技术摘要：
本发明公开了一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用。所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子是碱性成纤维细胞生长因子和胶原结合区融合形成的蛋白质。实验证明：经过胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子治疗后，不孕患者月经血量、子宫内膜厚度和瘢痕子宫 全部
背景技术：
子宫内膜粘连(IUAs)也称为Asherman综合征(AS)，是子宫内膜创伤或炎症侵扰的 结果，是子宫不孕的主要原因。对于有症状的IUAs，利用宫腔镜粘连松解术以恢复子宫腔的 正常解剖是目前唯一推荐的方法。然而，IUAs的复发非常常见且难以治疗，尤其是严重的粘 连。子宫内膜是一种独特的循环性的组织再生系统，依赖于子宫内膜血管的周期性生长和 消退。子宫内膜的严重损伤，也就是对上皮下毛细血管丛的损伤，会导致子宫内膜再生的阻 塞。天然细胞，包括上皮细胞，基质细胞，血管内皮细胞和免疫细胞，被成纤维细胞和肌成纤 维细胞取代，后者产生大量细胞外基质，包括胶原纤维，最终导致子宫内膜瘢痕形成。致密 纤维化区域的子宫内膜薄而萎缩，腺体无活性，血管化基质不足，这都阻止了胚胎的正常植 入。目前，针对这种情况的改善生育结果的有效方法很少。 bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)是毛细血管内皮细胞的有效的体外促分裂原，在 体内能刺激血管生成，并在伤口愈合和组织修复中发挥重要作用。在月经周期期间，bFGF对 于子宫内膜中的血管生成，再上皮化，血管功能和基质细胞增殖是必需的。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是如何促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建，治疗和/或预 防子宫内膜粘连导致的子宫不孕。 为了解决上述技术问题，本发明首先提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子 (CBD-bFGF)的新用途。 本发明提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)在如下1)-9)中任一 种中的应用： 1)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品； 2)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品； 3)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品； 4)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品； 5)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品； 6)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品； 7)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品； 8)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品； 9)制备提高妊娠率的产品； 所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)是碱性成纤维细胞生长因子 5 CN 111592599 A 说 明 书 2/9 页 (bFGF)和胶原结合区(CBD)融合形成的蛋白质。 上述应用中，所述碱性成纤维细胞生长因子为如下a1)或a2)或a3)所示的蛋白质： a1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的第25-178位所示的蛋白质； a2)将SEQ ID No.1的第25-178位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基 的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； a3)与SEQ ID No.1的第25-178位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源 性且具有相同功能的蛋白质； 所述胶原结合区为如下b1)或b2)或b3)所示的蛋白质： b1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的第3-9位所示的蛋白质； b2)将SEQ ID No.1的第3-9位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取 代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； b3)与SEQ ID No.1的第3-9位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且 具有相同功能的蛋白质。 在本发明的一个具体实施例中，所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子为如下 c1)或c2)或c3)所示的蛋白质： c1)氨基酸序列是SEQ ID No.1所示的蛋白质； c2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺 失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； c3)与SEQ ID No.1所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同 功能的蛋白质。 上述a2)、b2)、c2)中的蛋白质，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/ 或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。 上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。 为了解决上述技术问题，本发明还提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相 关的生物材料的新用途。 