技术摘要：
本发明提供一种高黄酮含量的黄芪育苗的方法，包括黄芪种子的萌发和黄芪幼苗的培养，通过对黄芪水培营养液的组成和配比的优化，筛选一种能够适用黄芪幼苗生长所需营养元素的营养液，促进黄芪幼苗的快速生长；进一步，通过优化黄芪育苗的工艺条件，特别是对黄芪种子的预 全部
背景技术：
黄芪是一种名贵中药材,是豆科植物(Leguminosae)膜荚黄芪(Astragalus membranaeus(Fisch.)Bge)和蒙古黄芪(Astragalus membranaceus Bge.var.mongholicus (Bge.)hsiao)的干燥根。黄芪的主要药理作用有补气固表、利尿、托毒排脓、生肌等疗效，主 治气短、虚脱、心悸、自汗、体虚浮肿、慢性肾炎、脱水、久泻、气虚、气血不足、中气下陷，有抗 菌消炎、降压利尿、解毒利胆等功效，是一种常用中草药。国内市场对黄芪的需求极大，主要 用于生产黄芪饮片以及中成药和提取物及制剂。 近年来，由于大量的滥挖滥釆使得野生黄芪的数量急剧减少，随时都有趋于绝灭 的危险。为了保护黄芪，国家将其列为三级保护植物，同时提倡大力发展种植和人工培育， 适当的限制采刨和严禁采挖幼苗，保持半野生状态，在种子成熟后进行采收。 近年来，黄芪产业化种植规模逐年扩大，但是黄芪育苗规模及技术严重滞后，还停 留在传统粗放的原始育苗和种植阶段，这种落后的种植方式更多依靠天养，管理不完善，造 成种植退化，药效成分不稳定，差异大，产量低；为了解决上述问题，黄芪的无土栽培技术应 运而生，特别是水培育苗技术的开展使得黄芪的育苗规模扩大，成活率提高，育苗周期缩 短，具有良好的应用发展前景。 然而，在人工栽培黄芪的过程中，黄芪种子的萌芽工艺，以及水培营养液，和水培 条件的开发还不完善，导致黄芪种子的萌芽率低，黄芪幼苗的成活率不稳定，生长周期长， 且药效成分不稳定。 基于上述存在的问题，调整黄芪水培过程中的萌芽工艺、营养液组成和水培条件， 获得一套成熟稳定的水培方法仍然是相关企业和研究人员的研究重点，特别是开发一种种 子萌芽率高、幼苗成活率高、生长周期短、药效成分稳定、黄酮含量高的黄芪水培工艺。
技术实现要素：
为克服现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种高黄酮含量的黄芪育 苗的方法，提高黄芪种子的萌芽率，使得幼苗生命力强，移栽成活率高，生长周期短，并且具 有高的黄芪黄酮含量。 为实现上述目的，本发明提供一种高黄酮含量的黄芪育苗的方法，包括以下步骤： (1)取适量黄芪种子，加入种子重量3-4倍的浓度60-75％的乙醇溶液，超声处理时 间40-60s后；用水清洗3-5遍；放入冰水中浸泡2-4h后，取出放入70-90℃的水中浸泡1-2h； 然后，加入种子重量2-4倍的5-8％的次氯酸钠溶液或1％的升汞溶液浸泡8-15min后，用水 清洗3-5遍后沥干； (2)将步骤(1)中的黄芪种子放入MS培养基中进行培养，培养温度为15-25℃，湿度 3 CN 111587774 A 说 明 书 2/6 页 50-60％，培养8-12天进行萌芽，间隔2-4天更换一次MS培养基； 所述MS培养基每升含有如下重量的组分：KNO3 4-6mM，Ca(NO3)2·4H2O 4-6mM， MgSO4·7H2O 1 .5-2 .5mM，KH2PO4 0 .8-1 .2mM，H3BO3 44-48μM，MnCl2·4H2O 8-10μM， ZnSO4·7H2O 0.6-0.8μM，CuSO4·5H2O 0.2-0.4μM，Na2MoO4·2H2O 0.1-0.3μM，EDTA-Fe- Na 40-60μM； (3)将步骤(2)中发芽的黄芪种子加入营养液中继续培养，培养温度为15-25℃，湿 度50-60％，每天施加蓝光或黄光8-12h，间隔4-6天更换营养液，培养70-100天；获得高黄酮 含量的黄芪幼苗； 所述营养液每升含有如下重量的组分： NH4NO3 6-8mM,KNO3 6-8mM，Ca(NO3)2·4H2O 5-8mM，MgSO4·7H2O 1 .5-2.5mM， KH2PO4 1-1.4mM，H3BO3 44-48μM，MnSO4 8-10μM，ZnSO4·7H2O 0.6-0.8μM，CuCl20.3-0.5μ M，Na2MoO4·2H2O 0 .1-0 .3μM，EDTA-Fe-Na 40-60μM，烟酸0.3-0 .6μM，三七提取物80- 100mg。 