技术摘要：
本发明公开了巯嘌呤纳米粒及其制备方法。包括：(1)将PLGA溶解在有机溶剂中形成PLGA油相O；(2)将巯嘌呤固体溶解在包含稳定剂的内水相中形成巯嘌呤水溶液W1；(3)将其加入到PLGA油相O中形成W1/O初乳乳液；(4)将W1/O初乳乳液注入到外水相W2中得到W1/O/W2复乳乳液；(5)除去  全部
背景技术：
巯嘌呤(Mercaptopurine，6-MP)属于细胞周期特异性药物，进入体内后，必须在细 胞内由磷酸核苷糖转移酶代谢为6-巯基嘌呤核糖核苷酸后方具有活性，其通过干扰腺嘌呤 核苷酸和鸟嘌呤核苷酸合成，影响DNA的合成过程而发挥作用。 巯嘌呤在临床上是一种重要的抗代谢药物和抗肿瘤药，用于治疗人类白血病和许 多其他疾病，例如炎症性肠病，系统性红斑狼疮和类风湿关节炎。然而，该药物具有水溶性 差，血浆半衰期短(0.5-1.5h)，生物利用度较低(约16％-50％)以及明显的副作用(包括骨 髓和肝脏毒性)等缺点，降低了疗效。 为了提高巯嘌呤的生物利用度，增强疗效降低其毒副作用，近年来有学者不断寻 找其他更安全有效的给药方式，目前关于巯嘌呤纳米粒的研究主要是利用交联剂将巯嘌呤 和聚合物(包括壳聚糖和羧甲基壳聚糖)进行化学耦联制备巯嘌呤的前药纳米粒，还有利用 金属载体和磁性材料制备巯嘌呤纳米粒，或者在这些纳米粒上进行叶酸或透明质酸的靶向 修饰。但是，上述现有技术还存在如下诸多缺陷：巯嘌呤的前药纳米粒制备过程复杂，常用 到有毒的交联剂、表面活性剂和有机溶剂，包封率较低。金属纳米粒和磁性纳米粒需要静脉 给药，在临床上很难应用，亟待改进。
技术实现要素：
本发明的主要目的是克服现有技术存在的缺陷提供一种粒径均匀、包封率好、可 口服给药的巯嘌呤纳米粒及其制备方法； 本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的： 本发明的目的可以通过以下技术方案来实现： 一种巯嘌呤纳米粒的制备方法，包括以下步骤： (1)将聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylactic  acid-glycolic  acid  copolymer， PLGA)溶解在有机溶剂中形成PLGA油相O； (2)将巯嘌呤固体溶解在包含稳定剂的内水相中形成巯嘌呤水溶液W1； (3)将巯嘌呤水溶液W1加入到PLGA油相O中形成W1/O初乳乳液； (4)将W1/O初乳乳液注入到由水和稳定剂组成的外水相W2中得到W1/O/W2复乳乳 液； (5)将W1/O/W2复乳乳液除去有机溶剂后固化形成纳米粒； (6)将纳米粒洗涤、重新分散后加入冻干保护剂冻干，即得。 优选的，步骤(1)中优选将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶解在有机溶剂中通过涡旋溶 解形成PLGA油相O；其中，所述的有机溶剂可以是乙酸乙酯或者二氯甲烷；所述的PLGA可以 3 CN 111588706 A 说　明　书 2/5 页 为不同分子量、不同末端基团以及不同的聚合比，具有不同的降解周期的PLGA；其中，PLGA 与巯嘌呤的质量比例优选为3～10:1，最优选为6:1。 优选的，步骤(2)中将巯嘌呤固体溶解在包含稳定剂的内水相中通过涡旋形成巯 嘌呤水溶液W1；所述的内水相可以为氨水，所述内水相中包含的稳定剂优选为PVA，其浓度 优选为0.5％～3％，最优选为0.5％；氨水与步骤(1)中有机溶剂体积比优选为1:5～10。 本发明发现，采用内水相稳定剂浓度为0.5％，以乙酸乙酯为有机溶剂，使PLGA与 巯嘌呤质量比例为6:1时，所制备的巯嘌呤纳米粒的粒径相对较小，分散最均匀且载药量和 包封率最高。 步骤(3)中将巯嘌呤水溶液W1加入到PLGA油相O中磁力搅拌混合后通过在冰浴中 超声破碎法形成W1/O初乳乳液；所述的超声破碎功率优选为130W～200W，超声破碎时间优 选为2min，超声破碎的开关时间优选为2.0s。 步骤(4)中将W1/O初乳乳液注入到由水和稳定剂组成的外水相W2中通过在冰水浴 中超声破碎法得到W1/O/W2复乳乳液；所述的外水相中的稳定剂可以为PVA或者帕洛沙姆 188，其浓度优选为1～3％，最优选为1％；所述的超声破碎功率优选为300W～500W，超声破 碎时间优选为2min，开关时间优选为2.0s。 步骤(5)中将W1/O/W2复乳乳液通过搅拌或旋转蒸发除去有机溶剂，复乳乳滴固化 形成纳米粒； 步骤(6)中通过离心收集所形成的纳米粒用去离子水洗涤重新分散后加入冻干保 护剂；其中，所述的冻干保护剂优选为甘露醇。 本发明以水包油包水复乳法将巯嘌呤包封在PLGA中形成纳米粒制备得到的纳米 粒粒径均匀，粒径在100-1000nm之间，包封率高达80.71％，释放性能良好(药物在2h之内的 累积释放率超过70％)，这对于巯嘌呤而言，具有增溶效果，对其生物利用度的提高很有意 义。另外，本发明可以通过选择具有不同降解速度的不同分子量的PLGA制备出释放时长有 选择性的微球载药体系，在应用时，可根据实际情况的的需要，选择不同的PLGA种类达到不 同时长的释药目的，同时可以通过改变处方的各个参数，筛选出最佳处方以进行药动学研 究。 本发明以PLGA为载体制备的的纳米粒的粒径在100-1000nm之间，口服给药方便， 同时PLGA在生物体内可降解，制备方法相对简单，可以根据PLGA分子量和聚合物的比例控 制药物的释放，同时包封率高，能提高水溶性差药物的生物利用度，冻干后纳米粒便于儿童 分剂量。 附图说明 图1为实施例1制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒的TEM照片； 图2为实施例1制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒的释放曲线； 图3为实施例2制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒的释放曲线； 图4为实施例3制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒的释放曲线； 图5为实施例1制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒在1月龄大鼠中的药动学曲线； 图6为实施例1制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒在2月龄大鼠中的药动学曲线； 图7为实施例1制备得到巯嘌呤/PLGA纳米粒在4月龄大鼠中的药动学曲线。 4 CN 111588706 A 说　明　书 3/5 页