本发明提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相关的生物材料在如下A1)- A10)中任一种中的应用： A1)制备上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子； A2)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品； A3)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品； A4)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品； A5)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品； A6)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品； A7)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品； A8)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品； A9)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品； A10)制备提高妊娠率的产品； 所述生物材料为下述B1)至B12)中的任一种： B1)编码上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子的核酸分子； 6 CN 111592599 A 说 明 书 3/9 页 B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒； B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体； B4)含有B2)所述表达盒的重组载体； B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物； B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物； B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物； B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物； B9)含有B1)所述核酸分子的转基因细胞系； B10)含有B2)所述表达盒的转基因细胞系； B11)含有B3)所述重组载体的转基因细胞系； B12)含有B4)所述重组载体的转基因细胞系。 进一步的，B1)所述核酸分子为如下C1)或C2)或C3)： C1)编码序列是序列表中SEQ ID No.2所示的cDNA分子或DNA分子； C2)与C1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码上述胶原靶向碱 性成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子； C3)在严格条件下与C1)或C2)限定的核苷酸序列杂交，且编码上述胶原靶向碱性 成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子。 其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可 以是RNA，如mRNA或hnRNA等。 本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方 法，对本发明的编码CBD-bFGF的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明 分离得到的CBD-bFGF的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码CBD-bFGF且具 有CBD-bFGF功能，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。 这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发 明的编码SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或 85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算 机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示， 其可以用来评价相关序列之间的同一性。 上述应用中，所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜 2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min； 或，0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃条件下杂交并洗膜。 上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。 上述应用中，B2)所述的含有编码CBD-bFGF的核酸分子的表达盒(CBD-bFGF基因表 达盒)，是指能够在宿主细胞中表达CBD-bFGF的DNA，该DNA不但可包括启动CBD-bFGF基因转 录的启动子，还可包括终止CBD-bFGF基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强 子序列。 上述应用中，所述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。可用现有的表达载体 构建含有所述CBD-bFGF基因表达盒的重组载体。所述表达载体具体可为pET28a表达载体。 进一步的，B3)所述的重组载体可为将所述CBD-bFGF基因插至所述表达载体中得 7 CN 111592599 A 说 明 书 4/9 页 到的重组载体。 更进一步的，所述重组载体具体可为pET28a-CBD-bFGF。所述pET28a-CBD-bFGF为 将pET28a载体的NcoI和XhoI识别序列间的小片段替换为序列表中SEQ ID No.2的第5-537 位所示的DNA片段后得到的载体。 上述应用中，所述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌。其中，细菌可为大肠杆菌，如 大肠杆菌BL21。 上述应用中，所述转基因细胞系不包括繁殖材料。 