技术摘要：
本发明属医药技术领域，涉及降碳贝壳杉烷型二萜，尤其是C‑18位降碳的贝壳杉烷型(18‑nor‑kaurane‑type)二萜类化合物其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明从穗花杉(Amentotaxus argotaenia)的枝叶中提取分离得到的C‑18位降碳且C‑4与C‑19位形成三元氧环的 全部
背景技术：
现有技术公开了天然产物具有结构复杂性和结构多样性的特点，且毒副作用往往 较小，是新药发现的重要来源；天然产物及其衍生物独特的化学结构，使其具有高药效和对 特定靶点高选择性的优点以及潜在的独特的作用机制等优点(Newman ,et al ., Nat.Prod.Rep.2000,17:215–34；Newman et al.,J.Nat.Prod.2012,75:311–335)。据统计， 1981-2014年间已上市的小分子药物，超过50％的药物分子是直接或间接来源于天然产物 (Newman et al.,J.Nat.Prod.2016,79:629-661)，因此从天然产物资源中寻找和发现具有 良好生物活性分子具有重要意义。 研究表明珍稀濒危植物中的次生代谢产物具有较高的成药性，是发现新颖结构和 独特作用机制的药物分子的重要来源(Zhu et al .,Proc .Natl .Acad .Sci .U S A.2011 , 108:12943–12948)，目前已引起业内广泛关注，其中还有研究发现珍稀濒危植物对于人类 某些重大疾病的控制具有潜在的价值(Ibrahim et al .,Proc .Natl .Acad .Sci .U S A.2013,110:16832–16837)；穗花杉(Amentotaxus argotaenia)隶属红豆杉科(Taxaceae) 穗花杉属(Amentotaxus)植物，为灌木或小乔木，是我国特有树种，于1992年被中国植物红 皮书收录，记为渐危种(Fu et al .,China Plant Red Data Book I ,Science Press: Beijing；New York,1992)，该植物常分布于江西西北部、湖北西部及西南部、湖南、四川东 南部及中部、西藏东南部、甘肃南部、广西、广东等地海拔300-1100米地带的荫湿溪谷两旁 或林内(Fu et al.,China Plant Red Data Book ,Science Press:Beijing；New York , 1992)。 贝壳杉烷型二萜的基本化学结构为刚性骨架的四环二萜，来源于天然产物的贝壳 杉烷型二萜大多数具有较强的生理活性，可用做植物生长调节剂、抗菌剂、抗炎剂以及抗肿 瘤细胞毒剂等。如从香茶菜属植物中分离得到的贝壳杉烷型二萜化合物冬凌草甲素 (oridonin)，具有显著的抑制白血病细胞增殖活性，是近年抗肿瘤新药开发的热点(Zhou et al.,Blood 2007,109:3441–3450)。 基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供新的降碳贝壳杉烷型二萜及其制备 方法和在制备抗肿瘤药物中的用途，本发明从穗花杉中提取分离得到新的降碳贝壳杉烷型 二萜类化合物，经药理活性试验表明，所述化合物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖活性，可制 3 CN 111548327 A 说 明 书 2/4 页 备治疗肿瘤的药物。
技术实现要素：
本发明目的是基于现有技术的现状，提供新的降碳贝壳杉烷型(norkaurane- type)二萜，尤其是C-18位降碳的贝壳杉烷型(18-nor-kaurane-type)二萜类化合物其制备 方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明从穗花杉中提取分离得到新的降碳贝壳杉烷型 二萜类化合物，经药理活性试验表明，所述化合物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖活性，可制 备治疗肿瘤的药物，以及作为潜在的抗肿瘤药物研究的先导化合物。 