技术摘要：
一种益心复脉颗粒质量控制方法，具体方法：对照品溶液的制备；供试品溶液的制备；色谱条件选择；测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；线性范围考察，精密度考察，重复性考察，稳定性考察，回收率试验，丹参的薄层鉴别，川  全部
背景技术：
益心复脉颗粒其功能主治为益气养阴，活血复脉；用于气阴两虚，心血内阻，胸痹 心痛，胸闷不舒，心悸脉结代。具有载药量高、起效快、无异味、携带方便等特性。 益心复脉颗粒是由生晒参、黄芪、麦冬、五味子、丹参、川芎6味药材组成的复方制 剂，其中生晒参：具有大补元气，益血，养心安神的作用。 生晒参能提高脑、体力活动能力和免疫功能，增强抗应激、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰 老、抗辐射、益心、复脉、安神生津、补肺健脾。 麦冬：具有甘寒清润，善清心肺之热而养阴除烦，兼可清润胃肠而止渴润燥。抗实 验性心律失常、增加冠脉流量。 五味子：是一种具有辛、甘、酸、苦、咸五种药性。选用传统正品北五味入药，品质优 良。收敛固涩，益气生津，补肾宁心。用于久嗽虚喘，梦遗滑精，遗尿尿频，久泻不止，自汗，盗 汗，津伤口渴，短气脉虚，内热消渴，心悸失眠。 黄芪：有补气升阳、生血行滞之力，现在药理研究发现，黄芪还可清除氧自由基，减 轻机体脂质过氧化损伤。丹参：有活血祛瘀之功，不仅可以抑制血小板聚集，抑制血栓形成 而且所含丹参素还可抑制胆固醇的合成、抗细胞氧化。 川芎：活血行气，祛风止痛。可提高血小板中cAMP含量，降低TXA2活性；降低血小板 表面活性、抑制血小板聚集、使已聚集血小板解聚。 由于活性成分众多，因此需要灵敏的检测方法对益心复脉颗粒的活性成分进行检 测，但现有检测方法仅包含性状、2个显色鉴别及检查项下的相关检测项，未进行药材的定 性或定量检测，不能全面反映产品的质量状况。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供种一种益心复脉颗粒质量控制方法。 本发明一种益心复脉颗粒质量控制方法，具体方法包含以下步骤：步骤一、对照品 溶液的制备，取人参皂苷Rg1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即 得； 步骤二、供试品溶液的制备，取益心复脉颗粒45g，精密称定，精密加甲醇300ml，称 定重量，加热回流1小时，放冷，称重，补足重量，滤过，精密量取续滤液200ml蒸干，残渣加水 40ml使溶解，用二氯甲烷提取3次，每次25ml，弃去二氯甲烷液，再用水饱和的正丁醇振摇提 取3次，每次40ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤4次，每次20ml，合并氨洗液，用以氨溶液饱 和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，与上述正丁醇液合并，减压蒸干，加水10ml 使溶解，将水液通过D101型大孔吸附树脂，吸附树脂内径1.5cm，长15cm，用水50ml洗脱，弃去 4 CN 111595986 A 说　明　书 2/5 页 水液，再用20％乙醇50ml洗脱，弃去20％乙醇液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸 干，残渣用甲醇适量使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即 得； 步骤三、色谱条件选择，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05％磷酸 溶液(19.5:80.5)为流动相；检测波长为203nm；柱温40℃；理论板数按人参皂苷Rg1计算应 不低于6000； 步骤四、测定法，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱 仪，测定，即得； 步骤五、线性范围考察，取人参皂苷Rg1对照品约20mg，精密称定，置25ml棕色容量 瓶中，加甲醇稀释至刻度，精密吸取该对照品溶液，将其配成浓度分别为48.75μg/ml、97.50 μg/ml、195μg/ml、390μg/ml的对照品溶液，摇匀，按照步骤三的色谱条件分别进样20μl，以 峰面积Y为纵坐标，浓度(X，μg/ml)为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为：Y＝18166.1174 1223252.1760X(r＝0.9998)； 步骤六、精密度考察，精密吸C＝0.3016mg/ml的人参皂苷Rg1对照品溶液20μl，在 步骤三的色谱条件下重复进样6次，测定峰面积，计算精密度，RSD值小于3％，精密度良好； 步骤七、重复性考察，精密称取同一批号的样品，平行制备6份供试品溶液，分别进 样20μl，测得峰面积值，计算相对标准偏差，RSD小于3％，重复性良好； 步骤八、稳定性考察，精密称取一批样品，按照步骤二制备供试品溶液，分别于0h、 6h、12h及24h进样20μl，测得峰面积值，样品在24小时内稳定性良好； 步骤九、回收率试验，取六份已知含量的供试品溶液，精密称定，将一定量人参皂 苷Rg1对照品溶液分别加入六份供试品中，按供试品溶液制备项下操作，用上述试验条件进 行HPLC分析，计算回收量，并以下列公式计算回收率，回收率在95％-105％之间，RSD小于 5％，表明方法准确度良好； 步骤十、丹参的薄层鉴别，取益心复脉颗粒供试品10g，研细，加0.1mol/L盐酸溶液 20ml，搅拌使溶解，离心，分取上清液，加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，挥干，残 渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取丹参对照药材0.5g，加水适量，煎煮0.5小时，滤 过，滤液浓缩至近干，按照供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试 验，吸取供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙 酮-甲酸(25:10:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱 中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，分离度、重现性好，阴性无干扰； 步骤十一、川芎的薄层鉴别，取益心复脉颗粒供试品10g，加70％乙醇50ml，超声处 理30分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml， 合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100－200目，2g，内径1 ～1.5cm)上，用甲醇20ml洗脱，弃去甲醇液，再用70％甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取川芎对照药材1g，加水煎煮1小时，滤过，滤液浓 缩至5ml，按照供试品溶液制备方法，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法，吸取上述两种 溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸10:5:0.5为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，紫外光灯365nm下检 视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。 5 CN 111595986 A 说　明　书 3/5 页 与现有技术相比，本发明的有益效果如下：在原来的质量标准基础上做了相应的 补充和提高，增加了丹参、川芎的薄层鉴别；同时建立了人参的含量测定项目。此种定性方 法成熟，操作简便，结果可靠，阴性不干扰；定量方法准确、稳定、重现性好。 附图说明 图1为实施例中人参皂苷Rg1标准曲线的制备图； 图2为实施例中人参皂苷Rg1精密度试验结果图； 图3为实施例中重复性考察试验结果图； 图4为实施例中稳定性试验结果图； 图5为实施例中回收率测定结果图； 图6为实施例中3批样品的含量测定结果图； 图7为实施例中丹参的薄层色谱图； 图8为实施例中川芎的薄层色谱图； 图9为实施例中人参皂苷Rg1对照品扫描图； 图10为实施例中人参皂苷Rg1对照品色谱图； 图11为实施例中益心复脉颗粒供试品色谱图； 图12为实施例中阴性对照色谱图； 图13为实施例中人参对照药材色谱图。