上述应用中，所述促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力体现在上调瘢痕子宫内 膜范威氏因子vWF表达水平； 所述促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解体现在上调瘢痕子宫内膜雌激素受体-α表 达水平和/或下调瘢痕子宫内膜α-平滑肌肌动蛋白表达水平。 进一步的，所述表达水平可为蛋白水平。 为了解决上述技术问题，本发明最后提供了一种产品。 本发明提供的产品的活性成分为上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子或上述 生物材料； 所述产品的功能为如下(1)-(9)中任一种： (1)治疗和/或预防子宫不孕； (2)治疗和/或预防子宫内膜粘连； (3)促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑； (4)减少瘢痕子宫内膜面积； (5)增加瘢痕子宫内膜厚度； (6)增加瘢痕子宫内膜血流量； (7)促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力； (8)促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解； (9)提高妊娠率。 上述产品中，所述促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力体现在上调瘢痕子宫内 膜范威氏因子vWF表达水平； 所述促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解体现在上调瘢痕子宫内膜雌激素受体-α表 达水平和/或下调瘢痕子宫内膜α-平滑肌肌动蛋白表达水平。 进一步的，所述表达水平可为蛋白水平。 更进一步的，所述产品可为药物。所述药物可以所述CBD-bFGF或所述生物材料作 为活性成分，也可以以所述CBD-bFGF或所述生物材料与其他具有上述至少一种功能的物质 组成的组合物作为活性成分。需要的时候，上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接 受的载体；所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、 吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。在本发明的一个实施例中，所述载体具体为 无菌盐水。 本发明构建了一个胶原靶向的bFGF(CBD-bFGF)，是碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和胶原结合区(CBD)融合形成的蛋白质，通过融合的胶原靶向肽，可以将碱性成纤维 细胞生长因子富集在子宫瘢痕区域，显著促进此区血管的形成和细胞化。本发明将CBD- 8 CN 111592599 A 说 明 书 5/9 页 bFGF局部多点注射到瘢痕形成的18名患者子宫内膜周围，在18名患者中每4周通过超声引 导瘢痕子宫内膜周围给药(2-4次)。结果显示，CBD-bFGF治疗后，患者月经血量，子宫内膜厚 度和瘢痕子宫内膜面积均有所改善。组织学研究显示瘢痕子宫内膜血管密度明显增加。3名 患者(3/18)在妊娠20周时达到妊娠。1名患者产下健康婴儿。本发明利用CBD-bFGF多点注射 到瘢痕子宫内膜，促进了瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力，增加了持续的妊娠率。 附图说明 图1为纯化后的CBD-bFGF溶液的电泳图。 图2为宫腔镜检查结果表明多点注射CBD-bFGF后患者子宫内膜瘢痕面积显著减 少。 图3为注射CBD-bFGF后，患者4号、9号和15号超声扫描三维成像呈现正常子宫腔。 图4为宫腔镜检查结果表明注射CBD-bFGF后患者4号、9号和15号子宫形状恢复正 常，子宫角重新出现，子宫内膜瘢痕被正常子宫内膜取代。 图5为5名患者的子宫内膜血流量有所改善。 图6为PBAC评分。 图7为组化染色和免疫组化染色。
本发明公开了一种促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建的靶向生长因子及其应用。所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子是碱性成纤维细胞生长因子和胶原结合区融合形成的蛋白质。实验证明：经过胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子治疗后，不孕患者月经血量、子宫内膜厚度和瘢痕子宫 全部
背景技术：
子宫内膜粘连(IUAs)也称为Asherman综合征(AS)，是子宫内膜创伤或炎症侵扰的 结果，是子宫不孕的主要原因。对于有症状的IUAs，利用宫腔镜粘连松解术以恢复子宫腔的 正常解剖是目前唯一推荐的方法。然而，IUAs的复发非常常见且难以治疗，尤其是严重的粘 连。子宫内膜是一种独特的循环性的组织再生系统，依赖于子宫内膜血管的周期性生长和 消退。子宫内膜的严重损伤，也就是对上皮下毛细血管丛的损伤，会导致子宫内膜再生的阻 塞。天然细胞，包括上皮细胞，基质细胞，血管内皮细胞和免疫细胞，被成纤维细胞和肌成纤 维细胞取代，后者产生大量细胞外基质，包括胶原纤维，最终导致子宫内膜瘢痕形成。致密 纤维化区域的子宫内膜薄而萎缩，腺体无活性，血管化基质不足，这都阻止了胚胎的正常植 入。目前，针对这种情况的改善生育结果的有效方法很少。 bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)是毛细血管内皮细胞的有效的体外促分裂原，在 体内能刺激血管生成，并在伤口愈合和组织修复中发挥重要作用。在月经周期期间，bFGF对 于子宫内膜中的血管生成，再上皮化，血管功能和基质细胞增殖是必需的。
技术实现要素：
本发明要解决的技术问题是如何促进不孕妇女瘢痕子宫内膜重建，治疗和/或预 防子宫内膜粘连导致的子宫不孕。 为了解决上述技术问题，本发明首先提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子 (CBD-bFGF)的新用途。 