本发明从红豆杉科(Taxaceae)穗花杉属植物穗花杉[Amentotaxus argotaenia (Hance)Pilger]的枝叶中提取分离得到C-18位降碳且C-4与C-19位形成三元氧环的贝壳杉 烷型二萜amentotanol A和amentotanol B； 本发明的贝壳杉烷型二萜类化合物具有如下化学结构式： 本发明的另一目的是提供该化合物的制备方法。 本发明所述的化合物由穗花杉枝叶经由本领域所涉及常规的提取分离方法制备 而来，其步骤如下：将干燥的穗花杉枝叶粉碎后用甲醇室温浸泡提取，提取液减压浓缩，多 次提取浓缩后合并得浸膏，然后浸膏用水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶剂萃 取，减压浓缩后的乙酸乙酯浸膏经硅胶、微孔树脂、凝胶及半制备高效液相分离，得到化合 物amentotanol A和amentotanol B。 本发明所述的化合物可通过从植物中分离纯化得到；也可经本领域技术人员熟知 的化学方法合成获得。 本发明对所得的贝壳杉烷型二萜类化合物化合物amentotanol A和amentotanol B进行了体外抗肿瘤活性实验，结果表明，所述化合物均能显著抑制人宫颈癌细胞HeLa，人 肺癌细胞A549，人肝癌细胞Huh-7，人乳腺癌细胞MDA-MB-231，人卵巢癌细胞SKOV3和人结肠 癌细胞HCT-116等6种肿瘤细胞的增殖，结果表明，该化合物可制备抗肿瘤药物，或作为潜在 的抗肿瘤药物先导化合物。 本发明所述抗肿瘤药物为治疗宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肝癌或结肠癌的药 物。 本发明所述的化合物可单独应用或者合用，亦可与药学上合适的载体或赋形剂结 合，按照常规方法制成口服或者非口服剂型。 本发明具有如下优点：所述目标化合物为结构新颖的降碳贝壳杉烷型二萜化合 物，其中，C-18位降碳且C-4与C-19位形成独特三元氧环；该化合物具有显著的抑制肿瘤细 胞增殖活性，对现在关注度很高的肿瘤疾病，如宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肝癌或结肠 癌等的抗肿瘤药物的开发具有应用前景。 4 CN 111548327 A 说 明 书 3/4 页
本发明属医药技术领域，涉及降碳贝壳杉烷型二萜，尤其是C‑18位降碳的贝壳杉烷型(18‑nor‑kaurane‑type)二萜类化合物其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明从穗花杉(Amentotaxus argotaenia)的枝叶中提取分离得到的C‑18位降碳且C‑4与C‑19位形成三元氧环的 全部
背景技术：
现有技术公开了天然产物具有结构复杂性和结构多样性的特点，且毒副作用往往 较小，是新药发现的重要来源；天然产物及其衍生物独特的化学结构，使其具有高药效和对 特定靶点高选择性的优点以及潜在的独特的作用机制等优点(Newman ,et al ., Nat.Prod.Rep.2000,17:215–34；Newman et al.,J.Nat.Prod.2012,75:311–335)。据统计， 1981-2014年间已上市的小分子药物，超过50％的药物分子是直接或间接来源于天然产物 (Newman et al.,J.Nat.Prod.2016,79:629-661)，因此从天然产物资源中寻找和发现具有 良好生物活性分子具有重要意义。 研究表明珍稀濒危植物中的次生代谢产物具有较高的成药性，是发现新颖结构和 独特作用机制的药物分子的重要来源(Zhu et al .,Proc .Natl .Acad .Sci .U S A.2011 , 108:12943–12948)，目前已引起业内广泛关注，其中还有研究发现珍稀濒危植物对于人类 某些重大疾病的控制具有潜在的价值(Ibrahim et al .,Proc .Natl .Acad .Sci .U S A.2013,110:16832–16837)；穗花杉(Amentotaxus argotaenia)隶属红豆杉科(Taxaceae) 穗花杉属(Amentotaxus)植物，为灌木或小乔木，是我国特有树种，于1992年被中国植物红 皮书收录，记为渐危种(Fu et al .,China Plant Red Data Book I ,Science Press: Beijing；New York,1992)，该植物常分布于江西西北部、湖北西部及西南部、湖南、四川东 南部及中部、西藏东南部、甘肃南部、广西、广东等地海拔300-1100米地带的荫湿溪谷两旁 或林内(Fu et al.,China Plant Red Data Book ,Science Press:Beijing；New York , 1992)。 