技术摘要：
本公开涉及用于测量生物样品中单独或与总蛋白质组合的分析物的方法。更具体地，本公开涉及使用单独或与蛋白沉淀试剂组合的一种或多种比色试剂测量分析物和/或总蛋白质的方法。
背景技术：
为了筛查多种健康状况，通常需要分析生物样品中一种或多种分析物的量，诸如 红血球或白血球、钙离子、钾离子、氯离子、钠离子、葡萄糖、乳酸盐、肌酸酐、肌酸、尿素、尿 酸、乙醇、白蛋白、碱性磷酸酶、胆固醇、丙酮酸、β-羟基丁酸酯、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨 酸氨基转移酶、乙酰胆碱酯酶等。除了测量特定的分析物外，它可能还有助于测量样品中总 蛋白质的量。例如，测量总蛋白质可能有助于诊断肾脏疾病或急性肾损伤。分析生物样品中 特定分析物和总蛋白质的浓度通常需要将样品送至实验室进行分析。这会导致样品处理工 作增加、实验室结果的周转时间延长、特殊的运输要求以及增加的存储时间，进而可能导致 细菌污染和/或细菌在样品中过度生长、关键蛋白质水平变化、铸件和细胞的降解、晶体的 溶解或形成、样品pH值变化、样品的气味增加以及对样品的其他有害影响。
技术实现要素：
因此，本发明人已经鉴定了对即时检验的需要，该即时检验可以有效、准确和成本 有效地测量生物样品和其他样品中的分析物浓度、总蛋白质含量或其组合。 本公开的一个方面提供了测量样品中分析物或总蛋白质的浓度的方法。该方法包 括使样品与比色试剂接触以获得经处理的样品。该方法还包括将包括光圈的照相机聚焦在 经处理的样品上；将光圈打开足以从样品收集预定的光量的时间段；以及测量光圈打开的 时间段。然后将光圈打开的时间段与样品中分析物或总蛋白质的浓度相关联。在某些实施 方式中，该方法测量分析物的浓度。在某些实施方式中，该方法测量总蛋白质的浓度。 在本公开的测量样品中分析物或总蛋白质的浓度的方法的另一方面，该方法包括 使样品与比色试剂接触以获得经处理的样品。该方法进一步包括将包括光圈的照相机聚焦 在经处理的样品上；将光圈打开预定的时间段，其中光圈的尺寸足以从样品收集预定的光 量；并测量光圈的大小。然后将光圈的大小与样品中分析物或总蛋白质的浓度相关联。在某 些实施方式中，该方法测量分析物的浓度。在某些实施方式中，该方法测量总蛋白质的浓 度。 本公开的一个方面提供了测量样品中总蛋白质浓度的方法。该方法包括使样品与 蛋白质沉淀试剂接触以获得包括蛋白质沉淀的经处理的样品。该方法还包括通过照相机生 6 CN 111602053 A 说　明　书 2/18 页 成经处理的样品的图像，以及测量与图像中的蛋白质沉淀相关联的像素数。然后将像素数 与标准曲线相关联，以获得样品中总蛋白质的浓度。 本公开的另一方面提供了测量样品中分析物和总蛋白质的浓度的方法。该方法包 括使样品与比色试剂和蛋白质沉淀试剂接触，以获得包括蛋白质沉淀的经处理的样品。该 方法还包括通过将包括光圈的照相机聚焦在经处理的样品上来测定经处理的样品中分析 物的浓度；将光圈打开足以从经处理的样品收集预定的光量的时间段；测量光圈打开的时 间段；使光圈打开的时间段与样品中分析物的浓度相关联。该方法进一步包括通过通过照 相机生成经处理的样品的图像来测定总蛋白质的浓度；测量与图像中蛋白质沉淀相关联的 像素数；使像素数与标准曲线相关联，得到样品中总蛋白质的浓度。 在本公开的测量样品中分析物和总蛋白质的浓度的方法的另一方面，该方法包括 使样品与比色试剂和蛋白质沉淀试剂接触以获得包括蛋白质沉淀的经处理的样品。该方法 还包括通过将包括光圈的照相机聚焦在经处理的样品上来测定经处理的样品中分析物的 浓度；将光圈打开预定的时间段，其中光圈的尺寸足以从样品收集预定的光量；测量光圈的 大小；使光圈的大小与样品中分析物的浓度相关联。该方法进一步包括通过通过照相机生 成经处理的样品的图像来测定总蛋白质的浓度；测量与图像中蛋白质沉淀相关联的像素 数；使像素数与标准曲线相关联，以获得样品中总蛋白质的浓度。 在本公开的测量样品中分析物和总蛋白质的浓度的方法的另一方面，该方法包括 使样品与比色试剂和蛋白质沉淀试剂接触以获得包括蛋白质沉淀的经处理的样品。该方法 进一步包括通过将照相机聚焦在经处理的样品上来测定经处理的样品中分析物的浓度；将 光圈打开以从样品收集光量；测量所收集的光量的强度；使收集的光的强度与样品中分析 物的浓度相关联。该方法进一步包括通过通过照相机生成经处理的样品的图像来测定总蛋 白质的浓度；测量与图像中蛋白质沉淀相关的像素数；使像素数与标准曲线相关联，以获得 样品中总蛋白质的浓度。 在本公开的方法的某些实施方式中，分析物可以选自钙离子、钾离子、氯离子、钠 离子、葡萄糖、乳酸盐、肌酸酐、肌酸、尿素、尿酸、乙醇、白蛋白、碱性磷酸酶、胆固醇、丙酮 酸、β-羟基丁酸酯、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和乙酰胆碱酯酶。在本公开的 方法的某些实施方式中，分析物可以是肌酸酐、葡萄糖、白蛋白或碱性磷酸酶。 在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可以是2,4,6-三硝基苯酚和碱。在 本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂是3,5-二硝基苯甲酸甲酯，3,5-二硝基苯甲酸 或3,5-二硝基苯甲酰氯，和碱或碱性缓冲液。