进一步，所述黄芪种子选自蒙古黄芪种子或膜荚黄芪种子，所述水为灭菌自来水； 进一步，所述步骤(2)中MS培养基进行预先灭菌处理，所述灭菌处理为加常规加压 高温处理； 进一步，所述步骤(3)中三七提取物为三七的水、或乙醇的提取物，制备方法为取 适量三七根，加入3-4倍重的水或浓度70-80％的乙醇水溶液，加热回流3-4h，过滤；将滤液 冷冻干燥后制备得到三七提取物； 进一步，所述步骤(3)中蓝光和黄光交替间隔施加，间隔周期24h。 本发明具有以下有益效果： (1)具有高的萌芽率：本发明通过将黄芪种子进行高浓度乙醇浸泡和超声处理，以 及变温处理，使得种皮外的致密细胞层和果胶类物质发生变性，提高通透性，在培养当天即 可发芽，在8-12天时萌芽率可达97％以上； (2)具有高的幼苗成活率：本发明通过施加高浓度乙醇、以及5-8％的次氯酸钠溶 液或1％的升汞溶液，以及选用无菌水，和对培养基进行灭菌处理，提供一种无菌的生长环 境，极大了提高了幼苗的成活率，防止细菌的污染； (3)生长周期短：本发明通过合理调整营养液的组成和配比，特别是烟酸和三七提 取物的加入使得黄芪根部生长速度加快，根系发达，能够快速达到移栽标准； (4)具有高的黄芪黄酮含量：本发明通过合理调整营养液的组成和配比，同时辅助 以光照，能够保证黄芪幼苗的稳定和快速生长，且通过施加蓝光或黄光，特别是进一步降低 蓝光和黄光交替间隔施加能够有效的促进黄酮类化合物的快速积累。
本发明提供一种高黄酮含量的黄芪育苗的方法，包括黄芪种子的萌发和黄芪幼苗的培养，通过对黄芪水培营养液的组成和配比的优化，筛选一种能够适用黄芪幼苗生长所需营养元素的营养液，促进黄芪幼苗的快速生长；进一步，通过优化黄芪育苗的工艺条件，特别是对黄芪种子的预 全部
背景技术：
黄芪是一种名贵中药材,是豆科植物(Leguminosae)膜荚黄芪(Astragalus membranaeus(Fisch.)Bge)和蒙古黄芪(Astragalus membranaceus Bge.var.mongholicus (Bge.)hsiao)的干燥根。黄芪的主要药理作用有补气固表、利尿、托毒排脓、生肌等疗效，主 治气短、虚脱、心悸、自汗、体虚浮肿、慢性肾炎、脱水、久泻、气虚、气血不足、中气下陷，有抗 菌消炎、降压利尿、解毒利胆等功效，是一种常用中草药。国内市场对黄芪的需求极大，主要 用于生产黄芪饮片以及中成药和提取物及制剂。 近年来，由于大量的滥挖滥釆使得野生黄芪的数量急剧减少，随时都有趋于绝灭 的危险。为了保护黄芪，国家将其列为三级保护植物，同时提倡大力发展种植和人工培育， 适当的限制采刨和严禁采挖幼苗，保持半野生状态，在种子成熟后进行采收。 近年来，黄芪产业化种植规模逐年扩大，但是黄芪育苗规模及技术严重滞后，还停 留在传统粗放的原始育苗和种植阶段，这种落后的种植方式更多依靠天养，管理不完善，造 成种植退化，药效成分不稳定，差异大，产量低；为了解决上述问题，黄芪的无土栽培技术应 运而生，特别是水培育苗技术的开展使得黄芪的育苗规模扩大，成活率提高，育苗周期缩 短，具有良好的应用发展前景。 然而，在人工栽培黄芪的过程中，黄芪种子的萌芽工艺，以及水培营养液，和水培 条件的开发还不完善，导致黄芪种子的萌芽率低，黄芪幼苗的成活率不稳定，生长周期长， 且药效成分不稳定。 基于上述存在的问题，调整黄芪水培过程中的萌芽工艺、营养液组成和水培条件， 获得一套成熟稳定的水培方法仍然是相关企业和研究人员的研究重点，特别是开发一种种 子萌芽率高、幼苗成活率高、生长周期短、药效成分稳定、黄酮含量高的黄芪水培工艺。
