC的线性范围在0 .9279～ 14 .8464μg/ml之间，检出限为0.4639μg/ml，平均回收率大于99.2％，DCU的线性范围在 0.9336μg/ml～14.9372μg/ml之间，检出限为0.4668μg/ml，平均回收率大于102.4％。本发 明所提供的吲达帕胺原料药中DCC和DCU含量的检测方法，使用的试剂毒性小，杂质干扰少， 检测方法可靠稳定，对吲达帕胺原料药的质量控制具有重要意义。 附图说明 图1为实施例1中加标样品溶液的色谱图； 图2为实施例2中加标样品溶液的色谱图； 图3为实施例3中加标样品溶液的色谱图； 图4为实施例4中加标样品溶液的色谱图； 图5为实施例5中加标样品溶液的色谱图； 图6为实施例6中编号为1的供试品溶液的色谱图； 图7为实施例6中编号为2的供试品溶液的色谱图； 图8为实施例6中编号为3的供试品溶液的色谱图； 图9为实施例6中编号为4的供试品溶液的色谱图； 图10为实施例6中对照品溶液的色谱图； 图11为实施例6中DCC对照品溶液的色谱图； 图12为实施例6中DCU对照品溶液的色谱图。
