技术摘要：
本发明提供了一种布瓦西坦水解杂质的检测方法，属于医药技术领域。其水解杂质为(S)‑2‑((R)‑2‑氧代‑4‑丙基吡咯烷‑1‑基)丁酸，检测方法是高效液相色谱法检测，具体步骤如下：(1)制备供试品溶液：取待测布瓦西坦，溶解，即得；(2)制备系统适用性溶液；(3)分别吸取  全部
背景技术：
布瓦西坦是由比利时制药商UCB最新开发的第3代抗癫痫药物。是一种新型的突触 囊泡蛋白2A(SV2A)高亲和性配体，同时对电压依赖性钠离子通道亦有一定的抑制作用。 2005年，布瓦西坦获得FDA及欧盟批准用于治疗罕见症状性肌阵挛癫痫发作，目前正在进行 包括癫痫部分发作辅助治疗的多项Ⅲ期临床试验研究，研究结果表明，布瓦西坦对于全身 性癫痫发作具有较好的疗效。 布瓦西坦的化学名为(S)-2-(R)-3-丙基吡咯烷-1-基丁酰胺，分子式为C11H20N2O2， 分子量为212.29，结构式如下： 在合成布瓦西坦原料药时，由于接触到碱性溶液，可使布瓦西坦发生水解反应，产 生水解杂质，该杂质化学名称为(S)-2-((R)-2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸，化学结构 式如下： 杂质在原料药中的存在，可导致制剂的不良反应增加，甚至对患者产生严重后果， 因此国际国内的药典中，均对原料药杂质的含量规定了严格的限度。为更好地控制布瓦西 坦原料药的产品质量，有必要对其水解杂质(S)-2-((R)-2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸 开发出定性和定量检测方法，以便控制其在布瓦西坦原料药中含量限度，确保布瓦西坦原 料药质量符合相关药典的质量要求。目前，尚未见如何检测布瓦西坦水解杂质(S)-2-((R)- 2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸的报道。
技术实现要素：
为了有效控制布瓦西坦原料药的质量品质，本发明提供了一种布瓦西坦水解杂质 的检测方法，所述水解杂质为(S)-2-((R)-2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸，检测方法是 高效液相色谱法检测，具体步骤如下： (1)制备供试品溶液：取待测布瓦西坦，溶解，即得； 4 CN 111579706 A 说　明　书 2/11 页 (2)制备系统适用性溶液； (3)分别吸取供试品溶液和系统适用性溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件 为： 色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相由A相和B相组成，A相为磷酸水溶液，B相为乙腈。 进一步地，步骤(1)中，所述供试品溶液中，待测布瓦西坦的浓度为0.5～1.5mg/ ml； 和/或，步骤(1)中，所述溶解待测布瓦西坦的溶剂为乙腈和水的混合溶液； 优选地， 步骤(1)中，所述供试品溶液中，待测布瓦西坦的浓度为1.0mg/ml； 和/或，步骤(1)中，所述乙腈和水的混合溶液中乙腈和水的体积比为(10～20)： (80～90)； 更优选地， 步骤(1)中，所述乙腈和水的混合溶液中乙腈和水的体积比为10:90。 进一步地，步骤(2)中，所述系统适用性溶液的制备方法为利用乙腈和水的混合溶 液溶解布瓦西坦对照品和水解杂质对照品，得混合溶液，即得。 进一步地，步骤(2)中，所述系统适用性溶液中，布瓦西坦对照品浓度为0.5～ 1.5mg/ml，水解杂质对照品浓度为1～10μg/ml； 和/或，步骤(2)中，所述乙腈和水的混合溶液中乙腈和水的体积比为(10～20)： (80～90)； 优选地， 步骤(2)中，所述系统适用性溶液中，布瓦西坦对照品浓度为1.0mg/ml，水解杂质 对照品浓度为5μg/ml； 和/或，步骤(2)中，所述乙腈和水的混合溶液中乙腈和水的体积比为10:90。 进一步地，步骤(2)中，所述系统适用性溶液的制备方法为：称取水解杂质对照品， 利用乙腈和水的混合溶液溶解得水解杂质储备液；再称取布瓦西坦对照品，加入水解杂质 储备液和乙腈和水的混合溶液，即得。 进一步地，所述高效液相色谱仪检测时，检测波长为200～220nm；和/或，流速为 0.5～1.5ml/min；和/或，柱温为30～40℃；和/或，进样量为10～30μl； 优选地，所述高效液相色谱仪检测时，检测波长为210nm；和/或，流速为1.0ml/ min；和/或，柱温为30℃；和/或，进样量为10μl。 进一步地，所述色谱柱为Inertsil  ODS-3；和/或，所述A相为体积分数为0.05～ 0.15％的磷酸水溶液；所述B相为乙腈； 优选地，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm；和/或，所述A相为体积分数为 0.1％的磷酸水溶液。 进一步地，所述高效液相色谱仪检测时，流动相洗脱程序为梯度洗脱程序，梯度洗 脱程序为： 0～30min，流动A相的体积百分数含量由65～75％下降到35～60％，流动B相的体 积百分数含量由25～35％上升到40～65％； 5 CN 111579706 A 说　明　书 3/11 页 30～35min，流动A相的体积百分数含量保持为35～60％，流动B相的体积百分数含 量保持为40～65％； 35～36min，流动A相的体积百分数含量由35～60％上升到65～75％，流动B相的体 积百分数含量由40～65％下降到25～35％； 36～50min，流动A相的体积百分数含量保持为65～75％，流动B相的体积百分数含 量保持为25～35％。 进一步地，所述高效液相色谱仪检测时，梯度洗脱程序为： 0～30min，流动A相的体积百分数含量由70％下降到40％，流动B相的体积百分数 含量由30％上升到60％； 30～35min，流动A相的体积百分数含量保持为40％，流动B相的体积百分数含量保 持为60％； 35～36min，流动A相的体积百分数含量由40％上升到70％，流动B相的体积百分数 含量由60％下降到30％； 36～50min，流动A相的体积百分数含量保持为70％，流动B相的体积百分数含量保 持为30％。 进一步地，所述方法为定量检测方法，含量的计算方法为：根据所得高效液相色谱 谱图，计算供试品溶液中水解杂质的峰面积和供试品溶液中所有峰面积之和，以面积归一 化法计算布瓦西坦水解杂质的含量，计算公式如下： 其中，Xi％为供试品中水解杂质的含量， Ai为供试品溶液中水解杂质的峰面积， A为供试品溶液中所有峰面积之和。 本发明所述的水解杂质为(S)-2-((R)-2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸。 本发明布瓦西坦水解杂质的检测方法可以将布瓦西坦与其水解杂质(S)-2-((R)- 2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸有效分离，可以用于检测布瓦西坦中的该杂质，准确测量 布瓦西坦药物中杂质(S)-2-((R)-2-氧代-4-丙基吡咯烷-1-基)丁酸的含量，测定结果稳定 可靠，专属性强。方法学验证结果表明，本发明符合《中国药典》2015年版对分析方法学的要 求。本发明检测方法可有效监控布瓦西坦的合成过程，用于布瓦西坦的质量检测，保证其质 量，应用前景广阔。 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。 以下通过实施例形式的