在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂 是包含铜离子、氢过氧化物和可氧化染料的试剂系统。在本发明方法的某些实施方式中，比 色试剂包含3,5-二硝基苯甲酰氯。在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可以是葡 萄糖氧化酶、己糖激酶、碱性酒石酸铜、碱性铁氰化物和辣根过氧化物酶中的一种或多种。 在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可以是溴甲酚绿。在本公开的方法的某些实 施方式中，比色试剂可以是包含5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸酯(BCIP)和硝基四氮唑蓝(NBT)的 试剂系统。在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可包括邻苯二酚紫，苄索氯铵或邻 苯三酚红。在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可包含邻苯二酚紫。 在本公开的方法的某些实施方式中，比色试剂可包括一种或多种适合于免疫测定 的试剂。例如，比色试剂可以包括一种或多种适用于酶联免疫吸附测定(ELISA)或酶增强免 7 CN 111602053 A 说　明　书 3/18 页 疫测定技术(EIMT)的分析物特异性抗体和/或酶。 在本公开的方法的某些实施方式中，蛋白质沉淀试剂可以是一种或多种与水混溶 的溶剂(诸如醇，例如异丙醇、甲醇或乙醇，酮，例如丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮或环己 酮，四氢呋喃)；或蛋白质沉淀试剂为盐(诸如硫酸铵或包含多价金属离子的盐)；或蛋白质 沉淀试剂为三氯乙酸或三氯乙酸和丙酮；或者蛋白质沉淀试剂是聚合物(例如，非离子性亲 水聚合物，诸如聚乙二醇和葡聚糖)。在本公开的方法的某些实施方式中，蛋白质沉淀试剂 可以是水性表面活性剂。在本公开的方法的某些实施方式中，水性表面活性剂可以是苯扎 氯铵或苄索氯铵。 在本公开的方法的某些实施方式中，样品可以是尿样。 在某些实施方式中，本公开的方法可以进一步包括使用从经处理的样品收集的预 定的光量来生成经处理的样品的图像。在本公开的方法的某些实施方式中，可以从包含经 处理的样品的载玻片成像经处理的样品。在本公开的方法的某些实施方式中，图像可以是 黑白图像。 在某些实施方式中，本公开的方法可以进一步包括在用户界面上显示经处理的样 品的图像。在本公开的方法的某些实施方式中，预定的光量可能足以测量来自经处理的样 品的图像的蛋白质沉淀的量。在本公开的方法的某些实施方式中，预定的光量可以是恒定 的。在本公开的方法的某些实施方式中，预定的光量可以由照相机的用户选择。在本公开的 方法的某些实施方式中，照相机可以包括滤光器。在本公开的方法的某些实施方式中，滤光 器可以被配置为使对应于由比色试剂与样品之间的反应产生的颜色的波长范围的波长通 过。在本公开的方法的某些实施方式中，照相机可以包括自动曝光功能，并且其中测量光圈 打开的时间段包括使用自动曝光功能来测定时间段。在本公开的方法的某些实施方式中， 可以基于光圈尺寸和光的预定的光量中的至少一项来进行测定。 在本公开的方法的某些实施方式中，照相机可以包括传感器，并且其中将光圈打 开足以从样品收集的预定的光量的时间段包括：将光圈打开；通过传感器检测照相机收集 的光量；测定照相机收集的光量是否基本上等于预定的光量；在测定照相机已经收集了预 定的光量之后，关闭光圈。 在本公开的方法的某些实施方式中，照相机可以包括传感器，并且其中将光圈打 开足以从样品收集预定的光量的时间段包括：将光圈打开一段时间以从经处理的样品收集 光量；关闭光圈；通过传感器测量从经处理的样品收集的光量；测定从经处理的样品收集的 光量是否基本上等于预定的光量；如果从样品接收的光量基本上不等于预定的光量，则将 光圈打开第二时间段，其中第二时间段不同于第一时间段；使光圈打开的第二时间段与预 定的光量相关联，以获得样品中分析物或总蛋白质的浓度. 在本公开的方法的某些实施方式中，照相机可以包括自动曝光功能，并且其中测 量光圈的尺寸包括使用自动曝光功能来测定光圈的尺寸。在本公开的方法的某些实施方式 中，可以基于时间段和光的预定量中的至少一项来进行测定。 在本公开的方法的某些实施方式中，照相机可以包括传感器，并且其中将光圈打 开一段时间包括：将光圈打开以从样品收集光量，其中光圈包括第一光圈尺寸；关闭光圈； 通过传感器测量从经处理的样品收集的光量；测定从样品收集的光量是否基本上等于预定 的光量；如果从样品接收的光量基本上不等于预定的光量，则将光圈打开第二时间段，其中 8 CN 111602053 A 说　明　书 4/18 页 光圈具有第二光圈尺寸，其中第二光圈尺寸与第一光圈尺寸不同；使光圈的第二光圈尺寸 与预定的光量相关联，以获得样品中分析物或总蛋白质的浓度。在某些实施方式中，本公开 的方法可以进一步包括至少基于样品中肌酸酐的浓度和样品中总蛋白质的浓度来测定样 品的蛋白质：肌酸酐的比率。 在某些实施方式中，本公开的方法可以进一步包括至少基于样品中分析物和/或 总蛋白质的浓度进行健康测定。 前述