技术实现要素：
为克服现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种高黄酮含量的黄芪育 苗的方法，提高黄芪种子的萌芽率，使得幼苗生命力强，移栽成活率高，生长周期短，并且具 有高的黄芪黄酮含量。 为实现上述目的，本发明提供一种高黄酮含量的黄芪育苗的方法，包括以下步骤： (1)取适量黄芪种子，加入种子重量3-4倍的浓度60-75％的乙醇溶液，超声处理时 间40-60s后；用水清洗3-5遍；放入冰水中浸泡2-4h后，取出放入70-90℃的水中浸泡1-2h； 然后，加入种子重量2-4倍的5-8％的次氯酸钠溶液或1％的升汞溶液浸泡8-15min后，用水 清洗3-5遍后沥干； (2)将步骤(1)中的黄芪种子放入MS培养基中进行培养，培养温度为15-25℃，湿度 3 CN 111587774 A 说 明 书 2/6 页 50-60％，培养8-12天进行萌芽，间隔2-4天更换一次MS培养基； 所述MS培养基每升含有如下重量的组分：KNO3 4-6mM，Ca(NO3)2·4H2O 4-6mM， MgSO4·7H2O 1 .5-2 .5mM，KH2PO4 0 .8-1 .2mM，H3BO3 44-48μM，MnCl2·4H2O 8-10μM， ZnSO4·7H2O 0.6-0.8μM，CuSO4·5H2O 0.2-0.4μM，Na2MoO4·2H2O 0.1-0.3μM，EDTA-Fe- Na 40-60μM； (3)将步骤(2)中发芽的黄芪种子加入营养液中继续培养，培养温度为15-25℃，湿 度50-60％，每天施加蓝光或黄光8-12h，间隔4-6天更换营养液，培养70-100天；获得高黄酮 含量的黄芪幼苗； 所述营养液每升含有如下重量的组分： NH4NO3 6-8mM,KNO3 6-8mM，Ca(NO3)2·4H2O 5-8mM，MgSO4·7H2O 1 .5-2.5mM， KH2PO4 1-1.4mM，H3BO3 44-48μM，MnSO4 8-10μM，ZnSO4·7H2O 0.6-0.8μM，CuCl20.3-0.5μ M，Na2MoO4·2H2O 0 .1-0 .3μM，EDTA-Fe-Na 40-60μM，烟酸0.3-0 .6μM，三七提取物80- 100mg。 进一步，所述黄芪种子选自蒙古黄芪种子或膜荚黄芪种子，所述水为灭菌自来水； 进一步，所述步骤(2)中MS培养基进行预先灭菌处理，所述灭菌处理为加常规加压 高温处理； 进一步，所述步骤(3)中三七提取物为三七的水、或乙醇的提取物，制备方法为取 适量三七根，加入3-4倍重的水或浓度70-80％的乙醇水溶液，加热回流3-4h，过滤；将滤液 冷冻干燥后制备得到三七提取物； 进一步，所述步骤(3)中蓝光和黄光交替间隔施加，间隔周期24h。 本发明具有以下有益效果： (1)具有高的萌芽率：本发明通过将黄芪种子进行高浓度乙醇浸泡和超声处理，以 及变温处理，使得种皮外的致密细胞层和果胶类物质发生变性，提高通透性，在培养当天即 可发芽，在8-12天时萌芽率可达97％以上； (2)具有高的幼苗成活率：本发明通过施加高浓度乙醇、以及5-8％的次氯酸钠溶 液或1％的升汞溶液，以及选用无菌水，和对培养基进行灭菌处理，提供一种无菌的生长环 境，极大了提高了幼苗的成活率，防止细菌的污染； (3)生长周期短：本发明通过合理调整营养液的组成和配比，特别是烟酸和三七提 取物的加入使得黄芪根部生长速度加快，根系发达，能够快速达到移栽标准； (4)具有高的黄芪黄酮含量：本发明通过合理调整营养液的组成和配比，同时辅助 以光照，能够保证黄芪幼苗的稳定和快速生长，且通过施加蓝光或黄光，特别是进一步降低 蓝光和黄光交替间隔施加能够有效的促进黄酮类化合物的快速积累。