贝壳杉烷型二萜的基本化学结构为刚性骨架的四环二萜，来源于天然产物的贝壳 杉烷型二萜大多数具有较强的生理活性，可用做植物生长调节剂、抗菌剂、抗炎剂以及抗肿 瘤细胞毒剂等。如从香茶菜属植物中分离得到的贝壳杉烷型二萜化合物冬凌草甲素 (oridonin)，具有显著的抑制白血病细胞增殖活性，是近年抗肿瘤新药开发的热点(Zhou et al.,Blood 2007,109:3441–3450)。 基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供新的降碳贝壳杉烷型二萜及其制备 方法和在制备抗肿瘤药物中的用途，本发明从穗花杉中提取分离得到新的降碳贝壳杉烷型 二萜类化合物，经药理活性试验表明，所述化合物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖活性，可制 3 CN 111548327 A 说 明 书 2/4 页 备治疗肿瘤的药物。
技术实现要素：
本发明目的是基于现有技术的现状，提供新的降碳贝壳杉烷型(norkaurane- type)二萜，尤其是C-18位降碳的贝壳杉烷型(18-nor-kaurane-type)二萜类化合物其制备 方法和在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明从穗花杉中提取分离得到新的降碳贝壳杉烷型 二萜类化合物，经药理活性试验表明，所述化合物具有显著的抑制肿瘤细胞增殖活性，可制 备治疗肿瘤的药物，以及作为潜在的抗肿瘤药物研究的先导化合物。 本发明从红豆杉科(Taxaceae)穗花杉属植物穗花杉[Amentotaxus argotaenia (Hance)Pilger]的枝叶中提取分离得到C-18位降碳且C-4与C-19位形成三元氧环的贝壳杉 烷型二萜amentotanol A和amentotanol B； 本发明的贝壳杉烷型二萜类化合物具有如下化学结构式： 本发明的另一目的是提供该化合物的制备方法。 本发明所述的化合物由穗花杉枝叶经由本领域所涉及常规的提取分离方法制备 而来，其步骤如下：将干燥的穗花杉枝叶粉碎后用甲醇室温浸泡提取，提取液减压浓缩，多 次提取浓缩后合并得浸膏，然后浸膏用水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶剂萃 取，减压浓缩后的乙酸乙酯浸膏经硅胶、微孔树脂、凝胶及半制备高效液相分离，得到化合 物amentotanol A和amentotanol B。 本发明所述的化合物可通过从植物中分离纯化得到；也可经本领域技术人员熟知 的化学方法合成获得。 本发明对所得的贝壳杉烷型二萜类化合物化合物amentotanol A和amentotanol B进行了体外抗肿瘤活性实验，结果表明，所述化合物均能显著抑制人宫颈癌细胞HeLa，人 肺癌细胞A549，人肝癌细胞Huh-7，人乳腺癌细胞MDA-MB-231，人卵巢癌细胞SKOV3和人结肠 癌细胞HCT-116等6种肿瘤细胞的增殖，结果表明，该化合物可制备抗肿瘤药物，或作为潜在 的抗肿瘤药物先导化合物。 本发明所述抗肿瘤药物为治疗宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肝癌或结肠癌的药 物。 本发明所述的化合物可单独应用或者合用，亦可与药学上合适的载体或赋形剂结 合，按照常规方法制成口服或者非口服剂型。 本发明具有如下优点：所述目标化合物为结构新颖的降碳贝壳杉烷型二萜化合 物，其中，C-18位降碳且C-4与C-19位形成独特三元氧环；该化合物具有显著的抑制肿瘤细 胞增殖活性，对现在关注度很高的肿瘤疾病，如宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、肝癌或结肠 癌等的抗肿瘤药物的开发具有应用前景。 4 CN 111548327 A 说 明 书 3/4 页
