技术摘要：
本发明提供一种防治柑橘黄龙病的组合物及其方法，首次采用具有抑制革兰氏阴性菌的中药材提取物进行黄龙病菌抑菌试验，结果显示五倍子乙酸乙酯萃取物和大血藤正丁醇萃取物的抑菌效果明显，同时采用高效液相技术对化合物进行分离，再利用1H NMR、13C NMR及MS对化合物结构  全部
背景技术：
柑橘(Citrus  L.)属芸香科柑橘亚科是热带、亚热带常绿果树，可以用于作为经济 栽培的主要有三个属：积属、柑橘属和金柑属，其中又以柑橘属为主要栽培品种。中国是世 界三大柑橘主要生产国家之一，已有四千多年的悠久栽培历史，种植资源也非常丰富。我国 柑橘的经济栽培区主要分布在北纬20-30度之间，海拔700-1000米以下。全国栽培柑橘主要 分布在包括台湾省在内有19个省，其中主产柑橘的有浙江、福建、湖南、四川、广西、湖北、广 东、江西、重庆和台湾等10个省(市、区)。柑橘果实中营养丰富，色香味俱全，果实即可用于 新鲜食用，又可用于果汁的加工，还可以从果皮和果肉中提取香精油等工业深层次加工。柑 橘种子中富含有维生素E，可以用于榨取植物油和提取植物蛋白。我国柑橘的产量居各种水 果之首，受到广大消费者的青睐。在我国柑橘产业已经成为农业产业结构调整、农民增收的 主导和支柱项目。 我国的柑橘品种主要可以分为柑类、橘类、橙类、柠檬类和柏类五个方面。其中又 以宽皮柑橘为主要生产和栽培品种。我国宽皮柑橘占柑橘总产量的71％，橙类占16％柚子 类和其它占13％。而世界柑橘以橙类为主(锦橙、脐橙)，约占63％，宽皮柑橘(温州蜜柑、碰 柑)占17％，葡萄柏、柠檬等占20％。温州蜜柑是我国柑橘栽培的主要种类，目前栽培较多的 为早熟的宫川、兴津等早熟品种，成熟期一般在10月上中旬。但在10月以前成熟的品种不 多，表现较好的更少。碰柑是我国宽皮橘的优势类型和主要出口类型。目前，栽培的品种的 成熟期以中熟为主，早熟和晚熟品种栽培较少，一般可在10月下旬至11月中下旬采收。锦橙 又名鹅蛋柑26号，原产中国重庆江津，系40年代从地方实生甜橙中选出的优良变异，是中国 甜橙中发展最快的品种，一般在11月下旬成熟。 黄龙病是柑橘的一种致命性病菌灾害，染病后的植株分支变多，叶片变小且呈斑 驳性黄化，果实着色不均匀且呈畸形，较正常果实小，严重影响柑橘产量和品质。并且一片 柑橘园一旦发现病情，很快便会蔓延整块桔园。目前尚无有效的防治方法，植株染病后，只 能挖除销毁，对柑橘产业具有毁灭性的后果。其病原菌是韧皮部限制的革兰氏阴性菌，分为 亚洲种(Carndidatus  Liberibacter  asiaticus ,Ca .Las)、美洲种(Carndidatus  Liberibacter  americanus ,Ca .Lam)、非洲种(Candidates  Liberibacter  africanus , Ca.Laf)，其中亚洲种危害最严重。柑橘木虱(Diaphorina  citri)(昆虫纲，同翅目，木虱科) 主要危害柑橘等芸香科植物，也是黄龙病在自然界的主要传播媒介。 现有技术存在的问题：现有技术中还未见有效的防治黄龙病的方法，特别是未见 利用中草药的有效成分及其修饰化合物防治黄龙病的方法。 3 CN 111567525 A 说　明　书 2/6 页
技术实现要素：
本发明要解决的关键技术问题在于提供一种防治柑橘黄龙病的组合物及其方法， 通过从抑菌中药中提取有效部位和有效单体制成黄龙病菌的抑制剂。 为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案： 1、一种黄龙病病原菌分离和培养方法，包括：(1)样品的采集与处理；(2)黄龙病菌 培养基配置；(3)黄龙病菌种培养与培养体系优化；(4)基于16S  rDNA的菌种鉴定。 2、一种黄龙病菌抑菌剂的提取方法，包括如下步骤：(1)药材选择与组合物提取； (2)提取部位抑菌效果验证；(3)组合物黄龙病防治效果验证。 3、一种黄龙病菌抑菌化合物的提取方法，包括如下步骤：(1)高效液相色谱分离活 性成分；(2)抑菌效果验证；(3)抑制剂化学结构解释；(4)化合物黄龙病防治效果验证。 4、五倍子乙酸乙酯萃取物和大血藤正丁醇萃取物在抑制黄龙病菌中的应用。 5、没食子酸和水杨酸在抑制黄龙病菌中的应用。 附图说明 图1为本发明抑菌圈测量图； 图中，d代表抑菌圈直径。 具体实施方法 本发明专利下述实施例中使用方法和装置，如无特殊说明，均为常规方法和装置； 所用器材、试剂均为试剂公司购买的常规器材和试剂。为使本发明专利的目的、技术方案和 优点更加清楚，下面结合具体实施例对本发明专利的