本发明提供了胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)在如下1)-9)中任一 种中的应用： 1)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品； 2)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品； 3)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品； 4)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品； 5)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品； 6)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品； 7)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品； 8)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品； 9)制备提高妊娠率的产品； 所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子(CBD-bFGF)是碱性成纤维细胞生长因子 5 CN 111592599 A 说 明 书 2/9 页 (bFGF)和胶原结合区(CBD)融合形成的蛋白质。 上述应用中，所述碱性成纤维细胞生长因子为如下a1)或a2)或a3)所示的蛋白质： a1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的第25-178位所示的蛋白质； a2)将SEQ ID No.1的第25-178位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基 的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； a3)与SEQ ID No.1的第25-178位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源 性且具有相同功能的蛋白质； 所述胶原结合区为如下b1)或b2)或b3)所示的蛋白质： b1)氨基酸序列是SEQ ID No.1的第3-9位所示的蛋白质； b2)将SEQ ID No.1的第3-9位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取 代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； b3)与SEQ ID No.1的第3-9位所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且 具有相同功能的蛋白质。 在本发明的一个具体实施例中，所述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子为如下 c1)或c2)或c3)所示的蛋白质： c1)氨基酸序列是SEQ ID No.1所示的蛋白质； c2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺 失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质； c3)与SEQ ID No.1所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同 功能的蛋白质。 上述a2)、b2)、c2)中的蛋白质，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/ 或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。 上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。 为了解决上述技术问题，本发明还提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相 关的生物材料的新用途。 本发明提供了与胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子相关的生物材料在如下A1)- A10)中任一种中的应用： A1)制备上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子； A2)制备治疗和/或预防子宫不孕的产品； A3)制备治疗和/或预防子宫内膜粘连的产品； A4)制备促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑的产品； A5)制备减少瘢痕子宫内膜面积的产品； A6)制备增加瘢痕子宫内膜厚度的产品； A7)制备增加瘢痕子宫内膜血流量的产品； A8)制备促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力的产品； A9)制备促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解的产品； A10)制备提高妊娠率的产品； 所述生物材料为下述B1)至B12)中的任一种： B1)编码上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子的核酸分子； 6 CN 111592599 A 说 明 书 3/9 页 B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒； B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体； B4)含有B2)所述表达盒的重组载体； B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物； B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物； B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物； B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物； B9)含有B1)所述核酸分子的转基因细胞系； B10)含有B2)所述表达盒的转基因细胞系； B11)含有B3)所述重组载体的转基因细胞系； B12)含有B4)所述重组载体的转基因细胞系。 进一步的，B1)所述核酸分子为如下C1)或C2)或C3)： C1)编码序列是序列表中SEQ ID No.2所示的cDNA分子或DNA分子； C2)与C1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码上述胶原靶向碱 性成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子； C3)在严格条件下与C1)或C2)限定的核苷酸序列杂交，且编码上述胶原靶向碱性 成纤维细胞生长因子的cDNA分子或基因组DNA分子。 其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可 以是RNA，如mRNA或hnRNA等。 