技术摘要：
本发明公开了人血管内皮细胞抑制因子VEGI‑251在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明发现VEGI‑251具有高效靶向并诱导TAM凋亡而促进机体抗肿瘤免疫的生物学功能，并阐明其通过激活TAM细胞内ASK1/JNK信号转导而诱导凋亡，从而具有高效抗肿瘤活性应用。显示VEGI‑251可以成为  全部
背景技术：
肿瘤的血管新生和肿瘤相关巨噬细胞的聚集都是肿瘤重要的恶性表型，可用于肿 瘤患者不良生存预后的判断标志。同时，抗血管新生和抗肿瘤免疫治疗往往具有高效、高选 择、低毒及低耐药的优点，为当前肿瘤治疗研究的两个重大主题。 血管内皮生长抑制因子(Vascular  endothelial  growth  inhibitor,VEGI)是一 种新近发现的抗血管生成因子，属于肿瘤坏死因子(tumour  necrosis  factor,TNF)超家 族。VEGI至少包括三种可变剪接体：VEGI-174，VEGI-192和VEGI-251。目前研究表明VEGI具 有的生物学功能包括：抑制血管新生、抗肿瘤活性、参与机体免疫调节、参与免疫炎症反应 性疾病早期进展。基于VEGI蛋白家族在抑制血管新生及机体免疫调节的双向生物学功能， 深入研究VEGI蛋白的在抗肿瘤血管新生及抗肿瘤免疫两个方面的新功能及新机制，对于 VEGI蛋白的临床转化研究具有极其重要的科学意义。 肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated  macrophages,TAMs)由机体循环系统中的 不成熟单核细胞活化而来，生物学特性类似于M2型巨噬细胞。肿瘤相关巨噬细胞可抑制机 体的抗肿瘤免疫应答，并可分泌肿瘤生长因子、促血管生长因子和降解细胞外基质的蛋白 水解酶，参与了肿瘤的发生、生长、血管新生、侵袭和转移等多种生物学过程。肿瘤相关巨噬 细胞和患者不良生存预后之间的存在密切的关联性，其浸润程度、激活类型和组织学定位 已作为判断多种肿瘤患者生存预后的标志物。特异性靶向TAM的抗肿瘤免疫治疗，已成为肿 瘤防治研究领域的热点方向，为抗肿瘤靶向性治疗提供了新策略和新方向。
技术实现要素：
本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供VEGI作为肿瘤相关巨噬细胞的抑 制剂在抗肿瘤药物中的应用。 本发明的一个目的是提供VEGI-251在制备治疗抗肿瘤免疫药物中的应用。 本发明的另一个目的是提供VEGI-251在制备肿瘤相关巨噬细胞抑制剂中的应用。 为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的： VEGI-251表达的蛋白产物含有251位氨基酸残基，Gene  ID:9966，GenBank:NM_ 005118.4。本发明证实VEGI-251具有诱导肿瘤相关巨噬细胞凋亡的生物学功能，显示其可 以作为新型抗肿瘤免疫制剂的药物应用。 具体地，本发明中，采用小鼠同种移植瘤模型，证明VEGI-251蛋白对小鼠肝癌皮下 同种移植瘤的生长具有显著的抑制作用，并且采用流式细胞术证明VEGI-251能够较强抑制 荷瘤小鼠体内TAM的产生。以荷瘤小鼠内原代培养TAM为模型，采用免疫印迹技术证明了 3 CN 111569051 A 说　明　书 2/7 页 VEGI-251能够较强诱导TAM的凋亡。通过免疫印迹技术、免疫共沉淀技术阐明VEGI-251诱导 TAM凋亡的分子机制：VEGI-251通过与DR3受体结合，招募TRAF2和ASK1蛋白形成复合体，而 激活ASK1激酶，进而激活下游的JNK通路，活化的c-Jun转录激活促凋亡蛋白的表达，诱导 TAM细胞的凋亡，促进机体抗肿瘤免疫，结合其抗肿瘤血管新生的双效应，从而实现高效抗 肿瘤功能。 因此本发明要求保护以下内容： VEGI-251在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。 优选地，所述抗肿瘤药物靶向肿瘤相关巨噬细胞。 VEGI-251在制备肿瘤相关巨噬细胞抑制剂中的应用。 优选地，所述肿瘤相关巨噬细胞抑制剂为肿瘤相关巨噬细胞的凋亡诱导制剂。 本发明所提供的VEGI-251作用于机体内异常的巨噬细胞，参与机体病理条件下免 疫调节的功能及机理。重点性阐明VEGI的抗肿瘤免疫活性，将揭示VEGI通过诱导TAM凋亡而 促进机体抗肿瘤免疫的新功能，显示VEGI可以成为TAM靶向性抗肿瘤免疫分子治疗的一个 新靶点。 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： 本发明发现VEGI蛋白具有诱导肿瘤相关巨噬细胞凋亡的新功能，而促进机体抗肿 瘤免疫，结合其肿瘤血管新生抑制剂的功效，从而实现高效抗肿瘤功能。这显示VEGI可以成 为肿瘤相关巨噬细胞靶向性分子治疗的一个新分子。同时，发现VEGI(以VEGI-251为主)的 抗肿瘤免疫分子机制：VEGI-251通过与TAM细胞膜上的DR3受体直接结合，招募TRAF2和ASK1 蛋白形成复合体，直接激活ASK1激酶，进而激活下游的JNK信号传导通路，最终活化的c-Jun 转录激活促凋亡蛋白Puma的表达，诱导肿瘤相关巨噬细胞的凋亡。这将为首创性发现VEGI- 251能与重要的凋亡相关激酶ASK1结合形成复合体并使其活化，从信号转导最上游至最下 游，揭示了VEGI-251诱导细胞凋亡的分子机制和通路。 本发明发现VEGI-251具有高效靶向并诱导TAM凋亡而促进机体抗肿瘤免疫的生物 学功能，并阐明其通过激活TAM细胞内ASK1/JNK信号转导而诱导凋亡，从而具有高效抗肿瘤 活性应用。显示VEGI-251可以成为TAM靶向性抗肿瘤免疫分子治疗的一个新靶点，为抗肿瘤 药物的开发提供科学理论依据，并为临床抗肿瘤治疗提供新思路，具有重要的学术意义和 潜在的临床应用价值。 附图说明 图1为采用小鼠同种移植瘤模型并结合流式细胞术证明VEGI-251蛋白能够较强抑 制荷瘤小鼠体内TAM的产生的结果图。 图2为采用免疫印迹技术证明VEGI-251能够较强诱导TAM的凋亡的结果图。 图3为采用免疫共沉淀技术证明VEGI-251通过与DR3受体结合，招募TRAF2和ASK1 蛋白形成复合体的结果图。 图4为采用免疫印迹技术VEGI-251通过活化ASK1而激活其下游信号转导而诱发 TAM细胞凋亡的结果图。 4 CN 111569051 A 说　明　书 3/7 页