本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方 法，对本发明的编码CBD-bFGF的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明 分离得到的CBD-bFGF的核苷酸序列75％或者更高同一性的核苷酸，只要编码CBD-bFGF且具 有CBD-bFGF功能，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。 这里使用的术语“同一性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同一性”包括与本发 明的编码SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，或 85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同一性的核苷酸序列。同一性可以用肉眼或计算 机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可以用百分比(％)表示， 其可以用来评价相关序列之间的同一性。 上述应用中，所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜 2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min； 或，0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃条件下杂交并洗膜。 上述75％或75％以上同一性，可为80％、85％、90％或95％以上的同一性。 上述应用中，B2)所述的含有编码CBD-bFGF的核酸分子的表达盒(CBD-bFGF基因表 达盒)，是指能够在宿主细胞中表达CBD-bFGF的DNA，该DNA不但可包括启动CBD-bFGF基因转 录的启动子，还可包括终止CBD-bFGF基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强 子序列。 上述应用中，所述载体可为质粒、黏粒、噬菌体或病毒载体。可用现有的表达载体 构建含有所述CBD-bFGF基因表达盒的重组载体。所述表达载体具体可为pET28a表达载体。 进一步的，B3)所述的重组载体可为将所述CBD-bFGF基因插至所述表达载体中得 7 CN 111592599 A 说 明 书 4/9 页 到的重组载体。 更进一步的，所述重组载体具体可为pET28a-CBD-bFGF。所述pET28a-CBD-bFGF为 将pET28a载体的NcoI和XhoI识别序列间的小片段替换为序列表中SEQ ID No.2的第5-537 位所示的DNA片段后得到的载体。 上述应用中，所述微生物可为酵母、细菌、藻或真菌。其中，细菌可为大肠杆菌，如 大肠杆菌BL21。 上述应用中，所述转基因细胞系不包括繁殖材料。 上述应用中，所述促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力体现在上调瘢痕子宫内 膜范威氏因子vWF表达水平； 所述促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解体现在上调瘢痕子宫内膜雌激素受体-α表 达水平和/或下调瘢痕子宫内膜α-平滑肌肌动蛋白表达水平。 进一步的，所述表达水平可为蛋白水平。 为了解决上述技术问题，本发明最后提供了一种产品。 本发明提供的产品的活性成分为上述胶原靶向碱性成纤维细胞生长因子或上述 生物材料； 所述产品的功能为如下(1)-(9)中任一种： (1)治疗和/或预防子宫不孕； (2)治疗和/或预防子宫内膜粘连； (3)促进瘢痕子宫内膜重建和/或重塑； (4)减少瘢痕子宫内膜面积； (5)增加瘢痕子宫内膜厚度； (6)增加瘢痕子宫内膜血流量； (7)促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力； (8)促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解； (9)提高妊娠率。 上述产品中，所述促进瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力体现在上调瘢痕子宫内 膜范威氏因子vWF表达水平； 所述促进瘢痕子宫内膜胶原蛋白降解体现在上调瘢痕子宫内膜雌激素受体-α表 达水平和/或下调瘢痕子宫内膜α-平滑肌肌动蛋白表达水平。 进一步的，所述表达水平可为蛋白水平。 更进一步的，所述产品可为药物。所述药物可以所述CBD-bFGF或所述生物材料作 为活性成分，也可以以所述CBD-bFGF或所述生物材料与其他具有上述至少一种功能的物质 组成的组合物作为活性成分。需要的时候，上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接 受的载体；所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、 吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。在本发明的一个实施例中，所述载体具体为 无菌盐水。 本发明构建了一个胶原靶向的bFGF(CBD-bFGF)，是碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和胶原结合区(CBD)融合形成的蛋白质，通过融合的胶原靶向肽，可以将碱性成纤维 细胞生长因子富集在子宫瘢痕区域，显著促进此区血管的形成和细胞化。本发明将CBD- 8 CN 111592599 A 说 明 书 5/9 页 bFGF局部多点注射到瘢痕形成的18名患者子宫内膜周围，在18名患者中每4周通过超声引 导瘢痕子宫内膜周围给药(2-4次)。结果显示，CBD-bFGF治疗后，患者月经血量，子宫内膜厚 度和瘢痕子宫内膜面积均有所改善。组织学研究显示瘢痕子宫内膜血管密度明显增加。3名 患者(3/18)在妊娠20周时达到妊娠。1名患者产下健康婴儿。本发明利用CBD-bFGF多点注射 到瘢痕子宫内膜，促进了瘢痕子宫内膜血管生成和增殖能力，增加了持续的妊娠率。 附图说明 图1为纯化后的CBD-bFGF溶液的电泳图。 图2为宫腔镜检查结果表明多点注射CBD-bFGF后患者子宫内膜瘢痕面积显著减 少。 图3为注射CBD-bFGF后，患者4号、9号和15号超声扫描三维成像呈现正常子宫腔。 图4为宫腔镜检查结果表明注射CBD-bFGF后患者4号、9号和15号子宫形状恢复正 常，子宫角重新出现，子宫内膜瘢痕被正常子宫内膜取代。 图5为5名患者的子宫内膜血流量有所改善。 图6为PBAC评分。 图7为组化染色和免疫组化染色。
